最新噬菌体侵染细菌的实验教学内容.ppt

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时间:2021-05-16

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1、林忆莲的小眼睛是母亲遗传的祖孙三代的鼻子中国专家协助泰国辨认海啸遇难者身份DNA鉴定仪器DNA指纹法第3章基因的本质宣化一中孙慧小鼠死亡小鼠____S型加热+R型活菌加热杀死S型无毒R型活菌有毒S型活菌格里菲思体内转化实验1234小鼠____,且分离出___型活菌小鼠不死亡结论1:加热杀死的S型细菌中有一种“_________”能使R型活细菌转化为S型活细菌。死亡不死亡转化因子SS型菌R型细菌R型细菌只长R型菌只长R型菌R型细菌R型细菌S型菌的DNAS型菌的蛋白质或荚膜多糖S型菌的DNA+DNA

2、酶艾弗里体外转化实验结论2:“转化因子”是_____,____才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。DNADNA﹖限于实验的条件和技术的手段,艾弗里提取的DNA,纯度最高时也还有0.02%的蛋白质。有人质疑:有没有可能是DNA上仍沾有的0.02%的蛋白质是转化因子呢?﹖﹖﹖那么要怎样设计才能让人无可挑剔呢?二、噬菌体侵染细菌的实验赫尔希蔡斯1、成分只有蛋白质,DNA2、仅能在大肠杆菌内繁殖。为什么选择T2噬菌体作为实验材料?3-4尾部头部DNA蛋白质二、噬菌体侵染细菌实验(一)选材:噬菌体实验设

3、计思路在证明DNA还是蛋白质是遗传物质的实验中最关键的设计思路是什么?把DNA和蛋白质完全分开,单独观察DNA和蛋白质的作用…所以,要证明噬菌体里面蛋白质和DNA谁是遗传物质,只需证明:噬菌体要将谁导入细菌体内?谁在亲子代之间有连续性?如何把DNA与蛋白质分开,单独地直接去观察它们的作用并追踪它们的去向?同位素标记法可追踪物质的运动和变化规律1、应标记那种元素呢?2、如何标记T2噬菌体?能否直接用培养基培养T2噬菌体?3、能不能只做一组实验同时标记噬菌体的DNA和蛋白质?4、标记好的噬菌体侵染什

4、么样的细菌,是带标记的还是没有标记的?问题探讨DNA:P蛋白质:ST2噬菌体中,仅蛋白质中含有S元素,而P元素几乎都存在于DNA分子中。DNA的组成元素:蛋白质的组成元素:C、H、O、N、PC、H、O、N、S(二)方法:放射性同位素标记法32P35S32P35S培养基大肠杆菌大肠杆菌含35S含32PT2噬菌体T2噬菌体子代T2噬菌体子代T2噬菌体35S标记蛋白质32P标记DNA(三)实验步骤:先标记_______再标记_______已标记的______侵染未标记的_________搅拌、离心观察

5、放射性的分布(一组用32P标记DNA,一组用35S标记蛋白质)噬菌体大肠杆菌噬菌体大肠杆菌短时间保温离心离心预期实验现象?(四)预期实验现象:注入的物质用35S的噬菌体侵染大肠杆菌用32P的噬菌体侵染大肠杆菌只注入蛋白质只注入DNA同时注入蛋白质和DNA上清液无放射性沉淀物有放射性上清液有放射性沉淀物无放射性上清液有放射性沉淀物无放射性上清液无放射性沉淀物有放射性上清液无放射性沉淀物有放射性上清液无放射性沉淀物有放射性实验结果究竟是怎样的呢?35S标记的噬菌体32P标记的噬菌体被标记的噬菌体与细

6、菌混合搅拌离心上清液放射性很高沉淀物放射性很低离心上清液放射性很低沉淀物放射性很高被标记的噬菌体与细菌混合搅拌离心离心新形成的噬菌体--未检测到35S新形成的噬菌体中检测到32P亲代T2噬菌体子代T2噬菌体用32P标记_____放射性很高用35S标记_____第一组放射性很高(有、无)32P(有、无)35S第二组蛋白质DNA√√(五)噬菌体侵染细菌实验的结果分析实验表明:噬菌体侵染细菌时,_________进入细菌的细胞中,而____________仍留在外面。因此,子代噬菌体的各种性状,是通过

7、亲代的_______遗传的。_______才是噬菌体的遗传物质。DNA分子蛋白质外壳DNADNA放射性检测上清液沉淀物噬菌体侵染细菌的实验表明:在噬菌体中,亲代和子代之间具有连续性的物质是DNA,而不是蛋白质,也就是说,子代噬菌体的各种性状是通过亲代的DNA遗传给后代的,因此DNA才是真正的遗传物质。思考:此实验还能获得哪些推论?噬菌体侵染细菌的过程:侵入别的细菌注入合成吸附组装释放吸附注入合成组装释放35S标记的噬菌体搅拌离心上清液放射性很高沉淀物放射性很低1、用35S标记噬菌体的一组实验,沉

8、淀物中也有少量放射性,这是为什么?(六)实验结果中放射性物质分析:提示:搅拌不充分,有少量35S标记的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。2、用32P标记噬菌体的一组实验,上清液中有少量放射性,原因是:(六)实验结果中放射性物质分析:原因分析①保温时间过短部分噬菌体来不及侵染到大肠杆菌细胞内,离心后分布于上清液中②保温时间过长大肠杆菌裂解,释放子代噬菌体,离心后分布于上清液离心上清液放射性很低沉淀物放射性很高32P标记的噬菌体搅拌短时间保温DNA是遗传物质1944年艾弗里——体

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