赤芝菌体中三萜抑菌作用研究

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1、赤芝菌体中三茄抑菌作用研究刘高强章春莲彭广生【摘要】目的检测赤芝发酵菌体中三菇对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽狗杆菌和黑曲霉和青霉的体外抑菌活性。方式管碟法。结果赤芝菌体三菇化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长均具有显著抑制作用；对枯草芽狗杆菌、青霉和黑曲霉抑制作用较弱；该三葩样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、黑曲霉和青霉的最小抑菌浓度别离为25,25,50,100和50mg/ml。结论赤芝发酵菌体中三菇对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽泡杆菌和青霉有明显的抑制作用。【关键词】赤芝菌体三菇抑菌作用最小抑菌浓度赤芝Ganodemaluci

2、dum,通常称为“灵芝”，是灵芝属最宝贵的药用真菌，具有很高的保健和药用价值。我国古代称其子实体为“仙草”。《中国药典》规定，赤芝和紫芝Ganodermasinense为灵芝正品［l］o目前卫生部也己批准灵芝为食物新资源；《美国草药药典与医治概要》也正式收载了灵芝［21灵芝的研究已取得亚洲诸多国家和加拿大、美国和部份欧洲国家的重视［1〜6］。现代药理学和营养学证明赤芝的关键有效成份是多糖类化合物和三菇类化合物［1〜8］。赤芝三菇是最近几年来发觉的灵芝中除多糖及肽类外又一种具有明显药理活性的化合物，有止痛、镇定、抑制组织胺释放、解毒、保肝、毒杀肿瘤等功能

3、［5〜8］。目前国内外以赤芝多糖为要紧有效成份的产品为主，而赤芝三葩类产品的开发较晚。目前赤芝三菇的生产技术要紧包括从野生或人工栽培的灵芝子实体中提取，和从泡子和发酵培育物中提取。但由于液体深层发酵技术具有不受季节限制、生产周期短、质量易操纵等特点，通过发酵技术生产赤芝三菇已是目前最普遍的方式［9］。最近几年来，赤芝三菇的药理作用取得了普遍研究，但其抗菌作用的报导较少，作者最近几年来陆续研究了赤芝菌丝体、发酵液中三菇的抑菌作用。本文那么报导赤芝菌丝体中三葩类化合物的抑菌活性。1材料与方式菌种赤芝Ganodermalucidum,大肠杆菌E.coli,金

4、黄色葡萄球菌Staphylococcalaures,枯草芽狗杆菌Bacilllussubtitis,黑曲霉Aspergillusniger和青霉Penicilliumchrysogenum^均由我校生物工程实验室提供。赤芝发酵培育基组成：葡萄糖20g/L,蛋白陈4g/L,g/L,MgS04g/Lo培育条件：在28℃,140r/min下培育7do赤芝菌体三菇的制备菌体冷冻干燥后，研成40目左右的粉末,用50%(V/V)乙醇回流提取4h,离心后取得上清液，旋转蒸发器上完全去除乙醇，补适量水后，再加入适量氯仿于分液漏斗中萃取，反复萃取3次后，归并氯仿层，挥去

5、氯仿后，用正丁醇溶解萃取物，挥去正丁醇，再用无水乙醇振荡提取后作为样品。抑菌实验方式抑菌实验采纳管碟法，混菌平板制好后，用无菌镜子取无菌牛津杯置于混菌平板上，杯中加满试样，细菌培育培育20h,霉菌培育48h后，测量抑菌圈的直径［10,11］。最小抑菌浓度的确信采纳试管持续稀释法。2结果在体外测试了各样品在不同浓度下对几种微生物生长的抑制作用(见表1)。由表1可见，赤芝菌体三葩对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用，而对枯草芽泡杆菌、黑曲霉和青霉的抑制作用较弱。在赤芝菌体三菇浓度为60mg/ml时，样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽泡杆菌

6、、黑曲霉和青霉的抑菌圈直径别离为…mm和mm。提示该赤芝菌体三菇对大肠杆菌的抑制作用最强，而对枯草芽狗杆菌和霉菌的抑制作用较弱。为了测试赤芝菌体三菇对这5种菌的最小抑菌浓度，咱们采纳试管持续双倍稀释法，将样品以2倍的稀释梯度进行了处置，然后测试各浓度下的抑菌作用。表2为采纳试管持续双倍稀释法测定赤芝菌体三菇对5种菌的最小抑菌浓度的实验结果。由表2中能够看出，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在赤芝菌体三葩浓度低于25mg/ml时，仍然能够生长，但当赤芝菌体三菇浓度达到25mg/ml以上时，再也不生长,说明该赤芝菌体三葩对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2

7、5mg/ml。而枯草芽抱杆菌和青霉在赤芝菌体三菇浓度达到50mg/ml时，再也不生长，因此，该赤芝菌体三葩对枯草芽泡杆菌和青霉的最小抑菌浓度为50mg/ml。对黑曲霉的抑制作用最弱，只有当浓度达到100mg/mlW，才能完全抑制其生长，即对黑曲霉的MIC为100mg/ml。表1赤芝菌体三菇的抑菌作用表2赤芝菌体三菇的最小抑菌浓度实验结果3讨论灵芝是我国十分名贵的药用真菌，赤芝是灵芝中药理作用最强、被研究最普遍的一种，是灵芝的代表。赤芝自古就对慢性支气管炎和哮喘有必然的疗效，故推测赤芝具有抗菌作用。《中药大辞典》［12］记载，赤芝水提物浓度在125〜50

8、0mg/ml时对肺炎球菌、甲型链球菌、白色葡萄球菌等有必然的抑制作用。王帮武等［13］的研究说