水稻根际固氮菌促生特点评论

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1、水稻根际固氮菌促生特点评论第7页共7页免责声明：图文来源网络征集，版权归原作者所有。若侵犯了您的合法权益，请作者持权属证明与本站联系，我们将及时更正、删除！谢谢！植物根际促生细菌(plantgrowth-promotingrhizobacteria，简称PGPR)指存在于植物根际的能促进植物生长的细菌，具有固氮、解磷、产铁载体及分泌植物激素等生理活性，不仅能够促进植物生长，增加作物产量，还具有生物防治作用[1]，因而成为许多学者研究微生物肥料的热点对象。目前，RanjanPatra等研究鹰嘴豆根际促生菌的分类和促生特性，发现45%的根际促生菌属于固氮菌属，而且有些菌株

2、同时具有2种或3种PGP（plantgrowth-promoting）特性[2]。Akhtar等研究PGPR菌株对扁豆的促生作用，发现PGPR菌株能够抑制致病菌的生长而有效的促进扁豆生长[3]。康贻军等阐述了PGPR菌株诱导体系抗性和诱导体系产生忍耐力两大促生机制[4]。部分PGPR可分泌有机酸溶解难溶磷酸盐，或分泌胞外磷酸酶降解有机磷，提高土壤中水溶性磷的浓度，有效地促进植物的生长[5]。铁是生物的必需元素，某些PGPR能合成各种对铁具有高亲和力的铁载体来螯合环境中的铁，供给植物细胞利用，改善植物的铁营养，防治碱性缺铁土壤植物缺铁失绿症的发生[6-7]。PGPR产生

3、的铁载体可与植物根际病原微生物争夺有限的铁营养，抑制病原微生物的生长，起到生物防治作用。许多PGPR可合成生理活性化合物，促进植物生长发育，或调控植物其他生命活动。植物生长激素（IAA）是由植物根际细菌产生的、研究最广泛的植物激素，可增加根的长度，刺激根毛的增生和延伸，促进植物的生长和发育。对分泌IAA的细菌进行研究，有利于将植物促生菌应用于农业生产[8-9]。本试验对分离自水稻根际的具有高效固氮、解磷、产铁载体等功能的固氮菌[10]进行分类和培养，接种菌株到水稻幼苗根部，研究它们的促生特性，以期为特异性微生物肥料的开发利用提供试验依据。 1材料与方法 1.1材料 1

4、.1.1试验菌株固氮菌（Azotobacterspp.）16株菌株可与水稻凝集素反应，对水稻根系具有一定亲和性，由安徽农业大学微生物实验室分离保藏[10]。 1.1.2水稻种子徐旱一号由安徽农业大学农学院提供。 1.1.3试验培养基Hoagland半固体培养基、Ashby培养基、解磷培养基[10]、MKB液体培养基[11]、产生长激素IAA培养基[12]。 1.1.4实验设备FOSSKjeltec8400全自动凯氏定氮仪；JA1103电子天平；LG10-2.4A高速离心机；VIS-7220型可见分光光度计。 1.2方法 1.2.1菌落形态特征观察菌株菌液在Ashby固

5、体培养基上稀释涂平板、斜面上划线培养3d，观察各菌落形态特征。 1.2.2菌株生理生化特征研究[13]挑取各菌株单菌落，进行以下生理生化试验：革兰氏染色试验、芽孢染色试验、葡萄糖发酵试验、需氧试验、乙醇氧化试验、固氮试验、接触酶试验和类脂粒试验。 第7页共7页免责声明：图文来源网络征集，版权归原作者所有。若侵犯了您的合法权益，请作者持权属证明与本站联系，我们将及时更正、删除！谢谢！1.2.3土壤栽培水稻幼苗在100mL小烧杯中加进100g土壤并灭菌，将水稻种子催芽后移栽至烧杯中，室外自然条件下积水培养3d得到成活的健康幼苗，将各菌株菌液按1%的接种量接种到水稻幼苗根部

6、；在室外自然条件下培养30d；测定各类生长数据。 1.2.4半固体培养基培养水稻幼苗取Hoagland半固体培养基60mL于30mm×180mm试管中，无菌操作将催芽3d的水稻幼苗移栽试管中，3000lx光照培养箱中28℃培养15d，测定各类生长数据。 1.2.5菌株固氮能力测定Ashby培养基培养菌体，采用FOSS全自动凯氏定氮仪测定培养物中的全氮含量（参照FOSS程序）。 1.2.6菌株溶磷能力测定[14]取4mL解磷培养基分装至试管中，接种固氮菌株，28℃160r•min-1摇床培养7d；取菌悬液至10mL离心管中，5000r•min-1离心15min；取1mL

7、上清液到另10mL离心管中，加2mL水，加入1mL1mol•L-1H2SO4，再加1mL铁-钼酸试剂；混匀后反应15min，测定OD660。 1.2.7菌体产铁载体能力测定采用MKB液体培养基培养各菌株，用CAS法[11]检测菌株合成铁载体能力，测定680nm波长[15]处的吸光值(A)；另取2mLCAS检测液与2mL未接种的MKB液体培养基上清液充分混匀，同法测定的吸光值即为参比值(Ar)；数据处理，计算A/Ar值，参照标准得到结果。 1.2.8菌株分泌生长激素IAA能力测定参考文献[12]测定菌株分泌生长激素IAA能力。 2结果与分析 第7页共7