补骨脂平喘作用分析论文

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1、补骨脂平喘作用分析论文1材料与仪器 1.1动物 SD大鼠,70只,SPF级,雌雄各半,180g左右,合格证号:0012625,由广州中医药大学实验动物中心提供。 1.2试剂 卵白蛋白批号:970612上海化学试剂公司;氢氧化铝干粉批号:20020301-2广州化学试剂厂;灭活百日咳杆菌(100亿个/ml)广东省中医院提供;大鼠IL-4(批号20060620)、IFN-γ(批号20060620)ELISA试剂盒由晶美生物工程有限公司提供;IL-5(批号20983008)ELISA试剂盒由BanderMedsystems提供。 1.3补骨脂不同溶剂提取

2、物补骨脂95%乙醇提取物浸膏,浓度:3.45g药材/ml(简称浸膏);补骨脂95%乙醇提取石油醚萃取物,浓度:10.0g药材/ml(简称石油醚萃取物);补骨脂95%乙醇提取醋酸乙酯萃取物,浓度:6.67g药材/ml(简称醋酸乙酯萃取物);补骨脂95%乙醇提取水萃取物,浓度:10.0g药材/ml(水萃取物);补骨脂水提取物,浓度:10.0g药材/ml(简称水提取物);补骨脂95%乙醇提甲醇洗脱物,浓度:2g药材/ml(简称甲醇洗脱物),以上试剂均由广州中医药大学中药学院提供。 1.4仪器酶标仪BIO-RADSModel550,日本;CSW-Ⅰ型超声雾

3、化器汕头光电研究所;10L玻璃干燥器。 第7页共7页免责声明:图文来源网络征集,版权归原作者所有。若侵犯了您的合法权益,请作者持权属证明与本站联系,我们将及时更正、删除!谢谢!2方法 2.1分组 将动物随机分成7组,10只/组:哮喘模型组(给水,1.0ml/100g)、浸膏组(药材0.9g/100g)、石油醚萃取物组(药材2.5g/100g)、醋酸乙酯萃取物组(药材1.7g/100g)、水萃取物组(药材2.5g/100g)、水提取物组(药材10.0g/100g)、甲醇洗脱物组(药材2.5g/100g)。以上各组动物连续灌胃给药治疗10次,1次/d。

4、末次治疗后2h,各组动物心脏采血5ml,1000r/min离心15min,血清分装(1ml/管)保存于-70℃低温冰箱内待测:IL-4,IFN-γ,IL-5(严格按照ELISA试剂盒说明书分别检测)。 2.2卵蛋白哮喘大鼠模型的建立 2.2.1大鼠致敏 上述分组中每只动物腹腔注射抗原液0.5ml/100g(含卵蛋白100mg、氢氧化铝干粉100mg和2.5×109个百日咳杆菌/ml,制成悬浊液)[7]致敏第1次,次日每只大鼠再次腹腔注射0.5ml/只致敏液加强。 2.2.2激发和治疗 第7页共7页免责声明:图文来源网络征集,版权归原作者所有。若侵犯

5、了您的合法权益,请作者持权属证明与本站联系,我们将及时更正、删除!谢谢!首次致敏后第15天,于每天上午8~9时大鼠置于10L玻璃干燥器内超声雾化吸入2%卵蛋白20min激发哮喘,连续14d。激发后第4天起,于每天激发后大鼠口服给相应试剂治疗(见“2.1实验分组”)。正常组以生理盐水取代抗原液按0.5ml/100g腹腔注射致敏大鼠,第2天以0.5ml/只腹腔注射生理盐水加强;首次致敏后第15天,每天上午8~9时该组大鼠超声雾化吸入生理盐水20min激发哮喘,连续14d。激发后第4天起,于每天激发后大鼠口服给蒸馏水治疗。 2.3统计分析结果 采用四川大

6、学黄志勇主编的(PEMS3.0)《中国医学百科全书·医学统计学》统计软件包进行统计:两组均数比较t检验(方差齐)或t′(方差不齐)。 3结果 3.1补骨脂不同溶剂提取物对哮喘大鼠IL-5含量的影响结果见表1。由表1可见,大鼠服用补骨脂不同溶剂提取物后,血清IL-5含量呈下降趋势,其中补骨脂浸膏、水萃取物、水提取和甲醇洗脱物各成分组大鼠血清IL-5含量降低明显,与哮喘模型组比较P0.05,无显著性差异。 3.2补骨脂不同溶剂提取物对哮喘大鼠IL-4含量的影响结果见表1。由表1可见,大鼠服用补骨脂不同溶剂提取物后,血清IL-4含量呈升高趋势,其中补骨脂

7、浸膏、石油醚萃取物和水提取物各成分组大鼠血清IL-4含量升高明显,与哮喘模型组比较P0.05,无显著性差异。 第7页共7页免责声明:图文来源网络征集,版权归原作者所有。若侵犯了您的合法权益,请作者持权属证明与本站联系,我们将及时更正、删除!谢谢!3.3补骨脂不同溶剂提取物对哮喘大鼠IFN-γ含量的影响结果见表1。由表1可见,大鼠服用补骨脂不同溶剂提取物后,不同溶剂成分大鼠血清IFN-γ含量升降不一致,其中补骨脂浸膏和石油醚萃取物两成分组大鼠血清IFN-γ含量升高明显,与哮喘模型组比较P0.05,无显著性差异。表1不同提取物对哮喘大鼠IL-5,IL-

8、4,IFN-γ含量的影响(略) 3.4补骨脂不同溶剂提取物对哮喘大鼠Th1/Th2(IFN-γ/IL-5)的影响哮喘模型组

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