生物分离技术试题库带答案

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.-题库名称：生物别离技术一、名词解释1．质量作用定律：化学反响的速率与参加反响的物质的有效质量成正比。2．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。3．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，到达平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。4．枯燥速率：枯燥时单位枯燥面积，单位时间漆画的水量。5．CM-SephadexC-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。6．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程7．过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液别离的常用方法之一。8．萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分〔包括目的产物〕溶解度的不同，从而到达别离的目的9．吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂外表的过程。10．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。11．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液别离12．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质外表，从而实现固液别离，是离心与过滤单元操作的集成，别离效率更高13．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待别离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用适宜的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，到达别离的目的。14．固相析出技术：利用沉析剂〔precipitator〕使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。15．助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤16．沉降：是指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉，这一过程成为沉降..word.zl- .-17．色谱技术：是一组相关别离方法的总称，色谱柱的一般构造含有固定相〔多孔介质〕和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同〔由于亲和力差异〕，经过屡次分配〔吸附-解吸-吸附-解吸…〕，到达别离的目的。18．有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中参加一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。19．等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。20．膜别离：利用膜的选择性〔孔径大小〕，以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现别离的一种技术。21．化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、外表活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞壁或细胞膜的通透性，从而使胞物质有选择地渗透出来。22．超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。23．临界胶团浓度：将外表活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团的最小浓度称为临界胶团浓度，它与外表活性剂种类有关。24．反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液到达浓缩的效果，这种操作成为反渗透。25．乳化液膜系统：乳化液膜系统由膜相、外相和相三相组成，膜相由烷烃物质组成，最常见的外相是水相，相一般是微水滴。26．树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在充填柱上操作到达漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。27．色谱阻滞因数：溶质在色谱柱〔纸、板〕中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。28．胶团：两性外表活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发地向聚集而成的，含微小水滴的，空间尺度仅为纳米级的集合型胶体。29．膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。30．超滤：但凡能截留相对分子量在500以上的高分子膜别离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。..word.zl- .-31.生物别离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物〔发酵液、培养液〕及其生物化学产品中提取、别离、纯化有用物质的技术过程。32.离心别离技术：是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的别离过程。33．物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间到达分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反响。34．化学萃取：那么利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反响生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。35．盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中参加一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的别离技术。36．有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的别离技术称为有机聚合物沉析。37．微孔膜过滤：又称“精细过滤〞，是最近20多年开展起来的一种薄膜过滤技术，主要用于别离亚微米级颗粒，是目前应用最广泛的一种别离分析微细颗粒和超净除菌的手段。38．离子交换平衡：当正反响、逆反响速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。39．功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团40．平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。41．两性树脂：同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂42．转型：即按照使用要求人为地赋予树脂平衡离子的过程。43．洗脱：利用适当的溶剂，将树脂吸附的物质释放出来，重新转入溶液的过程。44．树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反响是交换吸附的逆反响。45．层析别离：是一种物理的别离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差异，使各组分以不同的程度分布在两个相中。46．流动相：在层析过程中，推动固定相上待别离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。..word.zl- .-47．正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。48．反相色谱：是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。49．吸附层析：是以吸附剂为固定相，根据待别离物与吸附剂之间吸附力不同而到达别离目的的一种层析技术。50．分配层析：是根据在一个有两一样时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而到达别离目的的一种层析技术。51．凝胶过滤：层析是以具有网状构造的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进展别离的一种层析技术。52．离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进展别离的一种层析技术。53．高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相，并配有实时在线检测器，实现色谱别离过程全部自动化的液相色谱法。54．亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进展的层析方法。是近年来开展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。55．疏水层析：是利用外表偶联弱疏水性基团〔疏水性配基〕的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差异进展别离纯化的层析技术。56．介电常数：表示介质对带有相反电荷的微粒之间的静电引力与真空比照减弱的倍数。57．过滤介质：是指能使固一液混合料液得以别离的某一介面，通常指滤布或膜过滤中所用的膜。58．等电点：是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零，分子间排斥电位降低，吸引力增大，能相互聚集起来，沉淀析出，此时溶质的溶解度最低。59．有机酸沉析：含氮有机酸〔如苦味酸和鞣酸等〕能够与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。60．选择变性沉析：是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同，而有选择地使之变性沉析，以到达目的物与杂蛋白别离的技术，称为选择变性沉析。二、选择..word.zl- .-1．HPLC是哪种色谱的简称〔C〕。A．离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱2．针对配基的生物学特异性的蛋白质别离方法是〔C〕。A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析3．盐析法沉淀蛋白质的原理是〔B〕A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点4．从组织中提取酶时，最理想的结果是〔C〕A.蛋白产量最高B.酶活力单位数值很大C.比活力最高D.Km最小5．适合于亲脂性物质的别离的吸附剂是〔B〕。A．活性炭B.氧化铝C.硅胶D.磷酸钙6．以下哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？〔B〕A.该酶的活力高B..对底物有高度特异亲合性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高E.酶具有多个亚基7．用于蛋白质别离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是〔C〕A．离子交换色谱B.亲和色谱C.凝胶过滤色谱D.反相色谱45．适合小量细胞破碎的方法是〔B〕高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法8．盐析法沉淀蛋白质的原理是〔B〕A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点9．蛋白质分子量的测定可采用〔C〕方法。A．离子交换层析B.亲和层析C.凝胶层析D.聚酰胺层析10．基因工程药物别离纯化过程中，细胞收集常采用的方法〔C〕A．盐析B.超声波C.膜过滤D.层析..word.zl- .-11．氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的〔A〕性质。A.溶解度和等电点B.分子量C.酸碱性D.生产方式12．离子交换剂不适用于提取〔D〕物质。A．抗生素B.氨基酸C.有机酸D.蛋白质13．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向〔A〕A：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。14．蛋白质具有两性性质主要原因是〔B〕A：蛋白质分子有一个羧基和一个氨基；B：蛋白质分子有多个羧基和氨基；C：蛋白质分子有苯环和羟基；D：以上都对15．使蛋白质盐析可参加试剂〔D〕A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵16．凝胶色谱别离的依据是〔B〕。A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同17．非对称膜的支撑层〔C〕。A、与别离层材料不同B、影响膜的别离性能C、只起支撑作用D、与别离层孔径一样18．以下哪一项为哪一项强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团〔A〕A磺酸基团〔-SO3H〕B羧基-COOHC酚羟基C6H5OHD氧乙酸基-OCH2COOH19．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对以下离子亲和力排列顺序正确的有〔A〕。A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+C、Na+﹥Rb+﹥Cs+D、Rb+﹥Cs+﹥Na+20．乳化液膜的制备中强烈搅拌〔C〕。A、是为了让浓缩别离充分B、应用在被萃取相与W/O的混合中..word.zl- .-C、使相的尺寸变小D、应用在膜相与萃取相的乳化中21．结晶过程中，溶质过饱和度大小〔A〕。A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度22．如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用〔D〕。A、SephadexG-200B、SephadexG-150C、SephadexG-100D、SephadexG-5023．在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法〔C〕。A、双水相萃取B、超临界流体萃取C、有机溶剂萃取D、反胶团萃取24．在液膜别离的操作过程中，〔B〕主要起到稳定液膜的作用。A、载体B、外表活性剂C、增强剂D、膜溶剂25．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过〔A〕将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。A、静电作用B、疏水作用C、氢键作用D、德华力26．真空转鼓过滤机工作一个循环经过〔A〕。A、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区B、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区C、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区D、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区27．丝状〔团状〕真菌适合采用〔A〕破碎。A、珠磨法B、高压匀浆法C、A与B联合D、A与B均不行28．用来提取产物的溶剂称〔C〕。A、料液B、萃取液C、萃取剂D、萃余液。29．阴离子交换剂〔C〕。A、可交换的为阴、阳离子B、可交换的为蛋白质C、可交换的为阴离子D、可交换的为阳离子30．分配层析中的载体〔C〕。..word.zl- .-A、对别离有影响B、是固定相C、能吸附溶剂构成固定相D、是流动相31．凝胶色谱别离的依据是〔B〕。A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同32．洗脱体积是〔C〕。A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶部的体积C、与该溶质保存时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积33．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且防止设备腐蚀，一般先将其转变为〔B〕。A、钠型和磺酸型B、钠型和氯型C、铵型和磺酸型D、铵型和氯型34．吸附色谱别离的依据是〔A〕。A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同35．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对以下离子亲和力排列顺序正确的有〔A〕。A、Fe3+>Ca2+>Na+B、Na+>Ca2+>Fe3+C、硫酸根>柠檬酸根>硝酸根D、硝酸根>硫酸根>柠檬酸根36．乳化液膜的制备中强烈搅拌〔B〕。A、是为了让浓缩别离充分B、应用在被萃取相与W/O的混合中C、使水相的尺寸变小D、应用在膜相与反萃取相的乳化中37．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法〔A〕。A.亲和层析B.凝胶层析C.离子交换层析D.盐析38．纯化酶时，酶纯度的主要指标是：〔D〕..word.zl- .-A.蛋白质浓度 B.酶量C.酶的总活力 D.酶的比活力39．盐析法纯化酶类是根据〔B〕进展纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法40．分子筛层析纯化酶是根据〔C〕进展纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法41．以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力〔B〕A.重力B.压力C.浮力D.阻力42．以下哪项不是颗粒在离心力场中受到的力〔C〕A.离心力B.向心力C.重力D.阻力43．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度〔A〕A.越小B.越大C.不变D.无法确定44．工业上常用的过滤介质不包括〔D〕A.织物介质B.堆积介质C.多孔固体介质D.真空介质45．以下物质属于絮凝剂的有〔A〕。A、明矾B、石灰C、聚丙烯类D、硫酸亚铁46．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，以下〔A〕项是正确的表达。A、氢键形成是能量释放的过程，假设两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么有利于互溶。B、氢键形成是能量吸收的过程，假设两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么有利于互溶。C、氢键形成是能量释放的过程，假设两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么不利于互溶。D、氢键形成是能量吸收的过程，假设两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么不利于互溶。47．关于精馏回流比控制，对于一定的别离任务，以下正确的两项是〔A〕..word.zl- .-A、假设回流比变大，那么精馏能耗增大；B、假设回流比变大，那么精馏能耗减小；C、假设回流比变大，那么所需理论塔板数变大；D、假设回流比变小，那么所需理论塔板数变小。48．结晶过程中，溶质过饱和度大小〔A〕A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度49．以下哪项不是蛋白质的浓度测定的方法〔D〕。A、凯氏定氮法B.双缩脲法C.福林-酚法D.核磁共振50．供生产生物药物的生物资源不包括〔D〕A.动物B植物C.微生物D.矿物质51．发酵液的预处理方法不包括〔C〕A.加热B絮凝C.离心D.调pH52．其他条件均一样时，优先选用那种固液别离手段〔B〕A.离心别离B过滤C.沉降D.超滤53．那种细胞破碎方法适用工业生产〔A〕A.高压匀浆B超声波破碎C.渗透压冲击法D.酶解法54．高压匀浆法破碎细胞，不适用于〔D〕A.酵母菌B大肠杆菌C.巨大芽孢杆菌D.青霉55．关于萃取以下说确的是〔C〕A.酸性物质在酸性条件下萃取B碱性物质在碱性条件下萃取C.两性电解质在等电点时进展提取D.两性电解质偏离等电点时进展提取56．液一液萃取时常发生乳化作用，如何防止〔D〕..word.zl- .-A.剧烈搅拌B低温C.静止D.加热57．在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中，目标蛋白质存在于〔A〕A.上相B下相C.葡聚糖相D.以上都有可能58．当两种高聚物水溶液相互混合时，二者之间的相互作用不可能产生〔D〕A.互不相溶，形成两个水相B两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水C.完全互溶，形成均相的高聚物水溶液D.形成沉淀59．超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度到达别离的目的〔C〕A.降温B升高压力C.升温D.参加夹带剂60．以下关于固相析出说确的是〔B〕A.沉淀和晶体会同时生成B析出速度慢产生的是结晶C.和析出速度无关D.析出速度慢产生的是沉淀61．盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用〔B〕A.酸性条件B碱性条件C.中性条件D.和溶液酸碱度无关62．有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为〔D〕A.乙酸乙酯B正丁醇C.苯D.丙酮63．有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质〔B〕A.介电常数大B介电常数小C.中和电荷D.与蛋白质相互反响64．蛋白质溶液进展有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在〔A〕围适合。A.0.5％～2％B1％～3％C.2％～4％D.3％～5％65．假设两性物质结合了较多阳离子，那么等电点pH会〔A〕A.升高B降低C.不变D.以上均有可能66．假设两性物质结合了较多阴离子，那么等电点pH会〔B〕A.升高B降低C.不变D.以上均有可能..word.zl- .-67．生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用〔C〕去除金属离子。A.SDSBCTABC.EDTAD.CPC68．那一种膜孔径最小〔C〕A.微滤B超滤C.反渗透D.纳米过滤69．超滤技术常被用作〔C〕A.小分子物质的脱盐和浓缩B小分子物质的分级别离C.小分子物质的纯化D.固液别离70．微孔膜过滤不能用来〔D〕A.酶活力测定BmRNA的测定及纯化C.蛋白质含量测定D.别离离子与小分子71．吸附剂和吸附质之间作用力是通过〔A〕产生的吸附称为物理吸附。A.德华力B库伦力C.静电引力D.相互结合72．洗脱吸附剂上附着的溶质，洗脱液的极性强弱关系为〔A〕A.石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳C.乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿D.吡啶﹤甲醇﹤水73．那一种活性碳的吸附容量最小〔B〕A.粉末活性碳B锦纶活性碳C.颗粒活性碳74．酚型离子交换树脂那么应在〔B〕的溶液中才能进展反响A.pH＞7BpH＞9C.pH﹤9D.pH﹤775．羧酸型离子交换树脂必须在〔C〕的溶液中才有交换能力A.pH＞5BpH﹤7C.pH＞7D.pH﹤576．离子交换树脂适用〔B〕进展溶胀A.水B乙醇C.氢氧化钠D.盐酸77．以下关于离子交换层析洗脱说法错误的选项是〔D〕A.对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂..word.zl- .-C.强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂D.假设被交换的物质用酸、碱洗不下来，应使用更强的酸、碱78．阳树脂在软化中易受Fe3+污染，可通过〔C〕去除铁化合物。A.水B乙醇C.加抑制剂的高浓度盐酸D.高浓度盐溶液79．以下关于正相色谱与反相色谱说确的是〔C〕A.正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢C.反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性D.反相色谱层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢80．一般来说，可使用正相色谱别离〔B〕A.酚B带电离子C.醇D.有机酸81．分子筛层析指的是〔C〕A.吸附层析B分配层析C.凝胶过滤D.亲和层析82．常用的紫外线波长有两种〔B〕A.256nm和365nmB254nm和365nmC.254nm和367nmD.256nm和367nm83．以氧化铝和硅胶为介质进展层析，由于对极性稍大的成分其Rf〔B〕A.大B小C.中等D.不一定84．对于吸附的强弱描述错误的选项是〔A〕A.吸附现象与两相界面力的降低成反比B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中的溶解度成正比C.极性吸附剂容易吸附极性物质D.非极性吸附剂容易吸附非极性物质85．进展梯度洗脱，假设用50g吸附剂，一般每份洗脱液量常为〔C〕A.20rnLB100rnLC.50rnLD.90rnL86．离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为〔B〕之间A.1：10-1：20B1：10-1：50C.1：10-1：30D.1：20-1：5087．离子交换层析的上样时，上样量一般为柱床体积的〔C〕为宜。..word.zl- .-A.2％-5％B1％-2％C.1％-5％D.3％-7％88．通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来，可使用〔A〕A.阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱C.阴离子交换剂一般是pH值从低到高D.以上都不对89．那一种凝胶的孔径最小〔A〕A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20090．那一种凝胶的吸水量最大〔D〕A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20091．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀〔C〕A.甲醇B乙醇C.缓冲液D.乙酸乙酯92．疏水亲和吸附层析通常在〔D〕的条件下进展A.酸性B碱性C.中D.高浓度盐溶液93．当硅胶吸水量在〔B〕以上时，就失去其吸附作用A.13%B17%C.10%D.15%94．气相色谱的载气不能用〔C〕A.氢气B氦气C.氧气D.氮气95．关于电泳别离中迁移率描述正确的选项是〔A〕A.带电分子所带净电荷成正比B分子的大小成正比C.缓冲液的黏度成正比D.以上都不对96．在什么情况下得到粗大而有规那么的晶体〔A〕A.晶体生长速度大大超过晶核生成速度B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度C.晶体生长速度等于晶核生成速度D.以上都不对97．恒速枯燥阶段与降速枯燥阶段，那一阶段先发生〔A〕A.恒速枯燥阶段B降速枯燥阶段C.同时发生D.只有一种会发生..word.zl- .-98．珠磨机破碎细胞，适用于〔D〕A.酵母菌B大肠杆菌C.巨大芽孢杆菌D.青霉99．为加快过滤效果通常使用〔C〕A.电解质B高分子聚合物C.惰性助滤剂D.活性助滤剂100．不能用于固液别离的手段为〔C〕A.离心B过滤C.超滤D.双水相萃取101．最常用的枯燥方法有〔D〕A、常压枯燥B、减压枯燥C、喷雾枯燥D、以上都是102．以下哪个不属于高度纯化：(B)A.层析B.吸附法C.亲和层析D.凝胶层析103．酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等，为了进一步纯化，可用(E)方法除去杂质。A、调pH值和加热沉淀法B、蛋白质外表变性法C、降解或沉淀核酸法D、利用结合底物保护法除去杂蛋白E、以上都可以104．物理萃取即溶质根据〔B〕的原理进展别离的A.吸附B.相似相溶C分子筛D亲和105．纳米过滤的滤膜孔径〔D〕A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm106．适合小量细胞破碎的方法是〔B〕A.高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法107．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向〔A〕A：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。108．单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，参加1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D)沉析原理。..word.zl- .-A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析109．关于疏水柱层析的操作错误(D)A疏水层析柱装柱完毕后，通常要用含有高盐浓度的缓冲液进展平衡B疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差异进展别离纯化的层析技术C洗脱后的层析柱再生处理，可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的缓冲溶液洗涤，然后用平衡缓冲液平衡D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小110．结晶法对溶剂选择的原那么是〔C〕A、对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小B、对有效成分溶解度小，对杂质溶解度大C、对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小，对杂质冷热都溶或都不溶D、对有效成分冷热时都溶，对杂质那么不溶E、对杂质热时溶解度大，冷时溶解度小111．适用于别离糖、苷等的SephadexG的别离原理是〔C〕A、吸附B、分配比C、分子大小D、离子交换E、水溶性大小112．关于分配柱层析的根本操作错误(D)。A装柱分干法和湿法两种B分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和C用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D分配柱层析适用于别离极性比拟小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。113．在高效液相色谱中,以下哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用.〔D〕A．紫外检测器B．荧光检测器C．蒸发光散射检测器D．示差折光检测器114．网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用以下哪种溶液洗脱。〔D〕A.水B.高盐C.低pHD.高pH115．以下哪项不属于发酵液的预处理：〔D〕A.加热 B.调pHC.絮凝和凝聚D.层析116．以下哪个不属于初步纯化：(C)..word.zl- .-A.沉淀法B.吸附法C.离子交换层析D.萃取法117．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度〔A〕A.越小B.越大C.不变D.无法确定118．盐析法沉淀蛋白质的原理是〔B〕A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点119．高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，根本上由〔D〕组成。A高压输液系统、进样系统、别离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大局部B进样系统、别离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大局部C高压输液系统、进样系统、别离系统、检测系统四大局部D高压输液系统、进样系统、别离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大局部120．影响电泳别离的主要因素〔B〕A光照B待别离生物大分子的性质C湿度D电泳时间121．超滤膜通常不以其孔径大小作为指标，而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值〞是指阻留率达〔B〕的最小被截留物质的分子量。A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上122．在凝胶过滤〔别离围是5000~400000〕中，以下哪种蛋白质最先被洗脱下来〔B〕A．细胞色素C〔13370〕B．肌球蛋白〔400000〕C．过氧化氢酶〔247500〕D．血清清蛋白〔68500〕E．肌红蛋白〔16900〕123．“类似物容易吸附类似物〞的原那么,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质〔B〕A．极性溶剂B．非极性溶剂C．水D．溶剂124．能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是〔C〕A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏..word.zl- .-125．从四环素发酵液中去除铁离子,可用〔B〕A．草酸酸化B．加黄血盐C．加硫酸锌D．氨水碱化126．当向蛋白质纯溶液中参加中性盐时，蛋白质溶解度〔C〕A、增大B、减小C、先增大，后减小D、先减小，后增大127．关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的选项是：〔A〕A、最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。B、对弱酸性物质可用碱来解吸。C、对弱碱性物质可用酸来解吸。D、如吸附系在高浓度盐类溶液中进展时，那么常常仅用水洗就能解吸下来。128．为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是〔C〕A、观察柱床有无沟流B、观察色带是否平整C、测量流速D、测量层析柱的外水体积129．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作〔D〕A、阴性洗脱B、剧烈洗脱C、正洗脱D、负洗脱130．以下细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法(A)A.化学法B.高压匀浆C.超声波破碎D.高速珠磨131．以下哪一项不是常用的滤布材料〔C〕A.法兰绒B.帆布C.滤纸D.斜纹布132．超滤膜截留的颗粒直径为(B)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm133．阴树脂易受有机物污染，污染后，可用〔B〕处理A柠檬酸B10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液C氨基三乙酸DEDTA134．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，以下〔A〕项是正确的表达。A、氢键形成是能量释放的过程，假设溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么有利于互溶。B、氢键形成是能量吸收的过程，假设溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么有利于互溶。..word.zl- .-C、氢键形成是能量释放的过程，假设溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么不利于互溶。D、氢键形成是能量吸收的过程，假设溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么不利于互溶。135．HPLC是哪种色谱的简称〔C〕。A．离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱136．洗脱体积是〔C〕。A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶部的体积C、与该溶质保存时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积137．分子筛层析纯化酶是根据〔C〕进展纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法138．用于蛋白质别离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是〔C〕A．离子交换色谱B．亲和色谱C．凝胶过滤色谱D．反相色谱139．用活性炭色谱别离糖类化合物时，所选用的洗脱剂顺序为：〔D〕A、先用乙醇洗脱，然后再用水洗脱B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱C、先用乙醇洗脱，再用其他有机溶剂洗脱D、先用水洗脱，然后再用不同浓度乙醇洗脱140．微滤膜所截留的颗粒直径为(A)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm141．以下哪一项不是阳离子交换树脂〔D〕A氢型B钠型C铵型D羟型142．适合于亲脂性物质的别离的吸附剂是〔B〕。A．活性炭B.氧化铝C.硅胶D.磷酸钙143．气相色谱柱主要有〔C〕。A填充柱B毛细管柱CA或BDA或B及其他..word.zl- .-144．关于分配柱层析的根本操作错误(D)。A装柱分干法和湿法两种B分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和C用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D分配柱层析适用于别离极性比拟小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。145．按别离原理不同，电泳可分为〔A〕A区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳B纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳C区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳D等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳146．在酸性条件下用以下哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量〔C〕A．羟型阴B．氯型阴C．氢型阳D．钠型阳147．超临界流体萃取法适用于提取〔B〕A、极性大的成分B、极性小的成分C、离子型化合物D、能气化的成分E、亲水性成分148．别离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用〔A〕A、别离量大分辨率低的方法B、别离量小分辨率低的方法C、别离量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定149．蛋白质类物质的别离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用以下哪类的方法。〔B〕A．分辨率高B.负载量大C.操作简便D.价廉150．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作〔D〕A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.正洗脱D.负洗脱151．将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5—4.6，28－30℃保温，即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为〔B〕A、有机溶剂结晶法B、等电点法C、透析结晶法D、盐析结晶法..word.zl- .-152．针对配基的生物学特异性的蛋白质别离方法是〔C〕。A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析153．以下哪项不是常用的树脂再生剂〔D〕A1％～10％HClBH2S04、CNaCl、D蒸馏水154．反渗透膜的孔径小于(C)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm155．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中参加配基的洗脱方法称作〔C〕A、阴性洗脱B、剧烈洗脱C、竞争洗脱D、非竞争洗脱156．凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是〔B〕A、凝胶排斥B、凝胶吸附C、柱床过长D、流速过低157．活性炭在以下哪种溶剂中吸附能力最强？〔A〕A、水B、甲醇C、乙醇D、三氯甲烷158．将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为〔A〕A、亲和沉淀B、聚合物沉淀C、金属离子沉淀D、盐析沉淀159．在一定的pH和温度下改变离子强度〔盐浓度〕进展盐析，称作(A)A、KS盐析法B、β盐析法C、重复盐析法D、分部盐析法160．在超滤过程中，主要的推动力是〔C〕A、浓度差B、电势差C、压力D、重力161．下面关于亲和层析载体的说法错误的选项是〔B〕A、载体必须能充分功能化。B、载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性，尽量减少非专一性吸附。C、载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。..word.zl- .-D、理想的亲和层析载体外观上应为大小均匀的刚性小球。162．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是〔A〕A、粗且长的B、粗且短的C、细且长的D、细且短的163．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最正确？〔C〕A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法164．盐析法与有机溶剂沉淀法比拟，其优点是〔B〕A．分辨率高B．变性作用小C．杂质易除D．沉淀易别离165．在萃取液用量一样的条件下，以下哪种萃取方式的理论收率最高〔C〕A.单级萃取B.三级错流萃取C.三级逆流萃取D.二级逆流萃取166．磺酸型阳离子交换树脂可用于别离〔E〕A、强心苷B、有机酸C、醌类D、苯丙素E、生物碱167．不能用于糖类提取后的别离纯化的方法是〔B〕A、活性炭柱色谱法B、酸碱溶剂法C、凝胶色谱法D、分级沉淀法E、大孔树脂色谱法168．用大孔树脂别离苷类常用的洗脱剂是〔B〕A、水B、含水醇C、正丁醇D、乙醚E、氯仿三、判断题1．助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。〔×〕2．通过参加某些反响剂是发酵液进展预处理的方法之一。〔√〕3．珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。〔×〕4．高级醇能被细胞壁中的类脂吸收，使胞壁膜溶胀，导致细胞破碎。〔×〕5．极性溶剂与非极性溶剂互溶。〔×〕6．溶剂萃取中的乳化现象一定存在。〔×〕..word.zl- .-7．临界压力是液化气体所需的压力。〔×〕8．进料的温度和pH会影响膜的寿命。〔√〕9．液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。〔√〕10．流动相为气体那么称为气相色谱。〔√〕11．用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。〔×〕12．用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。〔×〕13．在生物制剂制备中，常用的缓冲系统有磷酸盐缓冲液；碳酸盐缓冲液；盐酸盐缓冲液；醋酸盐缓冲液等。〔×〕14．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进展提取。〔×〕15．应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进展。〔×〕16．常压枯燥浓缩的缺点是设备投资及操作维护费用高，生产能力不太大。〔×〕17．生物物质中最常用的枯燥方法是减压枯燥。〔√〕18．冷冻枯燥适用于高度热敏的生物物质。〔√〕19．溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。〔√〕20．蛋白质变性，一级、二级、三级构造都被破坏。〔×〕21．蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进展，因为温度高会增加其溶解度。〔×〕22．吸附剂氧化铝的活性与其含水量无关。〔×〕23．酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸〔×〕24活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。〔√〕25．离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。〔√〕26．蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。〔×〕27．溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。〔√〕..word.zl- .-28．当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。〔√〕29．采用氧化铝为吸附剂时，用洗脱剂应从高极性开场，逐渐减低，洗脱剂的极性。〔×〕30．重蒸馏法常为制备无盐水的方法。〔×〕31．板框压滤机可过滤所有菌体。〔×〕32．高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。〔×〕33．超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进展。〔√〕34．冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键构造，降低其亲水性和通透性。〔×〕35．有机溶剂被细胞壁吸收后，会使细胞壁膨胀或溶解，导致破裂，把细胞产物释放到水相中去。〔√〕36．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带正电。〔×〕37．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带负电。〔√〕38．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带负电。〔×〕39．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带正电。。〔√〕40．离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现别离的。〔√〕41．不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统，如葡聚糖与聚乙二醇〔PEG〕按一定比例与水混合后，溶液先呈浑浊状态，待静置平衡后，逐渐分成互不相溶的两相，上相富含PEG，下相富含葡聚糖。〔√〕42．不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统，如葡聚糖与聚乙二醇〔PEG〕按一定比例与水混合后，溶液先呈浑浊状态，待静置平衡后，逐渐分成互不相溶的两相，下相富含PEG，上相富含葡聚糖。〔×〕43．超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度〔或压力〕的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶解度有可能增加或下降。〔√〕44．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中参加一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的别离技术。〔√〕45．硫酸铵在碱性环境中可以应用。〔×〕..word.zl- .-46．在低盐浓度时，盐离子能增加生物分子外表电荷，使生物分子水合作用增强，具有促进溶解的作用。〔√〕47．向含有生化物质的水溶液中参加一定量亲水性的有机溶剂，能使生化物质沉淀析出。〔√〕48．丙酮沉析作用小于乙醇。〔×〕49．有机溶剂与水混合要在低温下进展。〔√〕50．有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。〔√〕51．假设两性物质结合了较多阳离子，那么等电点pH降低。〔×〕52．等电点沉淀在实际操作中应防止溶液pH上升至5以上。〔√〕53．纳米过滤膜孔径最小。〔×〕54．用64%氯化锌溶液处理透析袋，使大分子也能通过膜孔。〔√〕55．进展水的超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液的无菌检查、饮用水的细菌检查使用孔径为0.2µm的膜。〔×〕56．离子交换速率总是取决于部扩散速率。〔×〕57．酚型树脂那么应在pH小于9的溶液中才能进展反响。〔×〕58．伯胺基在pH<7的溶液中使用。〔√〕59．在70～80℃时盐型树脂的分解反响到达初步脱盐而不用酸碱再生剂的这种树脂叫热再生树脂。〔√〕60．对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。〔√〕61．阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。〔×〕62．如不慎树脂失水，应先用水浸泡。〔×〕63．只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时，静态离子交换操作才有可能获得较好的效果。〔√〕64．层析别离是一种化学的别离方法。〔×〕65．别离纯化极性大的分子〔带电离子等〕采用反相色谱〔或正相柱〕，〔×〕66．而别离纯化极性小的有机分子〔有机酸、醇、酚等〕多采用正相色谱〔或反相柱〕。〔×〕..word.zl- .-67．吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。〔×〕68．离子交换剂可以分为3局部：高分子聚合物基质、电荷基团和被交换离子。〔×〕69．任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。〔×〕70．凝胶柱层析可进展生物大分子分子量的测定。〔√〕71．在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。〔×〕72．色谱别离技术中固定相都是固体。〔×〕73．色谱别离技术中被检测物质的峰越宽越好。〔×〕74．制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。〔√〕75．在聚丙烯酰胺凝胶中参加阴离子去污剂十二烷基硫酸钠〔SDS〕，影响凝胶的形成。〔×〕76．等电聚焦电泳会形成的一个由阳极到阴极逐步递减的pH梯度。〔×〕77．在恒速枯燥阶段，过程速度由水分从物料部移动到外表的速度即扩散所控制。〔×〕78．在降速枯燥阶段，枯燥速度由水的外表汽化速度即外扩散所控制法。〔×〕79．渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阳性菌。〔×〕80．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被别离物质的密度。〔√〕81．可以用纸色谱的方法来选择、设计液-液萃取别离物质的最正确方案。〔√〕82．SephadexLH-20的别离原理主要是分子筛和正相分配色谱。〔√〕83．酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸〔×〕84．等密度梯度离心适于别离大小一样密度不同的物质。〔√〕85．当气体的温度超过其临界温度，压力超过临界压力之后，物质的聚集状态就介于气态和液态之间，成为超临界流体。〔√〕86．盐析反响完全需要一定时间，一般硫酸铵全部加完后，应放置30min以上才可进展固-液别离。〔√〕..word.zl- .-87．层析点样时用一根毛细管，吸取样品溶液，在距薄层一端1.5^-2cm的起始线上点样，样品点直径小于3mm。〔√〕88．疏水柱层析可直接别离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液〔√〕89．某结晶物质经硅胶薄层色谱，用一种展开剂展开，显示单一斑点，所以该晶体为一单体。〔×〕90．水提醇沉法时根据物质溶解度差异进展别离的方法。〔√〕91．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原那么是“相似相溶原那么〞。〔√〕92．凝聚与絮凝作用的原理是一样的，只是沉淀的状态不同。〔×〕93．冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键构造，增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。〔√〕94．发生乳化现象对萃取是有利的。〔×〕95．丙酮，介电常数较低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析时选用丙酮较好。〔×〕96．由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响，故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱〔√〕97．盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度，使提取液中的水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。〔√〕98．珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。〔×〕99．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进展提取。〔×〕100．水蒸气蒸馏法是提取挥发油最常用的方法。〔√〕101．中性多糖类药物常用水作溶剂来提取，也可用水浸煮，也可以用冷水浸提。〔∨〕102．凝胶层析会使得大分子物质后流出，小分子物质先流出。〔×〕103．透析设备简单、操作容易，可用于工业化生产〔×〕104．有机溶剂〔如胍、乙醇、尿素和异丙醇等〕可以削弱疏水分子间的相互作用。可以用于任何规模的细胞破碎。〔√〕105．液一液萃取时，常发生乳化作用，使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。〔×〕106．蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。〔×〕..word.zl- .-107．活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。〔√〕108．细胞破碎技术是生物别离操作中必需的步骤。〔×〕109．离心操作时，对称放置的离心管要到达体积一样才能进展离心操作。〔×〕110．分配系数K与溶质的浓度和相体积比无关，它主要取决于相系统的性质、被萃取物质的外表性质和温度。〔√〕111．甲醇沉淀作用与乙醇相当，但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小，所以应用广泛。〔×〕112．氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。〔√〕113．同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂〔√〕114．氧化铝和硅胶都为亲水性吸附剂，由于对极性稍大的成分吸附力大，所以极性大的成分难以解吸附，Rf小，极性小的成分容易被解吸附，Rf大。同类成分的极性大小主要取决于以下因素。〔√〕115．盐析一般可在室温下进展，当处理对温度敏感的蛋白质或酶时，盐析操作要在低温下〔如0℃～4℃〕进展。〔√〕116．蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进展，因为温度高会增加其溶解度。〔×〕117．液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。〔√〕118．沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都是进展初步纯化。〔√〕119．渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阴性菌。〔√〕120．同一化合物用不同溶剂重结晶，其结晶的熔点可能有差距。〔√〕121．化学萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间到达分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反响。〔×〕122．假设两性物质结合了较多阳离子〔如Ca2+、Mg2+、Zn2+等〕，那么等电点pH升高。〔√〕123．采用凝胶过滤别离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小，先将蛋白质混合物上柱然后进展洗脱，小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。(×)124．树脂使用后不可再回收。〔×〕..word.zl- .-125．多肽和蛋白质类药物的纯化包括两局部容，一是蛋白质与非蛋白质分开，二是将不同蛋白质分开。〔∨〕四、填空1．发酵液常用的固液别离方法有〔离心〕和〔过滤〕等。2．常用的蛋白质沉析方法有〔等电点沉淀〕，〔盐析〕和〔有机溶剂沉淀〕。3．阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为〔强酸型〕，〔弱酸型〕和〔中等强度〕；其典型的活性基团分别有〔磺酸基团〕，〔羧基〕，〔磷酸基〕。4．过饱和溶液的形成方式有：〔饱和溶液冷却〕，〔局部溶剂蒸发〕，〔化学反响结晶法〕和〔解析法〕。5．蛋白质别离常用的色谱法有〔凝胶色谱法〕，〔多糖基离子交换色谱法〕，〔高效液相色谱法〕和〔亲和色谱法〕。6．为使过滤进展的顺利通常要参加〔惰性助滤剂〕。7．离子交换别离操作中，常用的洗脱方法有〔pH梯度〕和〔离子强度〔盐〕梯度〕。8．阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为〔强碱型〕，〔弱碱型〕和〔中等强度〕；其典型的活性基团分别有〔季氨基〕、〔伯、仲、叔氨〕、〔强弱基团都具备〕。9．多糖基离子交换剂包括〔葡聚糖离子交换剂〕和〔离子交换纤维素〕两大类。10．离子交换树脂由〔载体〕，〔活性基团〕和〔可交换离子〕组成。11．常用的化学细胞破碎方法有〔渗透冲击〕，〔酶消化法〕，〔增溶法〕，〔脂溶法〕和〔碱处理法〕。12．DEAESepharose是〔阴〕离子交换树脂，其活性基团是〔二乙基氨基乙基〕。13．影响离子交换选择性的因素有〔离子化合价〕，〔离子水化半径〕，〔溶液浓度〕，〔离子强度〕，〔溶液的pH值〕，〔有机溶剂〕，〔树脂物理构造〕和〔辅助力〕。14．CMSepharose是〔阳〕离子交换树脂，其活性基团是〔羧甲基〕15．工业离心设备从形式上可分为〔管式〕，〔套筒式〕，〔碟片式〕，等型式。16．膜别离过程中所使用的膜，依据其膜特性〔孔径〕不同可分为〔微滤膜〕，〔超滤膜〕，〔纳滤膜〕和〔反渗透膜〕。..word.zl- .-17．工业上常用的超滤装置有〔板式〕，〔管式〕，〔螺旋卷式〕和〔中空纤维式〕。18.影响吸附的主要因素有〔吸附剂的性质〕，〔吸附质的性质〕，〔温度〕，〔溶液pH值〕，〔盐浓度〕和〔吸附物浓度和吸附剂用量〕。19．影响盐析的因素有〔溶质种类〕，〔溶质浓度〕，〔pH值〕和〔温度〕。20.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有〔自然起晶法〕，〔刺激起晶法〕和〔晶种起晶法〕。21.简单地说，离子交换过程实际上只有〔外部扩散〕，〔部扩散〕和〔化学交换反响〕三步；22.在生物制品进展吸附或离子交换别离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为〔Q＝q0C/(k+C)〕；23.反相高效液相色谱的固定相是〔非极性〕的，而流动相是〔极性〕的；常用的固定相有〔C18〕和〔C8〕；常用的流动相有〔甲醇〕和〔乙睛〕。24.超临界流体的特点是与气体有相似的〔粘度〔扩散系数〕〕，与液体有相似的〔密度〕。25.离子交换树脂的合成方法有〔共聚〔加聚〕〕和〔均聚〔缩聚〕〕两大类；26.等电聚焦电泳法别离不同蛋白质的原理是依据其〔等电点〔pI〕〕的不同；27.晶体质量主要指〔晶体大小〕，〔晶体性状〕和〔晶体纯度〕三个方面；28.根据别离机理的不同，色谱法可分为〔吸附色谱〕，〔离子交换色谱〕，〔凝胶色谱〕，〔分配色谱〕和〔亲和色谱〕。29.典型的工业过滤设备有〔板框压滤机〕和〔真空转鼓过滤机〕。30.常用离心设备可分为〔离心沉降〕和〔离心过滤〕两大类；31.根据物化理论，萃取到达平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的〔浓度的比值〕一定；32.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为〔物理〕、〔化学〕、〔极性〕和〔交换〕吸附；33.离子交换操作一般分为〔动态〕和〔静态〕两种；34.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于〔分子外表电荷〕和〔水化层〕；35.盐析用盐的选择需考虑〔盐析作用强〕、〔溶解度大〕、〔生物学惰性〕和〔来源丰富、经济〕..word.zl- .-等几个方面的因素；36.影响有机溶剂沉淀的因素有〔温度〕、〔pH〕、〔样品浓度〕、〔中性盐浓度〕和〔金属离子〕。37.结晶包括三个过程〔过饱和溶液的形成〕、〔晶核的形成〕和〔晶体的生长〕。38.过饱和溶液的形成方法有〔饱和溶液冷却〕、〔局部溶剂蒸发〕、〔解析〕和〔化学反响结晶〕。39.物料中所含水分可分为〔结合水〕和〔非结合水〕三种；40.根据枯燥曲线，物料枯燥可分为〔恒速枯燥阶段〕和〔降速枯燥阶段〕两个阶段；41.液－液萃取从机理上分析可分为〔物理萃取〕和〔化学萃取〕两类；42.大孔网状吸附剂有〔非极性〕、〔中等极性〕和〔极性〕三种主要类型；43.影响离子交换速度的因素有〔树脂粒度〕、〔交联度〕、〔溶液流速〕、〔温度〕、〔离子的大小〕、〔离子的化合价〕和〔离子浓度〕。44.分配色谱的根本构成要素有〔载体〕、〔固定相〕和〔流动相〕。45.分子筛色谱也称〔凝胶色谱〕的主要应用是〔脱盐〕和〔分级别离〕46.根据膜构造的不同，常用的膜可分为〔对称性膜〕、〔非对称膜〕和〔复合膜〕三类；47.固体可分为〔结晶〕和〔无定型〕两种状态；48.结晶的前提是〔过饱和溶液的形成〕；结晶的推动力是〔溶液的过饱和度〕；49.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括〔溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体的外表〕、〔溶质长入晶面放出结晶热〕和〔结晶热传递回到溶液中〕三个过程；50.影响晶体生长速度的主要因素有〔杂质〕、〔搅拌〕、〔过饱和度〕和〔温度〕。五、简答1．溶剂萃取过程的机理是什么？..word.zl- .-答：1、简单分子萃取：简单的物理分配过程，被萃取组分以一种简单分子的形式在两相间屋里分配。以中型分子存在，不发生化学反响。2、中型溶剂络合萃取：被萃取物是中型分子，萃取剂也是中型分子，萃取剂与被萃取物结合成为络合物进入有机相。3、酸性阳离子交换萃取：萃取剂为弱酸性有机酸或酸性鳌合剂。金属离子在水相中以阳离子或能解离为阳离子的络离子的形式存在，金属离子与萃取剂反响生成中性鳌合物。4、离子络合萃取：①金属离子在水相中形成络合阴离子，萃取剂与氢离子结合形成阳离子，二者构成离子缔合体系进入有机相；②金属阳离子与中性鳌合剂结合成鳌合阳离子，再与水相中的阴离子构成离子缔合体系而进入有机相。2．试述凝胶色谱的原理？答：将混合原料加在柱上并用流动相洗脱，那么无法进入孔隙部的大分子直接被洗脱下来，小分子因为可以进入孔隙部而受到很大的阻滞，最晚被洗脱下来，而中等大小的分子，虽然可以进入孔隙部但并不深入，受到的阻滞作用不强，因而在两者之间被洗脱下来。3．在色谱操作过程中为什么要进展平衡？答：1、流速平衡：流速是柱层析操作当中的主要影响因素，流速的快慢直接影响着别离的效果，流速过快，混合物得不到完全的别离，流速过慢，整体别离的时间要延长，因此在别离前首先要确定留宿。2、液体环境：为了保持被别离物质运动的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙部和外部液体环境的一致，所以进展液体环境的平衡。4．以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理？答：1、加碱：主要是调节蛋白质到达等电点，是蛋白质带电量减少，吸附力下降从而被洗脱下来。2、加酸：主要是抑制羧酸的电离，使活性基团带电量下降，吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3、加盐：依照质量作用定律，把蛋白质洗脱下来。5．简述软水和无盐水的制备方法？答：①软水的制备：利用钠型磺酸树脂除去水中的钙离子和镁离子等碱金属后即可制得软水。②无盐水的制备：将原水通过氢型强酸性阳离子交换树脂和羟型强碱或弱碱性阴离子交换树脂的组合，经过离子交换反响，将水中所有的阴、阳离子除去，从而制得纯度很高的无盐纯水。6．在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交换树脂？..word.zl- .-答：1、对阴阳离子交换树脂的选择：正电荷选择阳离子交换树脂，负电荷选择阴离子交换树脂。2、对离子交换树脂强弱的选择：较强的酸性或碱性，选择选用弱酸性或弱碱性树脂。3、对离子交换树脂离子型的选择：根据别离的目的，弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型。7．简述盐析的原理及产生的现象？答：当中性盐参加蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况：〔1〕“盐溶〞现象—低盐浓度下，蛋白质溶解度增大。〔2〕“盐析〞现象—高盐浓度下，蛋白质溶解度随之下降，原因如下：〔a〕无机离子与蛋白质外表电荷中和，形成离子对，局部中和了蛋白质的电性，使蛋白质分子之间的排斥力减弱，从而能够相互靠拢；〔b〕中性盐的亲水性大，使蛋白质脱去水化膜，疏水区暴露，由于疏水区的相互作用导致沉淀；8.简述吸附色谱别离技术的原理？答:利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(德华力，包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现别离9.在运用离子交换技术提取蛋白质时，为什么要使用多糖基离子交换剂？答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时，树脂部主要为疏水性，对亲水性的蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。10.区分渗透与反渗透？答：渗透是由于存在化学势存在梯度而引起的自发扩散现象。因此，通常情况下，，其结果是水从纯水一侧透过半透膜向溶液侧渗透，使后者的液位抬高。如果在溶液一侧施加压力，外界力做功使溶液中水的化学势升高，那么纯水通过膜的渗透就会逐渐减小，并最终停顿〔条件？〕，此时的压力差就是溶液的渗透压。当时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。11.简述过饱和溶液形成的方法？答：〔1〕热饱和溶液冷却〔等溶剂结晶〕，适用于溶解度随温度升高而增加的体系；同时，溶解度随温度变化的幅度要适中；〔2〕局部溶剂蒸发法〔等温结晶法〕，适用于溶解度随温度降低变化不大的体系，或随温度升高溶解度降低的体系；〔3〕真空蒸发冷却法，使溶剂在真空下迅速蒸发，并结合绝热冷却，是结合冷却和局部溶剂蒸发两种方法的一种结晶方法。〔4〕化学反响结晶，参加反响剂产生新物质，当该新物质的溶解度超过饱和溶解度时，即有晶体析出；12.怎样进展离子交换树脂的预处理及转型？..word.zl- .-答：物理处理：水洗、过筛，去杂，以获得粒度均匀的树脂颗粒；化学处理：转型〔氢型或钠型〕阳离子树脂酸—碱—酸，阴离子树脂碱—酸—碱，最后以去离子水或缓冲液平衡13.何谓等电点沉析法？答:蛋白质再等电点下的溶解度最低，根据这一性质，再溶液中参加一定比例的有机溶剂，破坏蛋白质外表的水化层和双电层，降低分子间斥力，加强了蛋白质分子间的疏水相互作用，使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。14.何谓超临界流体萃取，并简述其别离原理？答：超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度〔溶解能力强〕的特点，利用超临界流体为萃取剂进展的萃取单元操作。其特点是平安、无毒、产品别离简单，但设备投资较大。15.简述结晶过程中晶体形成的条件？答：结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成及晶体的生长三个过程，其中溶液到达过饱和状态是结晶的前提，过饱和度是结晶的推动力。16.简述凝胶色谱的别离原理？答：凝胶排阻色谱的别离介质〔填料〕具有均匀的网格构造，其别离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶部，而从凝胶颗粒之间流出，保存时间短；而小分子溶质可以进入凝胶部，由于凝胶多孔构造的阻滞作用，流经体积变大，保存时间延长。这样，分子量不同的溶质分子得以别离。17.膜别离过程中，有那些原因会造成膜污染，如何处理？答：〔1〕膜污染主要有两种情况：一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于外表；另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。〔3分〕〔2〕膜污染是可以预防或减轻的，措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。〔2分〕〔3〕膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的，只能通过清洗的处理方式消除，包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。〔2分〕18.超临界萃取的原理及SC-CO2萃取的优点？..word.zl- .-答:原理：溶质在超临界流体中的溶解度，与其密度有关，密度越大，溶解度越大。在临界点附近，微小的压力增加或温度下降，那么溶剂的密度大幅度增加，对溶质的溶解度将大幅度增加，有利于溶质的萃取。而在临界点附近，微小的压力下降或温度上升，那么溶剂的密度大幅度减少，对溶质的溶解度将大幅减少，有利于溶质的别离和溶剂的回收。优点：无毒无腐蚀性，不可燃烧，价格低廉，传质好萃取快，临界温度和临界压力较低适合于热敏生物制品，可获萃取物或萃余物19.何谓免疫亲和层析，简述亲和免疫层析介质的制备过程?答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱别离集成产生的一种高效色谱别离技术，其别离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用，从而实现高效的别离。层析介质的制备过程包括：抗体的制备、抗体提取、载体活化，手臂链的连接、抗体的连接等步骤。20.何谓亲和吸附，有何特点？答：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效别离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。亲和吸附的特点是高效、简便、适用围广、别离速度快、条件温和，但载体制备难度大，通用性差，本钱较高。21.简述生物别离过程的特点?答:1、产品丰富：产品的多样性导致别离方法的多样性2、绝大多数生物别离方法来源于化学别离3、生物别离一般比化工别离难度大：〔1〕成分复杂，〔2〕悬液中的目标产物浓度低，〔3〕生物活性，条件相对温和，〔4〕生物产品要求高质量，〔5〕获得高纯度的枯燥产品，〔6〕卫生22.试比拟凝聚和絮凝两过程的异同？答：凝聚和絮凝——在电介质作用下，破坏溶质胶体颗粒外表的双电层，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。凝聚：简单电解质降低胶体间的排斥力。从而德华引力起主导作用，聚合成较大的胶粒，粒子的密度越大，越易别离。絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程23.何谓反微团，反微团萃取？其特点有哪些？答：胶束是外表活性剂在非极性有机溶剂中形成的一种聚集体当外表活性剂浓度超过临界微团浓度时，外表活性剂会在水溶液中形成聚集体微团和反微团..word.zl- .-1、微团：外表活性剂的极性头朝外，疏水的尾部朝，中间形成非极性的“核〞2、反微团：外表活性剂的极性头朝，疏水的尾部向外，中间形成极性的“核〞3、反微团的优点〔1〕极性“水核〞具有较强的溶解能力。〔2〕生物大分子由于具有较强的极性，可溶解于极性水核中，防止与外界有机溶剂接触，减少变性作用。〔3〕由于“水核〞的尺度效应，可以稳定蛋白质的立体构造，增加其构造的刚性，提高其反响性能。因此，可作为酶固定化体系，用于水不溶性底物的生物催化24.简述有机溶剂沉析的原理？答：1、概念：在含有溶质的水溶液中参加一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。2、原理：〔1〕降低了溶质的介电常数，使溶质之间的静电引力增加，从而出现聚集现象，导致沉淀。〔2〕由于有机溶剂的水合作用，降低了自由水的浓度，降低了亲水溶质外表水化层的厚度，降低了亲水性，导致脱水凝聚。25.膜别离技术的类型和定义？答：膜别离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径大小而到达物质别离的目的，故而可以按别离粒子大小进展分类：〔1〕微滤：以多孔细小薄膜为过滤介质，压力为推动力，使不溶性物质得以别离的操作，孔径分布围在0.025~14μm之间；〔2〕超滤：别离介质同上，但孔径更小，为0.001~0.02μm，别离推动力仍为压力差，适合于别离酶、蛋白质等生物大分子物质；〔3〕反渗透：是一种以压力差为推动力，从溶液中别离出溶剂的膜别离操作，孔径围在0.0001~0.001μm之间；〔由于别离的溶剂分子往往很小，不能忽略渗透压的作用，故而成为反渗透〕；〔4〕纳滤：以压力差为推动力，从溶液中别离300~1000小分子量的膜别离过程，孔径分布在平均2nm；〔5〕电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜别离操作；26.影响液一固别离的因素？〔一〕微生物种类的影响：一般真菌的菌丝比拟粗大，液一固别离容易，含真菌菌体及絮凝蛋白质的发酵液，可采用鼓式真空过滤或板框过滤。对于酵母菌体，离心别离的方法具有较好的效果。但是细菌或细胞碎片相当细小，液一固别离十分困难，用一般的离心别离或过滤方法效果很差，因此应先用预处理的各种手段来增大粒子，才能获得澄清的滤液。..word.zl- .-〔二〕发酵液的黏度：液一固别离的速度通常与黏度成反比。影响发酵液黏度的因素很多：〔1〕菌体种类和浓度不同，其黏度有很大差异。〔2〕不同的培养基组分和用量也会影响黏度，如用黄豆饼粉、花生饼粉作氮源，用淀粉作碳源会使黏度增大。发酵液中未用完的培养基较多或发酵后期用油作消沫剂也会使过滤困难。27.影响有机溶剂萃取别离的因素？影响液一液萃取的因素主要有目的物在两相的分配比〔分配系数K〕和有机溶剂的用量等。分配系数K值增大，提取效率也增大，萃取就易于进展完全。当K值较小时，可以适当增加有机溶剂用量来提高萃取率，但有机溶剂用量增加会增加后处理的工作量，因此在实际工作中，常常采取分次参加溶剂，连续屡次提取来提高萃取率。28.盐析的原理及影响因素？1、亲水性大于蛋白质破坏水化层2、带电离子中和蛋白质外表电荷影响因素：〔1〕盐离子浓度〔2〕生物分子种类〔3〕生物分子浓度〔4〕pH值〔五〕温度29.影响有机溶剂沉析的因素？〔1〕温度〔2〕生物样品的浓度〔3〕pH〔4〕离子强度〔5〕金属离子30.等电点沉析考前须知？〔1〕等电点的改变〔2〕目的物的稳定性〔3〕盐溶作用〔4〕pH的调节31.微孔膜过滤技术的应用？〔一〕在生物化学中的应用1、绝对过滤收集沉淀〔1〕溶液的澄清〔2〕酶活力测定；2、结合测定〔1〕蛋白质-DNA络合物的测定及纯化受体的测定〔2〕mRNA的测定及纯化〔3〕环状DNA的纯化；3、其它应用〔1〕蛋白质含量测定〔2〕核酸的测定〔3〕放射性标记物的超净〔二〕在制药工业中的应用1．药液中微粒及细菌的滤除2．抗生素的无菌检验32.何时应用静态离子交换别离法？..word.zl- .-一般只是在试探性实验、测定交换平衡常数、某些交换动力学的研究、交换分配系数的测定、络合物离解常数的测定、滴定曲线的研究、某些催化反响的试探性研究、除去盐溶液中过剩的酸和碱、吸附溶液中所含的高分子量物质等方面可能用到。此外还用于不适合用柱进展操作的离子交换别离，如溶液粘度太大、含有悬浮固体及在反响时放出气体会造成沟流或堵塞管柱；或者是含有碳酸盐、亚硫酸盐、硫化物的溶液与氢型阳离子柱交换时；以及某些交换速度较慢、交换要求在一步完成的等条件下，还是可以采用的。33.交换容量及其影响因素？交换容量是指离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进展交换的能力。通常所说的离子交换剂的交换容量是指离子交换剂所能提供交换离子的总量，又称为总交换容量，它只和离子交换剂本身的性质有关。影响交换容量的因素很多，主要可以分为两个方面，一方面是离子交换剂颗粒大小、颗粒孔隙大小以及所别离的样品组分的大小等影响。另一些影响因素如实验中的离子强度、pH值等主要影响样品中组分和离子交换剂的带电性质。35.疏水柱层析别离原理？亲水性蛋白质〔酶〕外表均含有一定量的疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质〔酶〕具有将疏水性基团折叠在分子部而外表显露极性和荷电基团的趋势，但总会有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质〔酶〕外表。这局部疏水基团可与亲水性固定相外表偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用，被固定相〔疏水性吸附剂〕所吸附。36.气相色谱的条件选择？1、固定相的选择2、载气流速的选择3、柱温的选择4、进样量与进样时间的影响5、色谱柱形、柱径及柱长的选择37.影响电泳别离的主要因素？1、大分子的性质2、电场强度3、溶液的pH4、溶液的离子强度5、电渗6、温度7、支持物的影响38.提高晶体质量的方法有哪些？〔1〕晶体大小的控制〔2〕晶体形状的控制〔3〕晶体纯度的控制〔4〕晶体结块的控制39.生物别离的根本原理？..word.zl- .-主要是依据离心力、分子大小〔筛分〕、浓度差、压力差、电荷效应、吸附作用、静电作用、亲和作用、疏水作用、溶解度、平衡别离等原理对原料或产物进展别离、纯化。不同的别离对象需要采用不同的别离方法才能有效地被别离。40.生物别离技术的特点？1、产物的快速别离纯化。2、对原料液进展高度浓缩。3、借助新型的别离技术4、除去有害人类安康的物质5、采用利于保持目标产物产品质量的操作条件41.简述中药有效成分常用的提取、别离方法。提取方法：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法。别离方法：溶剂法包括酸碱溶剂法、溶剂分配法，沉淀法包括专属试剂沉淀法、分级沉淀法、盐析法、结晶法、分馏法、膜别离法、升华法、色谱法。42.沉析溶剂选择主要应考虑以下因素。〔1〕、是否与水互溶，在水中是否有很大的溶解度；〔2〕、介电常数小，沉析作用强。〔3〕、对生物分子的变性作用小。〔4〕、毒性小，挥发性适中。43.试列举常见的吸附剂。〔1〕活性炭〔2〕白土〔白土、土、高岭土〕〔3〕磷酸钙凝胶〔4〕氢氧化铝凝胶〔5〕氧化铝〔6〕硅胶〔7〕滑石粉〔8〕硅藻土〔9〕皂土〔10〕沸石〔11〕聚酰胺粉〔12〕大网格聚合物吸附剂44.离心别离技术根本原理？是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的别离过程。不同密度或不同大小及形状的物质在重力作用下的沉降速率不同，在形成密度梯度的液相体系中的平衡位置不同。离心别离过程就是以离心力加速不同物质沉降别离的过程。被别离物质之间必须存在或经人为处理产生的密度或沉降速率差异才能以离心方法进展别离。离心别离方法中差速离心法操作最简便，使用最广泛，但其别离纯化分辨率低于密度梯度离心。45.吸附色谱别离化学成分的原理是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点？利用混合物中各成分在两相中吸附力的差异进展别离。硅胶可别离各类成分。氧化铝别离碱性或亲脂性成分。活性炭别离水溶性成分。聚酰胺是氢键吸附，适合别离黄酮成分。46.生物别离技术的根本涵义及容？..word.zl- .-根本涵义：生物别离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物〔发酵液、培养液〕及其生物化学产品中提取、别离、纯化有用物质的技术过程。容主要包括：离心别离、过滤别离、泡沫别离、萃取别离、沉淀〔析〕别离、膜别离、层析〔色谱〕别离、电泳别离技术以及产品的浓缩、结晶、枯燥等技术。47.试列举改变透析袋孔径大小的方法？〔1〕用64%氯化锌溶液处理15分钟，可使膜孔径增大，使大分子也能通过膜孔。〔2〕纤维素膜用27%乙酸吡啶溶液处理，会使孔径减小。〔3〕将透析袋盛满水，在两端进展拉伸，会使透析袋变薄，加快透析速率；如果不向袋注入水而充满空气在两端拉伸，膜的孔径会变小，使有些溶质不能透过膜。48.简述生物活性物质别离纯化的主要原理？答：生物大分子别离纯化的主要原理是：1〕根据分子形状和大小不同进展别离，如差速离心与超离心、膜别离、凝胶过滤等；2〕根据分子电离性质〔带电性〕差异进展别离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法；3〕根据分子极性大小及溶解度不同进展别离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等；4〕根据物质吸附性质的不同进展别离，如选择性吸附与吸附层析等；5〕根据配体特异性进展别离，如亲和层析法等。49.常见的超滤装置有哪些？〔1〕无搅拌式装置〔2〕搅拌或振动式装置〔3〕小棒超滤器〔4〕浅道系统超滤装置〔5〕中空纤维系统超滤器50.树脂的再生〔或称活化〕？所谓树脂的再生就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反响是交换吸附的逆反响。再生方法可根据污染情况和条件而定，一般阳树脂在软化中易受Fe3+污染，去除铁化合物的方法，通常是用加抑制剂的高浓度盐酸〔10%～15%〕浸泡树脂5～12h，甚至更长。也可用柠檬酸、氨基三乙酸、EDTA等络合物进展处理。阴树脂易受有机物污染，可用10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗51.液一液萃取时溶剂的选择要注意以下几点？..word.zl- .-〔1〕选用的溶剂必须具有较高选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差异愈大愈好。〔2〕、选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易别离与回收。〔3〕、两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的别离，选用溶剂时应注意。〔4〕、要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。52.影响有机溶剂沉析的因素？〔1〕温度〔2〕生物样品的浓度〔3〕pH〔4〕金属离子〔5〕离子强度53.试述活性炭的吸附剂的吸附特点？〔1〕在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。〔2〕对极性基团〔-COOH、-NH2、-OH等〕多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物，。〔3〕对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物。〔4〕对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。〔5〕发酵液的pH与活性炭的吸附效率有关，一般碱性物质在中性下吸附，酸性下解吸；酸性物质在中性下吸附，碱性解吸。〔6〕活性炭吸附溶质的量在未到达平衡前一般随温度升高而增加；但在升高温度时应考虑到溶质对热的稳定性。54.简述凝胶层析有哪些用途？①作为分析工具；作为脱盐工具②生物大分子的浓缩③除热原物质④生物大分子的别离纯化；分子量的测定55.蛋白质的纯度鉴定的方法有哪些。(1)色谱法用分子筛或离子交换色谱检查样品时，如果样品是纯的，应显不单一的洗脱峰。该样品在色谱性质上是均一的，称为“色谱纯〞。(2)电泳法用PAGE检查样品呈现单一区带，也是纯度的一个指标，这说明样品在电荷和质量方面的均一性。可以说纯的蛋白质电泳仅有一条区带，但仅有一条区带却不一定是纯的，仅能说明它在电泳上的均一性，称为“电泳纯〞。(3)免疫化学法免疫学技术是鉴定蛋白质纯度的有效方法，它根据抗原与抗体反响的特异性，可用抗体检查抗原或抗原检查抗体。用此法检测的纯度称为“免疫纯〞。56.用于制作透析膜的高聚物应具有哪些特点？〔1〕在使用的溶剂介质中能形成具有一定孔径的分子筛样薄膜。由于介质一般为水，所以膜材料应具有亲水性，它只允许小分子溶质通过而阻止大分子溶质通过。〔2〕在化学上呈惰性。不具有与溶质、溶剂起作用的基团，在别离介质中能抵抗盐、稀酸、稀碱或某些有机溶剂，而不发生化学变化或溶解现象。〔3〕有良好的物理性能。包括一定的强度和柔韧性，不易破裂，有良好的再生性能，便于屡次重复使用。57.简述蛋白质类药物的别离纯化方法？..word.zl- .-①沉淀法②按分子大小别离的方法③按分子所带电荷进展别离的方法④亲和层析法58.根据溶解度不同，蛋白质有几种别离纯化方法。利用蛋白质溶解度的差异是别离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。1)等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。2)盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐(NaCl)比二价离子的中性盐[(NH4)2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。3)低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开场变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。六、论述1．试述柱层析的根本操作过程。答：1、装柱：①干法装柱②湿法装柱(注意：湿法装柱中柱预留一局部水，防止气泡的产生，装柱过程要连贯。平衡。)2、加样：①干法加样②湿法加样(注意：加样过程中，要防止产生飞溅，量要适中。)3、洗脱：以设定好的流速参加洗脱剂，可以是单一溶剂，也可以梯度洗脱。〔注意：不使柱外表的溶液流干，柱上端保存一层溶液。〕4、收集：每隔10mL收集一试管，使用层析的手段或紫外检测器进展实时的检测，合并具有一样物质的流份。4.简述pH对发酵液过滤特性的影响，并举例说明。答：〔1〕pH直接影响发酵液中某些物质的电离程度和电荷性质，因此适当调节pH值可以改善发酵液的过滤特性。〔2〕氨基酸和蛋白质在酸性条件下带正电，碱性条件下带负电，等电点时净电荷为零，两性物质在等电点下的溶解度最小，等电点沉淀法在生物工业别离中广泛使用。〔3〕如味精生产，利用等电点沉淀法提取谷氨酸，一般蛋白质也在酸性围到达等电点；膜别离中可通过调整pH..word.zl- .-值改变易吸附分子的电荷性质，减少膜堵塞和膜污染；此外，细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在特定pH下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于过滤进展。5.以胞酶提取为例，简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。答：〔1〕主要流程：使用PEG/盐系统提取胞酶时，可先使细胞碎片分配到下相，使蛋白质分配在上相；别离后，上相中的蛋白质可以参加适当的盐，进展二次双水相萃取，目的是利用盐相〔下相〕去除核酸和多糖；上相中的蛋白质进展第三次萃取，通过pH调节，使上相含色素，蛋白质分配在盐相，以便通过超滤将其和主体PEG别离，主体PEG可循环使用。〔2〕操作注意点：实验放大的主要依据是分配系数，遇到的主要问题是细胞碎片相的粘度问题、萃取平衡时间以及相别离问题。需要带低速搅拌和溢流装置的混合－沉降系统；上下相别离利用重力沉降能耗本钱低，但高粘度体系要选用离心别离；改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物的彻底别离。6.详细表达利用混合柱生产无盐水的原理及操作方法？答：采用强酸性阳离子交换树脂除去水中阳离子，平衡离子为氢离子；采用碱性阴离子交换树脂除去水中阴离子，平衡离子为氢氧根。〔1〕水经过混合柱，离子交换后变为无盐水。〔2〕逆向通入水，分开阴阳树脂。〔3〕分别使用酸碱再生树脂。〔4〕逆向通入空气混合树脂。7.生物药物在生产制备中的特殊性有哪些?主要有哪些制造方法?生物药物是以生物材料为原料制取的。其制造技术具有以下特点。①目的物存在于组成非常复杂的生物材料中。②有些目的物在生物材料中含量极微，因此别离纯化步骤多，难以获得高收率。③生物活性成别离开生物体后，易变性破坏，别离过程必须十分小心，以保护有效物质的生物活性。④生物药物制造工艺几乎都在溶液中进展，各种理化因素和生物学因素(如温度、pH、离子强度)对溶液中各种组分的综合影响常常难以确定，以致许多工艺设计理论性不强，实验结果常带有很大经历成分。⑤为了保护目的物的活性及构造完整性，生物制药工艺多采用温和的“多阶式〞方法，即“逐级别离〞法。因此工艺流程长，操作繁琐。⑥生物药物的均一性检测与化学上的纯度概念不完全一样。由于生物药品对环境变化十分敏感，构造与功能关系多变复杂，因此对其均一性的评估常常是有条件的，或者只能通过不同角度测定，最后才能给出相对“均一性〞结论。生物药物别离制备方法的主要依据原理有两方面。①根据不同组分分配率的差异进展别离。②..word.zl- .-根据生物大分子的特性采用多种别离手段交互进展，别离纯化的主要方法有：a．根据分子形状和分子大小不同的别离方法；b．根据分子电离性质(带电性)不同的别离方法；c．根据分子极性大小与溶解度不同的别离方法；d．根据配基特异性不同的亲和色谱别离法。精制一个具体生物药物，常常需要根据它的多种理化性质和生物学特性，采用多种别离方法有机结合，才能到达预期目的。8.孔膜过滤技术的应用？微孔滤膜孔径在0.025-14µm围操作压力在1---10磅／英寸2之间。孔径为0.01-0.05µm的膜可以截留噬菌体、较大病毒或大的胶体颗粒，可用于病毒别离。孔径为0.1µm的膜用于试剂的超净、别离沉淀和胶体悬液，也有作生物膜模拟之用。孔径为0.2µm的膜用于高纯水的制备、制剂除菌、细菌计数、空气病毒定量测定等。孔径为0.45µm的微孔滤膜用得最多，常用来进展水的超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液的无菌检查、饮用水的细菌检查、放射免疫测定、光测介质溶液的净化以及锅炉水中Fe〔OH〕3的分析等。9.简述辅酶Q10制备的工艺路线？汽油猪心肌渣皂化速冷皂化物萃取水洗减压浓缩过滤层析减压浓缩结晶辅酶Q10结晶10.11.影响离子交换树脂交换速度的因素？①树脂颗粒的大小：树脂颗粒大小要适中。②搅拌和流速。③离子浓度：过稀、过浓都对交换速度不利。④离子的水化半径：离子在水溶液中要发生水化，水化离子在水溶液中的大小以水化半径来表示。水化半径小的离子，较易吸附。一价阳离子；Li+