薄层色谱技术

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1、.-1.薄层色谱技术概述中药是祖国医药宝库的重要组成局部，是祖国传统医学赖以防病治病的主要物质根底。中药的真伪优劣直接关系到人民用药的平安和有效。在检验中药真伪方面通常采用的检测手段有形态鉴别、理化鉴别和光谱色谱分析等。而作为色谱技术一个分支的薄层色谱由于其独具的长处而被广泛应用于中药分析。层鉴别作为法定的检验工程是各级药品检验部门和药品生产、经营部门的质检人员检验中药的强制性检验工程。在可预见的将来，薄层色谱技术仍将是中药鉴别最主要的手段之一。无须赘言，如同其它色谱技术一样，一个样品分析结果好坏，取决于能否得到一个别离度

2、和重现性良好的色谱。为了更好地执行国家药典中药薄层鉴别工程，中药检验室根本设备和配套和检验人员操作技术的规化是获得较高质量的薄层色谱最根本的要求。薄层色谱分析与其他色谱分析相比，其显著不同之一是得到的图谱是直观性很强的图象。一个比较复杂的中药薄层色谱，尤其是成分未明而斑点较多的薄层色谱往往是很难用文字描述的；何况药典正文因体例的限制，也不可能作过多的文字表达。-.word.zl.-关于同一品种的药材商品的个体差异，如何判断的问题。在实际的样品分析中，确实存在着由于商品个体差异，致使薄层色谱难以和对照药材和色谱完全吻合。其实

3、，在药材的形态鉴别中，这是司空见惯的问题，只要鉴别特征可靠，根底工作比较扎实，一般不会由于个体之间的形态差异而无法判断。因为同一品种的不同个体虽然有差异〔即使对照药材也有这个问题〕，但是既然是同一品种，也必然存在着共性特征。外在的形态是如此，反映在成分的色谱也是如此。譬如有无牲成分就是共性，如黄连均含小檗碱，小檗碱的有无固名可以作为黄连真伪鉴别的依据，但小檗碱未必就是黄连的问题。所以观察完整的色谱结合特征成分的识别，就进一步提高了鉴别的准确度；经过比较，取弃小异，做出合理的判断。对于分布地区广泛，商品规格较多的品种，需要反

4、复比较；有些品种个体之间成分变异较大，需要做大量的根底研究，掌握规律，方可设立对照药材，不能一蹴而就，所以药典中并非所有的品种都设有对照药材。在中药制剂中，由于制备工艺的不同或成分之间的相互干扰，图谱常常不能与原药材的色谱完全吻合，这就是更需要分析人员有较强的判断能力----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

5、-------器材与操作薄层板可用预制板或手工自制板，目前最常用的仍然是手工自制板。用于制备薄层板的玻璃要求外表光洁、平整，最好使用厚薄1~2mm的优质平板玻璃，普通玻璃一般不宜制作薄层板，玻璃板需洗净至不挂水，晾干，贮存于枯燥干净处备用。玻璃板反复使用时，应注意经常用洗液及碱液清洗，保持玻璃板面的光洁是保证薄层板质量的最起码要求，如选用预制板应注意生产厂家提供的有关参数，经挑选，试用是否符合要求。涂布器应能使吸附剂在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。涂层的工具有手工、半自动、全自动薄层涂布器。-.word.zl.-

6、点样器材最常用也最方便的是定量点样毛细管〔微升毛细管〕，规格有0.5ul、1.0ul、2.0ul、5.0ul、10ul等多种。选用时要求标示容量准确，管端平整光滑，管壁干净，液流通畅，无堵塞，无污染。也可使用色谱用的微量移液管或薄层用微升注射器。为了提高点样效率，还可以选用点样辅助设备，如点样支架，半自动或自动点样器。先用点样器材和辅助设备应注意器材本身的质量，依赖劣质的器材不能保证点样的质量。一般的概念定性鉴别没有定量的要求，但为了对样品在定性鉴别时能同时给以“量化〞评价，点样要求最好还是用定量的点样器材。展开箱〔层析缸

7、〕应当用薄层色谱专用的展开箱，展开箱有水平式及直立式两种类型；日常用的最多的是直立式展开箱，它又分为平底展开箱和双槽展开箱。双-槽展开箱具有节省溶剂、便于平衡、可控制展开箱的湿度等优点，推荐使用此种展开箱。水平式展开箱需要使用预制板或“加固〞的自制板〔如加羧甲基纤维素钠〕，用水平式展开箱还可以从薄层板的两侧向中间展开，这样可使一块薄层板所承受的样品个数比常规上行展开的薄层板增加一倍，但是由于展距短〔约5cm〕，所以适合于高效预制板。用不合规格的玻璃器皿，如生物标本缸等不能保证展开的质量。显色与检测仪器载有样品的薄层板展开后

8、，有的需要用某些试剂〔如显色剂〕使之显色。涂布显色剂的方法有喷雾法及浸渍法。喷雾用的喷雾瓶应能在一定压力下使试剂喷成均匀的细雾状-.word.zl.-。浸渍法用的浸渍为特制的扁平玻璃槽，使用时，将展开后的薄层板平稳垂直地放入浸渍槽中一至数秒钟后取出，揩净薄层板反面剩余的试剂〔需要时加热〕使之显色。通常使