猪孕激素孕酮ELISAKit

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1、猪孕激素/孕酮（PROG）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E0459pUSCNLIFETMn本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定猪血清、血浆或其它相关生物液体中PROG含量。实验原理用纯化的PROG抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次参加标本或标准品、生物素化的PROG抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物（TMB）显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PROG呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度〔值〕，

2、计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1、酶标板：一块〔96孔〕2、标准品〔冻干品〕：2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100ng/ml，然后做系列倍比稀释〔注：不要直接在板中进行倍比稀释〕，分别配制成100ng/ml，50ng/ml，25ng/ml，12.5ng/ml，6.25ng/ml，3.12ng/ml，1.56ng/ml，样品稀释液直接作为空白孔0ng/ml。如配制50ng/ml标准品：取0.3ml〔不要少于0.3ml〕100ng/

3、ml的上述标准品参加含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。3、样品稀释液：1×20ml。4、检测稀释液A：1×10ml。5、检测稀释液B：1×10ml。6、检测溶液A：1×120/瓶〔1:100〕。临用前以检测稀释液A1:100稀释〔如：10检测溶液A/990检测稀释液A〕，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制〔100/孔〕，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。7、检测溶液B：1×120/瓶〔1:100〕。临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8、底

4、物溶液：1×10ml/瓶。9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。10、终止液：1×10ml/瓶〔2mol/LH2SO4〕。11、覆膜：5张12、使用说明书：1份自备物品1、酶标仪〔建议仪器使用前提前预热〕2、微量加液器及吸头，EP管3、蒸馏水或去离子水，滤纸标本的采集及保存1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应防止反复冻融。2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于1000g离心15分钟，取上清即可检

5、测，或将上清置于-20或-80保存，但应防止反复冻融。3、其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应防止反复冻融。注：以上标本均应密封保存，4保存应小于1周，-20不应超过1个月，-80不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。操作步骤实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在