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1、常用缓冲液配置 实验室常用缓冲液配置方案1)1MTris-HCl(pH7、4,7、6,8、0) 组份浓度:1MTris-HCl配制量:1L 配制方法: 1、称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2、加入约800ml得去离子水,充分搅拌溶解。 3、按下表量加入浓盐酸调节所需要得pH值。 PH值 浓HCl 7、4 约70ml 7、6 约60ml 8、0 约42ml 4、将溶液定容至1L。 5、高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液得pH值随温度得变化差
2、异很大,温度每升高1℃,溶液得pH值大约降低0、03个单位。 2)10TEBuffer(pH7、4,7、6,8、0) 组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L 配制方法: 1、量取下列溶液,置于1L烧杯中。 1MTris－HClBuffer(PH7、4,7、6,8、0)100ml 500mMEDTA(PH8、0) 20ml 2、向烧杯中加入约800ml得去离子水,均匀混合。 3、将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。 4、室温保存。 3)1.5MTris-HCl(pH8、8)
3、组份浓度:1.5MTris-HCl配制量:1L 配制方法: 1、称量181.7gTris置于1L烧杯中。 2、加入约800ml得去离子水,充分搅拌溶解。 3、用浓盐酸调节pH值至8、8。 4、将溶液定容至1L。 5、高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液得pH值随温度得变化差异很大,温度每升高1℃,溶液得pH值大约降低0、03个单位。 4)3M醋酸钠(pH5、2) 组份浓度:3M醋酸钠 配制量:100ml配制方法: 1、称量40.8gNaAc3H2O置
4、于100-200ml烧杯中,加入月40ml得去离子水搅拌溶解 2、加入冰醋酸调节pH值至5、23、加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。 5)PBSBuffer 组份浓度:137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L 配制方法: 1、称量下列试剂,置于1L烧杯中。 NaCl 8g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42g KH2PO4 0.27g 2、向烧杯中加入约800ml得去离子水,充分搅拌溶解。 3、滴加浓盐酸将pH值
5、调节至7、4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4、高温高压灭菌后,室温保存。 注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2与0.5mMMgCl2。 6)10M醋酸铵 组份浓度:10M醋酸铵配制量:100ml配制方法: 1、称量77、1g醋酸铵置于100～200ml烧杯中,加入约30ml得去离子水搅拌溶解。 2、加去离子水将溶液定容至100ml。 3、使用0、22mm滤膜过滤除菌。 4、密封瓶口于室温保存。 注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。 7
6、)苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1) 配制方法: 1、说明:从核酸样品中
