O型口蹄疫病毒缅甸98株空衣壳表达及免疫原性分析

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1、密级：论文编号：中国农业科学院学位论文Ｏ型口蹄疫病毒缅甸９８株空衣壳表达及免疫原性分析ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄＩｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙＡｎａｌｓｉｓｏｎＥｍｔＣａｓｉｄｙｐｙｐｏｆＦｏｏｔ－ａｎｄ－Ｄ’ＭｏｕｔｈｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓＴｅＯＭａｎｍａｒｓ９８Ｓｎｙｐｙｔｒａｉ硕士研究生：胡高维指导教师：张志东研究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：兰州兽医研究所研究生院２０１７年５月Secrecy:No.ChineseAcademyofA

2、griculturalSciencesDissertationExpressionandImmunogenicityAnalysisonEmptyCapsidofFoot-and-MouthDiseaseVirusTypeOMyanmar’s98StrainM.S.Candidate：HuGao-WeiSupervisor：ProfessorZhangZhi-DongDegree：MasterofVeterinarianSpecialty:VeterinaryMedicineMay2017独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下

3、进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体

4、上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日I中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目O型口蹄疫病毒缅甸98株空衣壳表达及免疫原性分析动物疫苗与分子免论文作者胡高维专业领域兽医研究方向疫学指导教师张志东培养单位（研究所、中心）兰州兽医研究所姓名职称单位专业签名评阅人答辩主席答辩委员会议记录（秘书）论文答辩时间地点II摘要口蹄疫（foot-and-mouthdisease,FMD）是由口蹄疫病毒（foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV）引起的一种急性、烈性、高

5、度接触性传染病，主要侵害猪、牛、羊等偶蹄动物，疾病的发生对畜牧业造成巨大损害。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的传染病，我国也将其列在一类传染病之首。目前，接种疫苗是防控FMD的有效手段，FMD灭活疫苗在FMD的防控过程中发挥着不可替代的作用。常规灭活疫苗是毒株经病毒培养扩增，灭活剂处理后添加佐剂制成的，其生产过程存在灭活不完全和散毒的风险。病毒空衣壳包含了完整病毒上的所有免疫显性位点，且不含核酸成分，因而具有更高的安全性，是一种能替代灭活病毒制造疫苗的新型免疫原。本研究以近年来流行的O型FMDV缅甸98株（O/MYA98/BY

6、/2010株）为研究对象，构建了表达缅甸98株衣壳蛋白的杆状病毒，并通过查阅相关文献和参照本实验室FMDVO型ON株酸化培养的结果，进一步构建了两组在FMDVP1序列包含不同耐酸定点突变的衣壳蛋白表达重组杆状病毒。三组重组杆状病毒感染Sf9昆虫细胞成功表达并收集重组衣壳蛋白，通过间接免疫荧光试验、蛋白免疫印迹、双抗夹心酶联免疫吸附试验等多种方法检测到重组衣壳蛋白的表达，且具有良好的抗原性。经过耐酸定点突变的两组衣壳蛋白也表现出相应的耐酸作用。将重组衣壳蛋白混合GEL佐剂制成疫苗，免疫小鼠后能够刺激机体产生与灭活疫苗一致甚至更高的抗体水平，

7、免疫豚鼠攻毒保护试验则表明，三组重组衣壳蛋白制成的疫苗能够发挥与灭活疫苗相似或更好的保护作用，试验进一步证实了空衣壳疫苗作为新型疫苗的可行性，为构建耐酸FMDV衣壳蛋白及其空衣壳疫苗的深入研究提供参考。关键词：O型口蹄疫病毒,缅甸98株,空衣壳,定点突变,动物实验IIIAbstractFoot-and-mouthdisease(FMD)isahighlycontagiousdiseasecausedbyfoot-and-mouthdiseasevirus(FMDV),whichmainlyinfectscloven-hoofedsucha

8、spigs,sheepandcattleandcauseshugeeconomicdamagetolivestocksector.FMDwaslistedasanotifiablediseas