DB23∕T 2356—2019 树莓秋福组培快繁技术规程(黑龙江省)

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1、ICS65.020.01B64DB23黑龙江省地方标准DB23/T2356—2019树莓秋福组培快繁技术规程2019-04-03发布2019-05-02实施黑龙江省市场监督管理局发布DB23/T2356—2019前言本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省森林工业总局提出。本标准起草单位：黑龙江省林业科学研究所、黑龙江省森林环境研究所、黑龙江省林业科学院、苇河林业局。本标准主要起草人：李艳霞、丛喜东、田新华、闫朝福、刘洪志、韩瑞雪、王福德、刘建明、刘忠玲、姚颖等。IDB23/T2356—20

2、19树莓秋福组培快繁技术规程1范围本标准规定了树莓(RubusidaeusL.)秋福（AutumnBliss）组培快繁技术的培养基制备、外植体选择与处理、诱导分化和增殖、生根培养、炼苗移栽及技术档案。本标准适用于树莓秋福组培快繁技术。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T1882林木组织培养育苗技术规程3培养基制备3.1培养基不定芽分化诱导培养基：MS+6-BA0.5mg/L+

3、GA30.2mg/L+IBA0.1mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH5.8。增殖培养基：MS+6-BA1.0mg/L+GA30.5mg/L+IBA0.1mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH5.8。生根培养基培养：1/2MS+IBA0.5mg/L。3.2培养基灭菌瓶装培养基需在10h内完成灭菌，采用高压蒸汽灭菌锅灭菌，在压力0.105MPa、温度121℃条件下灭菌20min～25min。3.3培养基保存灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下7d内使用，2℃～4℃条件下14d内使用。培养基应保存于

4、洁净环境中，注意避光和防尘。4外植体选择与处理4.1外植体的选择选择生长健壮的植株作为采样母株，剪取母树当年幼枝茎段作为外植体，外植体大小在2cm～3cm之间。4.2外植体灭菌先将外植体用洗涤剂作表面清洗，再将外植体用流水冲洗30min后，放入消毒瓶中。把装有外植体的消毒瓶用75%的酒精棉擦拭后放入超净工作台，在超净工作台上打开装有外植体的消毒瓶，倒入75%酒精并摇晃消毒瓶，浸泡消毒30s，倒去酒精，用无菌水冲洗外植体3次～5次；然后用0.1%HgCl2浸泡8min，无菌水冲洗3次～5次，并浸泡30min，再用无菌滤

5、纸吸干外植体表面的水分。4.3外植体切割将表面消毒后的外植体切割，接入培养基中。茎段在接种前用手术剪刀剪去两端，切成长1.0cm～2.0cm。1DB23/T2356—20195诱导分化和增殖5.1诱导分化先将培养瓶的封口膜轻轻取下，放在一边，将培养瓶口倾斜在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒。将枪式镊子在酒精灯上灼烧消毒并冷却后，将切割好的外植体放入不定芽分化诱导培养基中，每个培养瓶放3个外植体，接种后盖上封口膜，并标注日期。培养室的温度控制在25℃±3℃，相对空气湿度控制在70%～80%，光照强度为27μmol•m-2•s-

6、1～36μmol•m-2•s-1，光照时间为12h/d。培养20d～25d。5.2增殖外植体经诱导分化培养生成愈伤组织及不定芽，将其转接至增殖培养基中，继代培养30d～35d，培养条件同5.1。6生根培养选取培养瓶中长度1.5cm～3.0cm生长健壮的不定芽接种至生根培养基中，培养20d～30d，培养条件同5.1。7炼苗移栽7.1炼苗7.1.1炼苗标准当组培苗基部长出3条以上，根长达1.0cm～3.0cm，即可进行炼苗处理。7.1.2炼苗方法将组培苗转移到日光温室中，自然散射光下炼苗，温度控制在20℃～25℃，空气相

7、对湿度在70%～80%，每天中午在培养瓶周围喷洒雾水。3d后揭去封口膜，2d～4d后即可移栽。7.2移栽取出组培苗，用清水洗去苗基部的培养基，移栽至装有腐殖土、草碳土和细河沙（混合比例为2：1：1）的混合基质的育苗盘中。育苗盘规格为35cm×50cm，育苗盘四壁高度不应低于7cm，育苗基质放入育苗容器并浇透水后，厚度不应小于5cm，水渗干后再覆上一层土。温室应保持70%～80%的空气湿度，温度应在18℃～25℃，根据土壤湿度给予植株适度的浇水处理，育苗管理按照LY/T1882进行。8技术档案档案内容主要包括：材料来源

8、、外植体类型、培养基及植物生长调节剂、诱导率、污染率、增殖系数、生根率和移栽成活率。2