DB4117∕T 169.26-2022 动物疫病流行病学调查技术规范 第26部分：鸡马立克氏病(驻马店市)

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ICS11．220CCSB414117驻马店市地方标准DB4117/T169.26—2022代替DB4117/T169.26-2018动物疫病流行病学调查技术规范第26部分：鸡马立克氏病2022-07-26发布2022-8-26实施驻马店市市场监督管理局发布

1DB4117/T169.26—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是DB4117/T169《动物疫病流行病学调查技术规范》的第26部分。本文件代替DB4117/T169.26-2018《动物疫病流行病学调查技术规范第26部分鸡马立克氏病》，与DB4117/T169.26-2018相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：——补充和修改了规范性引用文件（见第2章）；——细化和完善了紧急流行病学调查技术要求（见第7章的7.1、7.2、7.3、7.4、7.5）；——修改了规范性附录（见附录A、附录B、附录C）；——修改了病毒分离鉴定（见第5章的5.4.3.1）；——修改了病理变化（见第5章的5.3）；——删除了病理组织学诊断（见2018版的4.4.2）；——修改了鸡马立克氏病诊断结果判定（见第5章的5.5）；——增加了生物安全个人防护内容（见第4章的4.1、4.2）；——增加了荧光定量PCR检测方法（见第5章的5.4.3.3）；本文件由驻马店市农业农村局提出。本文件由驻马店市畜牧兽医标准化技术委员会归口。本文件起草单位：驻马店市动物疫病预防控制中心、确山县留庄镇农业农村服务中心、西平县农业综合行政执法大队、温县动物疫病预防控制中心、鲁山县农业农村局、泌阳县动物卫生监督所、焦作市动物卫生监督所、正阳县动物疫病预防控制中心、泌阳县动物疫病预防控制中心、确山县农业综合行政执法大队、确山县公共检验检测中心、鹿邑县谷阳街道办事处社区建设服务中心、西平县动物疫病预防控制中心、许昌市动物疫病预防控制中心、周口市川汇区动物检疫站、汝南县畜牧兽医技术服务中心、沁阳市农业综合行政执法大队、商丘市畜产品质量监测检验中心、汝南县畜牧改良站。本文件主要起草人：李永彬、刘霞、刘国强、王梦艳、王国超、吴明丽、白金、马萌萌、武长水、王倩、黄旭、曹华、周雪梅、葛会杰、王云丽、节琴、李艳艳、郭勇、谢萌、陈东坤、刘强。本文件的历次版本发布情况为：—DB4117/T169.26-2018。I

2DB4117/T169.26—2022动物疫病流行病学调查技术规范第26部分：鸡马立克氏病1范围本文件规定了鸡马立克氏病术语和定义、现场调查生物安全防护、诊断指标、常规流行病学调查、紧急流行病学调查等技术要求。本文件适用于鸡马立克氏病的流行病学调查。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18643-2021鸡马立克氏病诊断技术NY/T541动物疫病实验室检验采样方法DB4117/T169.1动物疫病流行病学调查技术规范第1部分总则DB4117/T217.1动物疫病紧急流行病学调查技术指南第1部分总则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1鸡马立克氏病马立克氏病，是由马立克氏病病毒引起的，以危害淋巴系统和神经系统，引起外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤的单个或多个组织器官发生肿瘤为特征。3.2动物疫情测报网络简称测报网络，是由市、县动物疫病预防控制机构为监测主体，以部分养殖企业为监测网点所组成的动物疫情测报系统。全市测报网络分为市级和县级。3.3市、县级测报网络分别指市级动物疫病预防控制机构、县级动物疫病预防控制机构负责的测报网络。3.4市、县级动物疫情测报网络监测网点（简称市、县级监测网点）分别指由市级动物疫病预防控制机构、县级动物疫病预防控制机构负责监测的样品采集点。2

3DB4117/T169.26—20224现场调查生物安全防护4.1调查采样人员防护4.1.1个人防护穿戴顺序。依次是口罩、工作帽、防护服、防护眼睛、防护靴、双层手套，将手套套在防护服袖口外面。4.1.2个人防护脱掉顺序。依次是脱第一层手套、摘下防护眼睛、脱防护服、脱防护靴、摘帽子、脱一只手套、摘口罩、脱掉另一只手套。4.2安全防护要求4.2.1严格遵守生物安全操作的相关规定，严防人畜共患病感染，同时做好环境消毒及动物活组织的无害化处理。4.2.2调查采样人员在开展流行病学调查过程中不得造成流行病学调查点之间交叉感染。5诊断指标5.1流行特点鸡是主要的自然宿主。2周龄以内的雏鸡最易感。6周龄以上的鸡可出现临床症状，12～24周龄最为严重。病鸡和带毒鸡是最主要的传染源。呼吸道是主要的感染途径，羽毛囊上皮细胞中成熟型病毒可随着羽毛和脱落皮屑散毒。病毒对外界抵抗力很强，在室温下传染性可保持4～8个月。5.2临床症状5.2.1神经型最早症状为运动障碍。常见腿和翅膀完全或不完全麻痹，表现为“劈叉”式、翅膀下垂；嗉囊因麻痹而扩大。5.2.2内脏型常表现极度沉郁，有时不表现任何症状而突然死亡。有的病鸡表现厌食、消瘦和昏迷，最后衰竭而死。5.2.3眼型视力减退或消失。虹膜失去正常色素，呈同心环状或斑点状。瞳孔边缘不整，严重阶段瞳孔只剩下一个针尖大小的孔。5.2.4皮肤型全身皮肤毛囊肿大,以大腿外侧、翅膀、腹部尤为明显。5.3病理变化5.3.1内脏型该类型病理变化为在肝、性腺、脾、肾、肺、前胃以及心脏出现广泛的弥漫性肿瘤。青年鸡的肝脏一般中度肿大，但成年鸡肝脏严重肿大。3

4DB4117/T169.26—20225.3.2神经型该类型病理变化为外周神经肿胀，呈半透明水肿样，色泽变淡，横纹消失，其肿胀程度一般为正常神经的2～3倍。这些变化多发生在腰荐神经丛、坐骨神经丛、臂神经丛、颈部迷走神经丛等部位。由于多为不对称性，通过比较对侧神经将有助于判定。5.3.3皮肤型该类型病理变化比较少见。其病理变化特征为：以皮肤的羽毛囊为中心，形成半球形隆起的肿瘤，其表面有时可见鳞片状棕色痂皮。5.3.4眼型该类型由于淋巴细胞浸润虹膜而导致的病理变化，虹膜呈环状或斑点状褪色，出现淡灰色；瞳孔不规则，有时偏向虹膜一侧。5.4实验室检测5.4.1样品采集疑似鸡马立克氏病时，应立即按照GB/T18643和NY/T541的要求采集病料并填写样品采集登记表（附录A），进一步进行实验室诊断。5.4.2血清学诊断琼脂免疫扩散试验检测按照GB/T18643鸡马立克氏病诊断技术第五章节规定执行。5.4.3病原学诊断5.4.3.1病毒分离鉴定按照GB/T18643鸡马立克氏病诊断技术第四章节规定执行。5.4.3.2聚合酶链式反应试验按照GB/T18643鸡马立克氏病诊断技术第六章节规定执行。5.4.3.3荧光定量PCR按照GB/T18643鸡马立克氏病诊断技术第七章节规定执行。5.5结果判定5.5.1临床检测鸡只或相关细胞培养物，经病毒分离，或琼脂免疫扩散试验，或聚合酶链式反应试验检测，或实时荧光聚合酶链式反应试验检测，其中一种方法检测为阳性，可判定为鸡马立克氏病毒感染。5.5.2临床疑似判定发生鸡马立克氏病的鸡只，经分离出鸡马立克氏病毒且鉴定为野毒株感染，或经琼脂免疫扩散实时检测出抗原阳性，或经聚合酶链式反应试验检测结果符合野毒株特征，可判定为鸡马立克氏病。5.5.3临床无明显特异症状的鸡只，经分离出鸡马立克氏病毒且鉴定为野毒感染，或经聚合酶链式反应试验检测结果符合野毒株特征，判定为存在鸡马立克氏病毒野毒株感染。5.5.4临床无明显特异症状的鸡只，分离出鸡马立克氏病毒且鉴定为疫苗株感染，或经聚合酶链式反应试验检测结果符合疫苗株特征，判定为正常的鸡马立克氏病疫苗免疫。6常规流行病学调查4

5DB4117/T169.26—20226.1目的任务调查鸡马立克氏病的发生情况，了解其临床症状、流行强度和流行规律，为预警预报提供依据，提出防控措施建议。6.2调查程序6.2.1县级动物疫病预防控制机构以县级监测网点和固定流行病学调查点为流行病学调查点，每个监测网点每年不少于2次，固定流行病学调查点每月实施1次，每月对调查数据进行分析汇总同时填写附录B、附录C相关表格并上报至市级动物疫病预防控制机构。6.2.2市级动物疫病预防控制机构以市级监测网点和固定流行病学调查点为流行病学调查点，每个监测网点每年不少于2次，固定流行病学调查点每月实施1次，每月对全市调查数据进行分析汇总同时填写附录B、附录C相关表格并上报至省、市级动物疫病预防控制机构。6.2.3国家有特殊要求的，按照要求进行。6.3调查要求采用询问、信访、问卷填写、现场查看、查阅资料和检测等方式进行流行病学调查，同时分动物种类填写常规流行病学调查表及相关养殖场信息（附录B、附录C）。7紧急流行病学调查在常规调查过程中发现鸡马立克氏病较短时候内出现大批鸡群发病，且蔓延较快时启动紧急流行病学调查。7.1目的任务掌握鸡马立克氏病突发情况，分析可能扩散范围，为预警预报提供依据，提出防控措施建议。7.2调查程序7.2.1市、县级动物疫病预防控制机构接到疑似病例报告或调查中发现疑似病例，应立即核实信息，进行初步调查并填写紧急流行病学调查表（见DB4117/T217.1规范性附录），同时按规定报告疫情至市级动物疫情主管部门。市级动物疫情主管部门接到报告后立即组织市级动物疫病预防控制机构开展现场调查。7.2.2市级动物疫病预防控制机构按照市动物疫情主管部门的要求及时派专业技术人员深入现场开展流行病学调查。7.2.3采集样品时进行实验室检测。疑似鸡马立克氏病时，应立即按照GB/T18643和NY/T541的要求采集病料并填写样品采集登记表（附录A）进行实验室诊断。7.2.4现场调查人员进一步核实情况后，采集有关信息，详细、全面、准确收集相关信息。7.2.5现场调查人员根据获取的信息，描述动物疫情现状（时间、空间和群间分布等），分析疫病来源，判断疫情发展趋势，提出控制措施建议，形成调查评估报告。怀疑疫情扩散时，在高风险地区开展追踪调查。7.2.6对现场调查人员的调查评估报告进行审核并及时上报至市级动物疫情主管部门。7.3工作要求5

6DB4117/T169.26—2022采取问卷调查、现场调查、查阅历史资料和采样检测相结合的方式进行。结合全市流行病学调查方案按时完成调查、采样和检测工作，并及时收集数据、汇总和分析，撰写调查报告。7.4调查步骤和内容组织准备、确定疫情存在、建立病例定义、开展调查按照DB4117/T217.1执行。7.5结果分析和报告描述病例的三间分布、建立并验证假设、措施建议及报告按照DB4117/T217.1执行。AA6

7DB4117/T169.26—2022附录A（资料性）样品登记表表A.1规定了样品采集登记表。表A.1样品采集登记表县/乡名称：被采样单位名称采样地点联系人联系电话邮编动物类别样品名称采样日期动物种类日龄存栏量样品数量样品编号被采样动物临床情况免疫疫苗疫苗疫苗批号免疫末次免疫剂量末次免疫至采样的被采样病种类型厂家次数间隔天数动物免疫情况检测目的被采样单位盖章或签名采样单位盖章采样人签名年月日年月日备注注1：样品类型指全血、血清、拭子、组织样品等。注2：动物种类指蛋种鸡、肉种鸡、商品鸡、蛋鸭、肉鸭等。注3：疫苗类型应注明，禽流感疫苗标注毒株类型。此单一式三份，第一联由采样单位保存、第二联随样品、第三联由被采样单位保存。BB7

8DB4117/T169.26—2022附录B（资料性）流行病学调查表表B.1规定了鸡场/户流行病学调查表。表B.1鸡场/户常规流行病学调查表场/户名称开始养禽时间年月禽场地址县乡/镇/街道办村；东经，北纬。1．现养殖情况（头）蛋种鸡商品蛋鸡肉种鸡商品肉鸡种鸭蛋鸭肉鸭鹅其它：品种现存栏（羽）去年出栏（羽）2．防疫状况动物防疫条件合格证：□有□无防疫设施：□场舍有门禁□入口有消毒设施□进场消毒、换胶靴□定期消毒□养殖场相对独立病死动物无害化处理设施：□场内有□场内无□交无害化处理厂3．疫苗使用情况疫苗种类毒株生产企业4．临床疑似疫病发病情况（时间是发病的月份；发病数、死亡数是绝对数，不是%）。病种时间发病数死亡数主要症状备注：1.经度和纬度保留6位小数，例如：东经116.044722度，北纬36.077222度。2.本表格仅作为流行病学调查专用，信息严格保密，请如实填写。填表人：联系电话：填表日期：年月日CC8

9DB4117/T169.26—2022附录C（资料性）疫苗临床应用效果流行病学调查表表C.1规定了禽疫苗临床应用效果流行病学调查表。表C.1禽疫苗临床应用效果流行病学调查表养殖场户名称启用时间地址市县（区、市）乡（镇）村一、养殖情况□规模蛋种鸡场□规模蛋鸡场□规模肉种鸡场规模肉鸡场□规模种鸭场□规模蛋鸭场□规模肉鸭场□规模鹅场□散养鸡□散养鸭散养鹅目前存栏数量：去年出栏量：年末存栏量：二、高致病性禽流感疫苗应用情况疫苗种类疫苗毒株生产企业三、免疫注射安全（免疫注射3天内，发生的临床现象）1、免疫应激免疫数：应激反应数：应激发病数：应激死亡数：2、应激减蛋率（蛋禽、种禽场填写）最近一次免疫时间：免疫前3天产蛋枚数：免疫后3天产蛋枚数：四、疫苗使用后有效性（免疫保护期内，临床怀疑高致病性禽流感发病情况）生产企业免疫数发病时间发病数发病死亡数总体评价：□好□一般□效果不明显□无效免疫程序：填表人：联系方式：填表时间：年月日9