DB54∕T 0260-2022 西藏绒山羊人工授精技术规程(西藏自治区)

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ICS65.020.30CCSB43DB54西藏自治区地方标准DB54/T0260—2022西藏绒山羊人工授精技术规程

1DB54/T0260—2022目次目次.......................................................................I前言............................................................错误！未定义书签。1范围................................................................错误！未定义书签。2规范性引用文件......................................................错误！未定义书签。3术语和定义..........................................................错误！未定义书签。4种猪培育............................................................错误！未定义书签。5选种................................................................错误！未定义书签。6选配................................................................错误！未定义书签。7采精................................................................错误！未定义书签。8配种................................................................错误！未定义书签。9性能测定............................................................错误！未定义书签。10引种与留种.........................................................错误！未定义书签。11饲料要求...........................................................错误！未定义书签。12疫病防控...........................................................错误！未定义书签。13选址布局...........................................................错误！未定义书签。14档案管理...........................................................错误！未定义书签。附录A（资料性）生产统计表.....................................错误！未定义书签。I

2DB54/T0260—2022前言本标准按照GB/T1.1规则起草。本标准由西藏自治区农牧业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：西藏自治区农科院畜牧兽医研究所、西藏自治区农畜产品质量安全检验检测中心、阿里日土县绒山羊原种场、那曲尼玛县白绒山羊原种场、阿里措勤县紫绒山羊原种场。本规范主要起草人：吴玉江、索朗达、巴贵、次仁德吉、德吉、孙建春、索朗曲珍、宋天增、阿旺措吉、珠多、丹增、平措。本标准为首次制定。1

3DB54/T0260—2022西藏绒山羊人工授精技术规程1范围本规程规定了西藏绒山羊人工授精的方法和操作程序。本规程适用于西藏绒山羊人工输精站、乡村配种站、大型养羊户、规模化养羊场。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB54/T0067-2013西藏山羊白绒型DB54/T0068-2013西藏山羊紫绒型DB54/T0062-2012西藏绒山羊养殖技术规范3术语和定义下列术语和定义适用本标准。3.1人工授精采用人工方法将种公畜的精液采出并经过处理后，用输精枪输送到发情母畜的生殖道内，使之受孕的一种繁殖技术。3.2假阴道筒状结构，由硬橡胶外壳、柔软橡胶内胆和带夹层的集精杯组成、用前组装的采精用具。3.3集精杯临时收集和保存精液的用具。3.4输精枪2

4DB54/T0260—2022又名输精器，用于将种公畜精液输送到发情母畜生殖道内的工具。3.5精子活力在37℃温度下的载物台上进行镜检,直线前进运动的精子占总数的百分比。3.6精子活率活精子数占总精子数的百分比。3.7精子密度+-每毫升中所含精子数，分密、中、稀三级，分别用M、M、M表示。4工作场地人工授精站采精室、精液品质检查室、输精室室温保持在18℃～25℃为宜，采精室、输精室面积在10㎡～15㎡，精液品质检查室10㎡以上为宜。人工授精站周围环境卫生状况良好。5采精5.1采精前的准备5.1.1种公羊的准备5.1.1.1种公羊的选择根据绒山羊选育计划要求，选择体质结实、生殖器官正常、配种能力强、遗传性稳定及精液品质好的特一级公羊做种用，具体参照DB54/T0067-2013、DB54/T0068-2013执行。5.1.1.2种公羊的采精训练舍饲条件下青年种公羊的采精训练从8月龄开始，初期每周采精1次，周岁后正常采精。而放牧条件下公羊的采精训练从16月龄开始，成年种公羊在配种前1个月开始，定人、定时采精，第一周采精1次，第二周采精2次，逐渐接近正常采精次数。每天采精1次～2次，每次采精间隔2小时～3小时。5.1.2母羊的准备配种季节来临以前要做好母羊群的羔羊断奶、抓绒、组群，并进行检疫、预防接种、驱虫、药浴等工作，使母羊群有充分的时间来抓膘。组群时，将老、弱、病及不适于繁殖的母羊淘汰。配种前一个月要对母羊的膘情进行检查，进一步抓好放牧，做到满膘配种，在较好的草场上放牧或短期补充少量的饲3

5DB54/T0260—2022料，饲料配方参照DB54/T0062-2012执行，保障成年健康母羊群发情整齐、排卵正常。在配种前7～10天，羊群进入人工授精站草场，准备配种。5.1.3试情公羊的选择及管理试情公羊应选择不参与配种、身体健康、性欲旺盛、没有疾病的2～5周岁公羊，佩戴试情布。试情布为长50cm、宽30cm的白布，四角系上带子，每当试情时拴在试情公羊腹下，使其无法交配。一般将试情公羊单独放牧和管理，配种季节远离母羊群放牧，防止偷配。器械药品的准备5.1.4.1用具的准备主要用具有显微镜、开膣器、假阴道、集精杯、输精枪、高压灭菌消毒锅及操作台等，详见附录A。5.1.4.2用具的消毒凡接触山羊精液的用具，在使用前后务必用中性肥皂水或1%碳酸钠水溶液洗涤，再用温水冲洗干净，干燥备用。用前再用灭菌过的生理盐水冲洗2次～3次方可使用。5.1.4.3假阴道的准备a）假阴道的安装将内胎装入外壳内，露出的两端向外壳表面翻卷，使内胎和外壳贴合紧密，松紧均匀。外壳中央上有小孔，孔上安装孔塞，孔塞上安装调节钮。b）假阴道的调试将安装好的假阴道，拔开气嘴，将50℃～55℃的温水150ml～180ml加入用漏斗注入到假阴道的夹层内，再将气嘴安装好；用嘴对准气嘴，打开调节阀，向假阴道夹层内吹入适量空气，以使假阴道的采精口形成三角形，以可容纳公羊阴茎为宜，关闭调节阀即可；然后从假阴道采精口一端用消毒玻棒或镊子夹取消毒纱布，蘸取少量润滑剂，一般使用石蜡油、白凡士林油，均匀涂抹于假阴道内胎的前1/2段；随后用经消毒的温度计检测假阴道内腔温度，以达到39℃～42℃为宜。5.2采精操作选择发情的健康母羊作为台羊，或选择采精用的固定台羊亦或利用假台羊。种公羊在采精之前，应以湿毛巾将阴茎的包皮周围擦拭干净。采精时，采精人员应蹲于台羊右侧，右手持假阴道与地面成35°～40°角，紧靠于台羊尻部，注意气嘴不要抵到公羊腹部，当种公羊爬于台羊背上并伸出阴茎时，采精人员必须敏捷地用左手拇指和食指轻托阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。公羊射精后，立即将假阴道竖起，排除空气，取下集精杯，盖上集精杯杯盖，记录公羊耳号送精液处理室处理。4

6DB54/T0260—2022种公羊一般每周采精2天，日可采精2次，必要时可增加到3次～4次。第二次采精后应让公羊休息2小时～3小时，适当补充蛋白质，再进行第三次采精。6精液品质检查6.1感官检查6.1.1射精量西藏绒山羊成年公羊每次射精量为0.5ml～1.5ml，一般为0.8ml左右，用输精器或刻度试管测量。6.1.2色泽正常羊精液为乳白色。凡是呈灰、青、红和绿色或有絮状物者，一律废弃。6.1.3气味正常精液无味或略带腥味。凡带有腐败臭味或异味者，一律废弃。6.2镜检用玻棒沾取少量原精液在载玻片上，并放置于38℃的恒温载物台上，用100～400倍的生物显微镜观察，可以评定精子的密度和活力指标。精液检查表见附录B。活力：以五级评定。100%的精子做直线前进运动者为一级，即活力为1；80%为二级，即活力为0.8；60%为三级，即活力为0.6；40%为四级，即活力为0.4；20%以下者为五级，即活力为0.2。密度：以“密、中、稀”评定。“密”：精子数充满视野，即精子之间空隙不足一个精子长度；“中”：精子之间有明显的空隙，即精子之间空隙有1个-2个精子长度；“稀”：只有少数精子，即精子之间空+-隙2个精子长度以上，分别用M、M、M表示。活力三级以上、密度中级以上者可用于稀释输精。7精液稀释7.1稀释液的制作及使用稀释液的配制，最好现配现用，稀释液配方见附录C。7.2稀释倍数精液在稀释前必须进行活力和密度检查，然后确定稀释倍数。鲜精活力达0.6以上，可作1倍～3倍稀释，活力0.6以下，采用原精输配。7.3精液稀释操作将精液和稀释液同时置于30℃左右的水浴锅或恒温箱中，做1分钟以上同温处理。稀释时，将稀释液沿杯（瓶）壁缓缓加入精液中，然后轻轻摇动或用无菌玻棒搅拌，使之混合均匀。稀释完毕后，必须作活力检查，如稀释前后活力一样，即可输精。5

7DB54/T0260—20228母羊的发情鉴定8.1外部观察法发情母羊常表现出食欲减退、鸣叫不安、与同群羊只角斗、摆尾现象，喜欢接近公羊，接受试情公羊爬跨，外阴部充血肿胀，流出黏液，可初定为发情。8.2阴道检查法为避免假发情造成损失，用上述方法初定后，再做进一步阴道发情检查。将母羊保定，擦洗干净外阴后，对开膣器进行清洗、消毒，并涂上润滑剂；检查员左手横持开膣器，闭合开膣器前端，把手平行与地面缓缓插入阴道，轻轻打开前端，用手电筒检查阴道内部变化，若发现阴道黏膜充血、红色、表面光亮湿润，有透明黏液渗出，子宫颈口充血、松弛、开张、有黏液流出时，即可定为发情。9人工输精9.1输精前的准备9.1.1输精室的准备9.1.1.1输精室要保持宽敞清洁，地面平坦而不滑，环境安静。9.1.1.2输精室内要装有固定架，以便操作，输精室内禁止吸烟及存放刺激性异味的药物，以免影响精液品质，同时保持室内清洁卫生。9.1.2输精器材的准备输精前所有的器材要消毒灭菌，对于输精器及开膣器最好蒸煮或在高温干燥箱内消毒。输精器以每只母羊准备1支为宜，当输精器不足时，可在每次用后先用蒸馏水棉球擦净外壁，再以酒精棉球擦洗，待酒精挥发后再用生理盐水冲洗3次～5次，才能使用。连续输精时，每输完1只羊后，输精器外壁用生理盐水棉球擦净，便可继续输精。9.1.3输精人员的准备输精人员穿工作服，手指甲剪短磨光，手洗净擦干，用75%酒精消毒，再用生理盐水冲洗。9.1.4母羊保定一种方法是让母羊站在架子内，输精员在母羊左边，左膝置于母羊后躯肋下，提母羊后腿将其放在左大腿上。这样两只手便可自由地操作,但可能不太舒服。另一种也是比较常用的方法，一人面对山羊，抱住羊后腿，羊头夹于两腿中间，使臀部斜朝上45°角，提起高度以输精人员能较方便地找到子宫颈口为宜。被输精母羊在输精前要清洗尾根、肛门及外阴部，再用来苏儿或高锰酸钾溶液消毒。9.2输精量及输精次数稀释后的鲜精每次输精量0.1ml～0.5ml，上下午各输一次。6

8DB54/T0260—20229.3方法步骤在开膣器末端和外阴部涂上无菌润滑剂，缓慢插入母羊体内，使其达到阴道末端。用手电筒照明或头灯进行观察，子宫颈一般位于阴道底部，稍向外突出，看起来呈深红色阴影或唇状小孔，如有云雾状粘液妨碍观察，应用开膣器导出或吸管吸去。如果子宫颈紧闭而干燥，说明母羊尚未发情，如果粘液清澈的，应延期输精，取出开膣器。缓慢注入精液，把输精器插入子宫颈，做到深部、慢插、轻注、稍停。移出开膣器，然后取出输精器。间隔6小时～8小时再复输一次。输精后的母羊打上标记，第二情期返情后再用第一情期的公羊进行人工授精。对个别阴道狭窄的母羊，开膣器无法充分打开，很难找到子宫颈，可采用阴道内输精，但输精量增加1倍。9.4记录做好母羊配种记录，配种记录表见附录D，定期检查受胎情况。7

9DB54/T0260—2022附录A（资料性附录）表A.1山羊人工授精站所需仪器、设备、试剂耗材数品名单位品名单位数量量双筒生物显微镜台1量杯250ml个2载盖玻片套1量杯100ml个2擦镜纸本2长玻棒支2假阴道外壳套3短玻棒支2假阴道内胎条3烧杯500ml个2集精杯个6烧杯300ml个2羊用输精器支3100ml容量瓶个2羊用开膣器把2搪瓷盘20×30㎝个1300-500ml三角烧瓶个2有盖搪瓷盘个2100℃水温计支3搪瓷缸个2高压消毒锅个1漏斗个2电子天平0.01—110g台1操作台套1衡温水浴锅台1消毒脱脂棉花包1试管刷大小各1个个2消毒脱脂纱布卷1一次性采精手套包21—2ml塑料注射器支10口罩包2镊子长短各1把把2手电筒或头灯个2手术剪把1注：除上述外，还需准备蒸溜水、75%酒精、记录本、药匙、桌椅、毛巾、肥皂、洗衣粉、记号笔、签字笔、工作服、分析纯柠檬酸三钠、氯化钠、葡萄糖、乳糖、液体石蜡、白凡士林、新洁尔灭、生理盐水等。8

10DB54/T0260—2022附录B（资料性附录）表B.1精液检查表种公羊采精日期原精液采射精量时间精色泽密度活力活率精检备ml耳号月日次员注上下上下上下上下上下上下数午午午午午午午午午午午午9

11DB54/T0260—2022附录C（资料性附录）稀释液配方配方一：用注射生理盐水作稀释液，这种稀释液保持时间短，精液稀释倍数2倍～3倍，不宜过高。一般我区的人工授精采用此配方进行稀释。配方二：无水葡萄糖3g，柠檬酸钠1.4g，溶于100ml的蒸馏水中，滤过2遍～3遍，煮沸消毒30min，冷却至室温后，加入新鲜卵黄20ml，每毫升加入青霉素1000单位，链霉素1000µg。配方三：用5g乳糖、3g无水葡萄糖、1.5g柠檬酸三钠，溶解过滤后配成100ml的稀释液，消毒冷却后每毫升加青霉素1000单位、链霉素1000µg。10

12DB54/T0260—2022附录D（资料性附录）表D.1配种记录表种公羊耳号：等级：临时号：记录员：输精员：第一情期第二情期羔羊出生鉴定母配配配羔出初序羊备种种上午输下午输配种种上午输下午输羊性生毛生号耳注时方精量ml精量ml时间方精量ml精量ml耳别日色重号间式式号期kg11