禺毛茛叶绿体ssr引物筛选

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1、JIUJIANGUNIVERSITY毕业论文题目禺毛茛核基因的筛选院系生命科学学院专业生物科学姓名班级指导教师二零一二年五月九江学院11届学士学位论文：禺毛茛叶绿体SSR引物筛选摘要毛茛属(Ranunculus)共有2000种，我国有122种。禺毛茛复合体(R.cantoniensiscomplex)是其中形态相近的复合分类群。该复合体及其近缘种具有进化历史的悠久性、生长习性上的多样性、倍性上的多倍性以及遗传变异的丰富性等特点。SSR(SimpleSequenceRepeat)已经成为一种非常成熟的分子标记技术。本文利用8对R.macranthus叶

2、绿体SSR引物，通过SSR-PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，在禺毛茛中筛选出2对多态性高的SSR引物（RC2F/RC2和RRC7F/RC7R）。利用这2对引物对猫爪草和肉根毛茛叶绿体基因进行扩增，扩增产物有多态性，通过这种方法可以快速鉴定猫爪草和肉根毛茛。因此，这些多态性引物的获得，为今后禺毛茛以及毛茛属植物系统进化和种间关系的研究提供更多的资料。【关键词】禺毛茛；核基因；PCR；引物.I九江学院11届学士学位论文：禺毛茛叶绿体SSR引物筛选AbstractRanunculushave2,000speciesandabout122specieslie

3、inChina.R.cantoniensiscomplex(R.cantoniensiscomplex)isthecompositegroupoftaxawithsimilarmorphology.Thecomplexanditscloselyrelatedspeciesarefeaturedbylongevolutionaryhistory,growthhabitsofthediversity,ploidyandpolyploidyontherichnessofgeneticvariationandothers.SSRhasbecomeaverys

4、ophisticatedmolecularmarkertechnology.Inthispaper,usingeightpairsofR.macranthuschloroplastSSRprimersfound2highlypolymorphicSSRprimers(RC2F/RC2RandRC7F/RC7R)bySSR-PCRanddenaturingpolyacrylamidegelelectrophoresisinR.cantoniensis.R.ternatusThunbandR.poliiFranch.exHemslchloroplastg

5、eneswereamplifiedusingthistwopairsofprimers,PCRproductshadpolymorphism.Inthisway,R.ternatusThunbandR.poliiFranch.exHemslwereidentifiedquickly.TheacquisitionofthesepolymorphismprimerswillprovidemoreinformationforphylogeneticevolutionandthisrelationbetweenspeciesresearchofRanuncu

6、luscantoniensis.[Keywords]Ranunculuscantoniensis;SSRmolecularmarker;Polymorphism;Primers;Screeningi九江学院11届学士学位论文：禺毛茛叶绿体SSR引物筛选目　　录摘要IAbstracti引　　言11.1禺毛茛的简介11.1.1禺毛茛形态学特征11.1.2禺毛茛的药物成分和药用价值11.2SSR分子标记介绍及研究进展11.3PCR技术21.4琼脂糖凝胶电泳21.5研究背景及意义32研究材料与实验方法42.1研究材料42.2实验仪器及试剂52.2.1仪器52

7、.2.2实验试剂52.2.3主要试剂配制52.3实验方法62.3.1总DNA的提取步骤62.3.21%的琼脂糖凝胶电泳检测所提总DNA的纯度72.3.3DNA与引物稀释72.3.4PCR扩增体系的建立82.3.5PCR产物电泳检测82.3.6引物筛选103实验结果与分析113.1禺毛茛总DNA提取结果113.2SSR-PCR扩增结果113.3引物筛选结果124讨论144.1DNA的提取方法142九江学院11届学士学位论文：禺毛茛叶绿体SSR引物筛选4.2电泳点样量144.3银染方法144.4叶绿体SSR-PCR154.5引物多态性154.6利用多态性

8、引物鉴别猫爪草和肉根毛茛15结论16参考文献17谢辞192九江学院11届学士学位论文：禺毛茛叶绿体SSR引物