微卫星-又称短串联重复序列、简单重复序列,微卫星序列定位于基因的启动子

微卫星-又称短串联重复序列、简单重复序列,微卫星序列定位于基因的启动子

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1、微卫星(microsatellite,MS)-又称短串联重复序列、简单重复序列,微卫星序列定位于基因的启动子微卫星(microsatellite,MS)-又称短串联重复序列、简单重复序列,微卫星序列定位于基因的启动子、基因编码区、内含子及其与外显子交界区,与许多重要基因紧密连锁。通常由1-6个核苷酸组成,具有高度多态性,广泛存在于真核生物基因组中,约占真核基因组的5%。 10株人癌细胞基因组的微卫星不稳定性特征石中正1,2,刘 燕1,罗 敏1,陈英杰2,周轶平1(1昆明医科大学药学院暨省天然药物药理重点实验室,云

2、南省昆明市 650500;2昆明医科大学基础医学院,云南省昆明市 650500) 文章亮点:人类基因组中,微卫星的数量庞大,且具有多态性,要确定肿瘤细胞株微卫星的稳定性情况,需要与癌旁正常组织对照,而目前已无法找到肿瘤细胞株建系时的癌旁正常组织。实验利用文献报道的5个几近单态性的微卫星位点,以正常细胞株为对照,克服了这一难题,测试了10株肿瘤细胞株的微卫星不稳定性情况,很多细胞株微卫星不稳定性情况属于首次报道,具有较强的创新性。关键词:组织构建;组织工程;人癌组织细胞;微卫星不稳定性;几近单态性位点;银染主题词:

3、癌;细胞系,肿瘤;微卫星不稳定性 摘要背景:为了解实验室常用人癌细胞的微卫星不稳定性情况。目的:从基因组微卫星水平分析各组织来源人癌细胞株的遗传背景差异。方法:取10株指数生长期的人白血病、结肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌细胞及2株人正常细胞(人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞),提取细胞DNA,对BAT-25,BAT-26,CAT-25,NR-24,SEC-63五个几近单态性的微卫星位点进行PCR扩增,12%聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法对产物进行检测,同时用ABI3720XL自动测序仪测序。结果与结论:人

4、脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞的5个微卫星位点扩增片段长度具有一致性及稳定性,可作为正常对照。人结肠癌细胞、人膀胱癌细胞在BAT-25、BAT-26、CAT-25或NR-24位点扩增片段长度均较人脐静脉内皮细胞及人皮肤成纤维细胞缩短,缩短产度为7-13bp,属于微卫星高度不稳定细胞。其他细胞在5个位点扩增片段的长度与人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞一致,属于微卫星稳定细胞。实验结果揭示了受试人癌细胞基因组微卫星不稳定性水平,为未来选择合适的细胞株进行药物活性筛选等试验奠定了基础。中国组织工程研究杂志出版内容重

5、点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

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