41.8℃全身热疗对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响

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1、41.8℃全身热疗对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响：王远东　吕俊宏　周明　赵建　祈岩超【摘要】　　［目的］探讨41.8℃全身热疗对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响。［方法］分别在治疗前后各个不同的时相抽取患者外周血样本，以流式细胞术检测样本中淋巴细胞亚群的百分含量、双抗夹心ELISA法测定血清样本中白细胞介素2（IL2）和白细胞介素受体2（sIL2R）的浓度。［结果］热化疗组患者在热疗期间Th/Ts比值上升至1.7，NK细胞百分含量和血清IL2浓度上升超过3倍，免疫封闭因子sIL2R浓度由热疗前的2113.3pg/ml显著下降至1506.5pg/ml，单纯化疗组患者未见上

2、述改变。［结论］41.8℃全身热疗发挥的是短期而显著的效应，有助于解除恶性肿瘤患者的免疫抑制，增强机体抗肿瘤免疫作用。【关键词】高温,诱发；免疫　细胞　肿瘤　辅助疗法　淋巴细胞亚群　白细胞介素2　白细胞介素2受体　　Effectof41.8℃ethods］PeripheralbloodsamplesfrompatientsbeforeandaftertreatmentetryforpercentageoflymphocytesubsetsandELISAforconcentrationofIL2andsIL2R.［Results］Inpatientsiaandchemo

3、therapy,duringtreatmentia,theTh/Tsradioelevatedto1.7,thepercentageofNKcellandIL2concentrationrosetoover3timesandtheconcentrationofsIL2Rdecreasedfrom2113.3pg/mlbeforehyperthermiato1506.5pg/ml.Theabovechangesotherapyalone.［Conclusion］41.8℃I红外线体表照射全身热疗系统(深圳市一体智能技术有限公司)，热疗过程大约6h，包括4h加热期，60～9

4、0min41.8℃的平台期，30～60min的降温期。分别于热疗前或化疗前，热疗平台期末或化疗中，热疗或化疗结束时，热疗后24h或化疗后24h，热疗后48h或化疗后48h，抽取患者外周静脉血3ml，其中1ml置肝素抗凝管即送流式细胞术检测，2ml置无抗凝管即行血清提取后-70℃保存备用。1.3流式细胞术行淋巴细胞亚群分析用直接免疫荧光技术测定样本淋巴细胞各亚群细胞百分率，经流式细胞仪(FACScan，USA)分析结果。将经肝素抗凝的外周静脉血混匀后取50μl加入含有冻干的已知数量标准荧光微球的绝对计数管（TruCOUNT），加入用异硫氰酸(FITC)或藻红蛋白(PE)标

5、记的各种小鼠抗人单克隆抗体：FITCCD3/PECD16，56，FITCCD4/PECD8双标记单抗和FITCCD19单标记单抗各20μl(以上仪器和试剂均为BectonDickinson公司生产),置室温暗处反应20min后再加入红细胞溶解剂450μl，充分混匀，室温暗处反应30min后上机。经流式细胞计数仪分析CD3+(全T细胞)，CD4+CD8-(辅助T细胞，Th细胞)，CD4-CD8+(抑制T细胞，Ts细胞)，CD16+56+(自然杀伤细胞，NK细胞)和CD19+(全B细胞)细胞百分率。1.4酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定血清IL2、sIL2R含量采用ELIS

6、A双抗体夹心法测定，严格按照试剂盒（由法国DIACLONE公司生产）说明操作，结果由标准曲线查出。1.5统计方法实验数据以x±s表示，所有数据均采用SPSS软件分析，统计方法为ANOVA。2结果2.1各时间点淋巴细胞亚群的变化2.1.1T淋巴细胞亚群的变化如表1、2和图1所示，热化疗组病人在热疗期间T淋巴细胞含量包括Th细胞和Ts细胞持续下降，从起始64.7％下降至热疗结束时最低值51.2％，较热疗前有显著性差异（P<0.01），热疗后24h全面恢复接近起始水平，其后的24h又显著下降，其中Th细胞与Ts细胞的变化趋势相类似，但Th/Ts比值在热疗期间持续上升，至

7、热疗结束时达到高峰1.7，热疗后48h内逐渐下降至起始水平；化疗组病人在化疗期间Th细胞和Ts细胞含量均有下降，Th细胞在化疗后逐渐上升，至化疗后48h已高于起始水平，而Ts细胞在各时间点均稍低于起始值，Th/Ts比值只是在化疗中小升至1.53，无统计学差异（P>0.05）。2.1.3B细胞的变化两组病人的B细胞含量受热化疗或化疗的影响不大，在各时间点无显著性差异（P>0.05）。2.2各时间点血清IL2、IL2R的变化2.2.1血清IL2的变化如表3、4和图3所示,热疗作用使热化疗组病人血清中IL2浓度由起始的7.1pg/m