hplc_elsd法测定酶解磷脂中甘油磷脂酰胆碱含量的研究

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1、粮食与食品工业Ｖｏｌ．２１，２０１４，Ｎｏ．６标准与检测ＣｅｒｅａｌａｎｄＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法测定酶解磷脂中甘油磷脂酰胆碱含量的研究杜章斌１，２，滕英来１，２，汪勇１，２，＊，张宁１，２，李爱军１，２，邱姣１，２１．暨南大学食品科学与工程系（广州５１０６３２）２．暨南大学－萨斯喀切温大学“油料生物炼制与营养”联合实验室（广州５１０６３２）摘要：本研究建立了高效液相色谱－蒸发光散射法酶催化水解磷脂样品中的甘油磷脂酰胆碱（ＧＰＣ）的方法。检测条件为：使用ＡｌｌｔｅｃｈＳｉｌｉｃａ色谱柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），柱

2、温４０℃，甲醇为流动相，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ，蒸发光散射检测器漂移管温度６５℃，空气流速１．７Ｌ／ｍｉｎ。ＧＰＣ为最后出峰的强极性组分，其保留时间为４．９７ｍｉｎ，所得ＧＰＣ标准曲线为Ｙ＝２．０４８３Ｘ＋２为０．９９１４。检测限为６．３μｇ／ｍＬ（Ｓ／Ｎ＝３），定量限为１３．０μｇ／ｍＬ７．７７４４，线性相关系数Ｒ（Ｓ／Ｎ＝１０）。ＧＰＣ的平均加标回收率为１０２．５％，ＲＳＤ是２．２％（ｎ＝３），分析时间小于６ｍｉｎ。结果表明本方法分离效果好，检测结果准确、稳定，适用于酶催化水解磷脂样品中甘油磷脂酰胆碱的定量测定。关键词：ＨＰＬＣ；甘油磷脂

3、酰胆碱；磷脂酶Ａ１；大豆磷脂中图分类号：ＴＳ２２７文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－５０２６（２０１４）０６－０８２－０５ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｇｌｙｃｅｒｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｅｎｚｙｍｅｈｙｄｒｏｌｙｚｅｌｅｃｉｔｈｉｎ１，２，ＴｅｎｇＹｉｎｇｌａｉ１，２，ＷａｎｇＹｏｎｇ１，２，＊，ＺｈａｎｇＮｉｎｇ１，２，ＬｉＡｉｊｕｎ１，２，ＱｉｕＪｉａｏ１，２ＤｕＺｈａｎｇｂｉｎ１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉｎａｎＵ

4、ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２）２．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＳａｓｋａｔｃｈｅｗａｎＯｉｌｓｅｅｄＪｏｉｎｔＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡＨＰＬＣ－ＥＬＳＤａｎａｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｏｆｇｌｙｒｉｎｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ（ＧＰＣ）ｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙｈｙｄｒｏｌｙｅｄｌｅｃｉｔｈｉｎｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｎｔｈｉｓｒｅｓ

5、ｅａｒｃｈ．Ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ＡｌｌｔｅｃｈＳｉｌｉｃａｃｏｌｕｍｎ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ４０℃，ｍｅｔｈ－ｎｏｌｍｏｖｉｎｇｐｈａｓｅ，ｆｌｏｗｒａｔｅ１ｍＬ／ｍｉｎ，ｄｒｉｆｔｔｕｂｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ６５℃，ａｎｄａｉｒｆｌｏｗｒａｔｅ１．７ｍＬ／ｍｉｎ．Ｂｅｃａｕｓｅｏｆｔｈｅｓｔｒｏｎｇｐｏｌａｒｉｔｙ，ｔｈｅｐｅａｋｏｆＧＰＣｉｓｓｅｅｎａｔｌａｓｔｗｉｔｈｒｅｔｅｎｔｉｏｎｔｉｍｅ２ｏｆ４．９７ｍｉｎ．Ｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｃｕ

6、ｒｖｅｏｆＧＰＣｉｓＹ＝２．０４８３Ｘ＋７．７７４４（Ｒ＝０．９９１４），ｔｈｅｌｉｍｉｔｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｓ６．３μｇ／ｍＬ（Ｓ／Ｎ＝３），ａｎｄｔｈｅｌｉｍｉｔｏｆ收稿日期：２０１４－０９－０３ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｉｓ１３．０μｇ／ｍＬ（Ｓ／Ｎ＝１０）．Ｔｈｅａｖｅｒ－基金项目：教育部新世纪人才项目（项目编号：ＮＣＥＴ－ａｇｅｓｔａｎｄａｒｄｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｏｆＧＰＣｉｓ１０２．５％，１２－０６７５）；广东省战略性新兴产业核心技术攻关项目（项目编号：２０１２Ａ０３２３０００１６）；广东省高新区发展引导ＲＳＤ＝２．２％（ｎ

7、＝３），ａｎｄｔｈｅｔｉｍｅｏｆａｎａｌｙｓｉｓｉｓ专项（项目编号：２０１２Ｂ０１０９０００３３）。ｌｅｓｓｔｈａｎ６ｍｉｎ．ＴｈｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅＨＰＬＣ－ＥＳ－作者简介：杜章斌，男，１９８８年出生，硕士研究生，研究方向为油脂生物炼制。ＬＤｍｅｔｈｏｄｃａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｓｅｐａｒａｔｅｔｈｅＧＰＣｉｎｔｈｅ＊通讯作者：汪勇，男，１９７７年出生，研究员，主要从ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓａｒｅｐｒｅｃｉｓｅ事油脂生物炼制教学与科研工作。８２粮食与食品工业ＣｅｒｅａｌａｎｄＦｏｏ

8、ｄＩｎｄｕｓｔｒｙＶｏｌ．２１，２０１４，Ｎｏ．６ａｎｄｓｔａｂｌｅ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅｉｔ’ｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｇｌｙｃ