含粘膜佐剂的鸡新城疫疫苗诱导雏鸡非特异性免疫应答的研究

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1、中国动物传染病学报2014,22(5):35-40ChineseJournalofAnimalInfectiousDiseases·研究论文·含粘膜佐剂的鸡新城疫疫苗诱导雏鸡非特异性免疫应答的研究1,21111,2殷秀辰，哈卓，李星，张清真，刘惠莉（1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室，上海201106；2.上海佳牧生物制品有限公司，上海201106）摘要：为研究分析重组大肠杆菌不耐热肠毒素（labileenterotoxin，LT）作为粘膜佐剂，配伍鸡新城疫疫苗的冻干样品对免疫鸡

2、非特异性免疫应答的影响，在前期已经构建的LTR72/G192基础上，选择2、4μgLTRG蛋白作为每羽份疫苗添加量，及降低新城疫病毒（Newcastlediseasevirus，NDV）50%抗原量等配伍条件。按照生产条件制备冻干疫苗，进行雏鸡免疫试验，免疫后24、48、72h采集脾脏、胸腺淋巴结，检测几种非特异性细胞因子表达水平。结果表明：IL-6、INF-γ水平在各疫苗免疫后24h即升高，48h达最高值；添加2、4μgLTRG蛋白的NDV疫苗组IFN-β、TNF-α水平在48h左右显著升高，其中含4μg

3、LTRG疫苗组与其他组差异具有极显著统计学意义（P<0.01）；IL-6、IFN-γ转录水平有所增强，但各组间差异不具有显著统计学意义（P>0.05），72h左右几种细胞因子水平均迅速下降，与NDV疫苗接种组相近。由此可见，LTRG能辅助抗原诱导免疫雏鸡的非特异性免疫应答，有利于对感染病毒的清除。关键词：LTRG；新城疫病毒；佐剂；细胞因子中图分类号：S852.659.5文献标志码：A文章编号：1674-6422（2014）05-0035-06ADDITIONOFHEAT-LABILEENTEROTOXIN

4、ASADJUVANTTONEWCASTLEDISEASEVACCINEENHANCESNON-SPECIFICIMMUNERESPONSESINCHICKENS1,21111,2YINXiu-chen,HAZhuo,LIXing,ZHANGQing-zhen,LIUHui-li(1.ShanghaiKeyLaboratoryofAgriculturalGeneticBreeding,InstituteofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShanghaiAcademyof

5、AgriculturalScience,Shanghai201106,China;2.ShanghaiJiamuBio-productCo.Ltd.,Shanghai201106,China)Abstract:Inthepresentstudy,heat-labileenterotoxin(LT)wasusedasadjuvantsforNewcastlediseasevirus(NDV)vaccinetoinvestigateifnon-specificimmuneresponseswereenhanced

6、invaccinatedchickens.Theformulationprocedurewastoadd2μgor4μgLTRGtoonedoseofNDVvaccineor4μgLTRGtohalfdoseofvaccinefollowedbyfreeze-dryingcycles.TheaduvantedNDVvaccineswereorallyadministeredtochickens.At24,48hand72hpostvaccination,spleens,thymusesandlymphnod

7、eswerecollectedandlevelsofIL-6,INF-γ,IFN-βandTNF-αweredetectedinReal-timePCR.TheresultsshowedthatIL-6andINF-γofallvaccinatedchickensstartedtoriseat24handpeakedat48hpostvaccinationwhileIFN-βandTNF-αdidnotsignificantlyincreasetill48hpostvaccination.收稿日期：2014-

8、07-05基金项目：上海市科委农业成果转化项目（1239019N0800）；上海市农委攻关项目（沪农科攻字(2008)第8-6号；沪农科攻字(2010)第2-4号）作者简介：殷秀辰，男，硕士，主要从事病毒分子生物学和免疫学的研究通信作者：刘惠莉，E-mail：huilil@163.com·36·中国动物传染病学报2014年10月Inaddition,chickensvaccinatedwithNDVvaccine