酶联免疫吸附法_elisa_测定黄曲霉毒素b_1的样品基质效应研究

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1、中国油料作物学报2014，36(3):404－408ChineseJournalofOilCropSciencesdoi:10．7505/j．issn．1007－9084．2014．03．018酶联免疫吸附法(ELISA)测定黄曲霉毒素B1的样品基质效应研究1，2，31，2，31，2，3，4，5*1，2，3，41，3，4，51，2，3，4张宁，李敏，李培武，张奇，张文，李冉(1．中国农业科学院油料作物研究所，湖北武汉，430062;2．农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室，湖北武汉，430062;3．农业部生物毒素检测重点实验室，湖北武汉43006

2、2;4．农业部油料产品质量安全风险评估实验室(武汉)，湖北武汉，430062;5．农业部油料及制品质量监督检验测试中心，湖北武汉，430062)摘要:为了探寻与免疫分析相配套的简易前处理方法，以黄曲霉毒素B1(AFB1)为靶标，花生样品为对象，研究了可能影响ELISA测定结果的样品前处理方法;采用实际样品加标回收的方法，研究比较了4种不同浓度(5%、10%、20%和30%)甲醇稀释的样品基质同源ELISA灵敏度。结果表明，甲醇稀释度越小基质效应越明显;样品前处理中除油处理可显著提高回收率;样品前处理中免疫亲和柱净化后可消除相当一部分基质效应的影响，提高

3、了回收率。研究结果为进一步开发简单快速的前处理方法提供了借鉴。关键词:花生;黄曲霉毒素B1;ELISA;基质效应中图分类号:S379．7文献标识码:A文章编号:1007－9084(2014)03－0404－05EffectofsamplematrixondeterminationofaflatoxinB1byenzyme－linkedimmunosorbentassay1，2，31，2，31，2，3，4，5*1，2，3，41，3，4，51，2，3，4ZHANGNing，LIMin，LIPei－wu，ZHANGQi，ZHANGWen，LIＲan(1．Oi

4、lCropsＲesearchInstituteoftheChineseAcademyofAgriculturalSciences，Wuhan430062，China;2．KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofOilCrops，MinistryofAgriculture，Wuhan430062，China;3．KeyLaboratoryofDetectionforMycotoxins，MinistryofAgriculture，Wuhan430062，China;4．LaboratoryofＲiskAs

5、sessmentforOilseedsProducts(Wuhan)，MinistryofAgriculture，Wuhan430062，China;5．QualityInspectionandTestCenterforOilseedsProducts，MinistryofAgriculture，Wuhan430062，China)Abstract:TooptimizethepretreatmentmethodforaflatoxinB1detectioninpeanutsbyenzyme－linkedimmu-nosorbentassay(ELISA

6、)，theeffectsofmethanolandoilconcentrationintheextractwereevaluated．Thesensitiv-itiesandrecoveriesofELISAforsamplesof4differentmethanolconcentrations(5%，10%，20%and30%)wereinvestigated．Ｒesultsshowedthatthesmallerdilutiondegreeofsample，thegreatermatrixinterference．Ｒemovalofoilfromt

7、heextractsignificantlyreducedmatrixinterference．Purificationwithimmunoaffinitycolumninpretreat-mentprocessgreatlyeliminatedmatrixinterference．Theseresultswereexpectedtoprovidereferenceforfurtherde-velopmentofpretreatmentprocessonaflatoxinimmunodetection．Keywords:Peanut;Aflatoxin

8、B1;ELISA;Matrixeffect黄曲霉毒素(aflatoxin)简称AFT，是一类由