简述鸡场水源微生物的检测方法

简述鸡场水源微生物的检测方法

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1、基础研究中国畜牧兽医文摘2014年30卷第11期简述鸡场水源微生物的检测方法董娜张立永刘建王欣(黑龙江大森林食品集团有限公司检测中心,黑龙江七台河154500)在养鸡场中,如果对病死鸡的排泄物,分泌物,血液,内脏皿中倾注15~18ml已高压灭菌并冷却至45℃左右的平板计数琼脂和尸体等消毒的不严格,处理不当,会造成水源的污染。被病原培养基,并轻轻摇转平皿,使培养基与水样充分混匀。菌污染的水常可成为疫病传染源,引起疫病的流行。鸡舍内水源3.3 培养的优劣直接影响鸡群的健康。本公司对鸡场内水源的检测要求按待琼脂冷却凝固后,翻转平皿,于36℃±1℃培养箱中培养24国家生活饮用水标准检验方法(

2、GB/T5750.12-2006)执行。h,进行计数。1 仪器和材料3.4 大肠杆菌培养方法仪器及环境准备:对微生物实验室采取常规灭菌,做好培养同3.2,注入麦康凯琼脂培养基。设备及常用玻璃器皿的常规消毒、灭菌等,做好试剂准备。3.5 计数培养基:平板计数琼脂、麦康凯琼脂、乳糖胆盐发酵培养(1)通常首选菌落个数在30~300之间的平皿进行计算。若基、伊红美蓝琼脂。只有1个稀释度符合此范围,则该稀释度的菌落数乘以其相应稀释2 检测器皿消毒及水样采集方法倍数。2.1 灭菌瓶(2)如有2个稀释度均符合30~300之间,则视二者的比值来将250ml生理盐水瓶洗刷完毕晾干后,盖上胶塞,插入针定

3、:如比值<2,应报告二者的平均数;如比值大于≥2,则按稀释头,放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌15~20min。待压力表回落后,度小的菌落数。打开锅盖,拔出针头,用医用胶布封住针眼,灭菌瓶备用。(3)若所有稀释度的菌落数都>300,则按稀释度最高的菌落2.2 采集水样数乘以相应的倍数。2.2.1 采集鸡舍内工作间(或水线)水样(4)若所有稀释度的菌落数都<30,则按稀释度最低的菌落先将自来水水龙头(或水线乳头饮水器)用火焰灼烧2~3数乘以相应的倍数。min灭菌,再放开水龙头(或拔掉乳头饮水器前端)使水流出3.6 单位5~10min后,用灭菌瓶接取水样200ml左右,将瓶塞盖好,留做CFU/m

4、lCFU(Colony-FormingUnits)。待检。经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。2.2.2 采集水源3.7 生化试验鉴定取距水面10~15cm的深层水样,先将灭菌瓶瓶口向下浸入水大肠杆菌在麦康凯琼脂上以浅粉,深粉红色菌落为主。必要中,然后翻转过来,打开瓶塞,水即流入瓶中,取水样200ml左时通过生化试验鉴定。右,将瓶塞盖好,留做待检。3.8 总大肠菌群的测定(MPN法)3 检测方法(1)取事先灭好菌的10ml双料乳糖胆盐发酵管(内置小发3.1 稀释水样酵管)5管置于试管架中,10ml单料乳糖胆盐发酵管(内置小发取2个灭菌试管,分别加入9ml灭菌水,将待检水样摇匀后酵管)1

5、0管置于试管架中。取1ml水样加入第1管9ml灭菌水内,更换灭菌吸管,反复吹打(2)向10ml双料乳糖胆盐发酵管中加入待检水样10ml,共数次,摇匀,制成1∶10的稀释液。取1∶10的稀释液1ml加入第加5管。2管9ml灭菌水内,更换灭菌吸管,反复吹打数次,摇匀,制成(3)向10ml单料乳糖胆盐发酵管中加入待检水样1ml,共1∶100的稀释液,备用。若水样污染严重,可做更多倍数稀释。加5管。3.2 做样(4)向10ml单料乳糖胆盐发酵管中加入待检水样1∶10的稀取3个灭菌平皿,记号分别标注:菌落总数原液,菌落总数释液1ml,共加5管。即一共接种55.5ml待检水样。(10ml水样1∶

6、10,菌落总数1∶100。无菌操作分别取待检水样原液1ml,5管;1ml水样5管;0.1ml水样5管。)1∶10的稀释液1ml,1∶100的稀释液1ml注入相应的平皿中。同(5)将以上15管接种管置36℃±1℃培养箱中培养24h。详时,向空白灭菌平皿中注入1ml灭菌水,做空白对照。向每个平见图1。图1检测水样在乳糖发酵管中产酸产气图2大肠菌群在伊红美蓝呈现黑紫色(下转第45页)·48·中国畜牧兽医文摘2014年30卷第11期基础研究山羊猝死症病原体的分离鉴定赵诚(永靖县盐锅峡镇畜牧兽医站,甘肃临夏731600)羊猝死征是近年来危害山羊养殖业的一种重要疾病,该病一2.2 培养特性般呈地

7、方流行,多发于秋冬和初春气候骤变、阴雨连绵季节,于在厌氧条件下培养,分离菌能在普通培养基上良好生长;在湿地、低洼地放牧的羊只易患本病;羊只往往没有任何前期症状血液琼脂培养基上培养48h,形成微隆、淡灰色的菌落,菌落在而突然发病死亡,以全身实质器官及消化道出血、小肠分段性坏普通培养基上呈不规则网状或分枝状从中央向四周延伸,菌落边死为特征。猝死症主要呈零星散发,有一定区域性,膘情中上的缘不齐;在肉汤中培养可形成白色絮状沉淀。羊只发病率高。该病发生于世界多国,我

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