高尔基体蛋白73、afp在原发性肝癌诊断中的临床价值探讨

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1、高尔基体蛋白73、AFP在原发性肝癌诊断中的临床价值探讨陈勇田刘红(山东省安丘市人民医院山东安丘262100)【】目的分析高尔基体蛋白73(GP73)、AFP在原发性肝癌(PHC)、肝硬化、慢性乙肝及其他肿瘤患者血清中的浓度水平,评价GP73、AFP在原发性肝癌诊断中的价值。方法取原发性肝癌、肝硬化、慢性乙肝和其他肿瘤患者及健康人血清,分别检测GP73、AFP含量。结果①原发性肝癌组的GP73、AFP浓度水平要明显高于肝硬化组、肝炎组、其他肿瘤组和正常健康人组,各组GP73含量差异有统计学意义(F=68

2、.84,P<0.05),原发性肝癌组GP73含量与其余各组用LSD法两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②GP73诊断PHC的敏感性为76.6%,高于AFP的敏感性59.4%,差异有统计学意义(x2=4.342,P<0.05)。③GP73和AFP联合检测诊断PHC的敏感性为90.6%,高于GP73单项诊断PHC的敏感性为76.6%,差异有统计学意义(x2=4.614,P<0.05),也高于AFP的单项诊断PHC的敏感性59.4%,差异统计学意义(x2=16.667,P<0.05)o结论①GP7

3、3在原发性肝癌患者的血清浓度水平明显高于其他人群,差异有统计学意义(P<0.05),可以作为辅助诊断原发性肝癌新的血清标志物。②GP73诊断原发性肝癌的敏感性、特异性优于AFP。③GP73与AFP联合检测可提高PHC诊断敏感性,特别是对AFP阴性的PHC患者更有诊断价值。【关键词】原发性肝癌高尔基体蛋白73甲胎球蛋白原发性肝癌(PHC)是目前世界上最常见的、病死率高的10种恶性肿瘤之一,其中90%为肝细胞癌。目前,临床上常用的高危人群血清学筛查指标是甲胎蛋白(AFP),但是研究表明,AFP敏感性仅为36

4、〜74%,特异性为79〜91%,所以AFP并不是一种非常理想的肿瘤标志物。随着基因技术、肿瘤免疫学、分子生物学等的深入发展,科研人员己经发现了一些新的诊断PHC的肿瘤标志物,毡括高尔基体蛋白73(GP73>、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子βl(TGF-βl)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、异常凝血酶原(DCP)等,高尔基体蛋白73是其中最值得期待的血清标志物之一。高尔基体蛋白73是-•种高尔基体跨膜蛋白,该蛋白的编码基因位于第9号染色体,相对分子质量为73×10

5、3,全长3042bp,在HBV感染的肝病患者中,GP73水平均明显上调,Block等发现,在肝癌患者血清中GP73水平显著升高。1材料与方法1.1主要的实验材料患者血清标本均取自安丘市人民医院2010年11月至2011年2月确诊的患者,正常健康人血清取自安丘市人民医院健康查体人员。苏中原发性肝癌患者64例,诊断标准采用中国抗癌协会肝癌专业委员会在2001年关于修订“原发性肝癌的临床诊断与标准”的说明和2009年《原发性肝癌规范化诊治的专家共识》中表明的肝细胞癌和原发性肝癌的诊断标准,包括病理学诊断标准和

6、临床诊断标准,平均年龄(59.1&plUsmn;9.3)岁,慢性乙肝患者16例,平均年龄(40.3±13.2)岁;肝硬化患者21例,平均年龄(56.8±11.7)岁;其他肿瘤患者66例(包括胃癌患者19例,食管癌患者11例,直肠癌患者8例,肺癌患者12例,支气管癌患者5例,宫颈癌患者6例,乳腺癌患者5例),平均年龄(58.6±13.7)岁,正常健康人32例,平均年龄(40.2±17.5)岁。1.2血清标本的采集旱晨空腹静脉采血3ml,放入干燥试管,

7、37°C水浴箱中温育lh,3,000rpm离心lOmin,提取血清于-20°C以下保存。1.3主要仪器设备与试剂HTF-化学发光免疫分析仪、BRIO酶标仪、微量移液器5-50ul、微量移液器50-250ul。高尔基体蛋白(GP73)试剂盒、甲胎蛋白(AFP)试剂盒。1.4GP73的检测采用双抗体夹心ELISA方法定量检测血清样品中GP73含量,酶标板上预包被抗GP73单抗,可与样品中GP73反应结合,配合加入HRP标记GP73多抗,然后用TMB底物作用显色,显色强度与样品中GP73的浓度成正比。通过酶标

8、仪检测吸光度(0D值),按照GP73校准品制定浓度曲线,计算样品中GP73的含量。1.5甲胎蛋白的检测将双抗体夹心法免疫测定原理与酶标记技术和酶催化化学发光免疫分析相结合对AFP进行定量分析。在微孔板的孔内预先包被了识别抗AFP单克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记另一株与之配对的单克隆抗体。检测吋血清样本中的AFP与包被的和酶标记的两株单克隆抗体形成夹心抗原抗体反应,再加上发光底物,用微孔板发光分析仪读取发光数值并计算其含量。1.6统计学处理应

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