甘珀酸钠对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

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1、甘珀酸钠对小鼠急性肝损伤保护作用的研究：肖旭姚青王基云李晓兵陈虎张焱芦晓红高岭【摘要】目的探讨甘珀酸钠(carbenoxolonesodium，CS)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法昆明种小鼠60只随机分为6组，各组分别每天给予不同剂量(160、80、40mg·kg-1)的CS和联苯双酯滴丸(200mg·kg-1)灌胃，对照组和模型组给予生理盐水。7d后，除空白对照组外各组小鼠皮下注射0.1%CCl4制备急性肝损伤模型，16h后取血检测血清ALT、AST活性;测定肝组织匀浆中MDA含量和SOD、GSH的

2、活性及观察肝脏病理学变化。结果CS(160、80mg·kg-1)能降低CCl4所致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性(P<0.01)，降低肝脏MDA的含量(P<0.01)，增强GSH和SOD活力(P<0.01，P<0.05)，并能明显改善肝组织的病理学损伤。结论CS对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。【关键词】甘珀酸钠;急性肝损伤;四氯化碳甘草是一味重要的传统中药，其主要成份甘草次酸及其衍生物具有广泛抗炎、抗溃疡、抗肿瘤、调节机体免疫力等药理作用[1-4]。甘珀酸钠(carbenoxolones

3、odium，CS)是甘草次酸的半琥珀酸酯二钠盐，其抗溃疡的效果较好[5]，国内外对其肝保护作用的研究报道较少。本实验旨在观察甘珀酸钠对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用，初步探讨其可能机制。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1动物清洁级健康昆明种小鼠，雄性，体重(20±2)g，由宁夏医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(宁)2005-0001。　　1.1.2药品与试剂甘珀酸钠(由宁夏大学化学化工学院提供)，联苯双酯滴丸(biphenyldimethyldicarboxylate，BDD，浙江万邦药业有限公司，批

4、号0701003，临用前用生理盐水配至所需浓度)，CCl4(郑州市化学试剂三厂，分析纯，批号990923，用时以精制橄榄油配制成0.1%溶液)，多聚甲醛(天津市福晨化学试剂厂，批号20080112)，谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷光甘肽(GSH)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。　　1.1.3主要仪器分析天平(METTLERTOLEDO瑞士)721分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);高速低温离心机(日立公司CF16RX);电热恒温水浴箱(上海精宏实验设备有限公司

5、DK-S14)。　　1.2方法　　1.2.1CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型的建立[6]将小鼠随机分成6组，每组10只。分别为正常对照组、CCl4模型组、联苯双酯滴丸组(200mg·kg-1)、CS160、80、40mg·kg-1组。灌胃给药，容量0.1mL·10g-1，模型组和空白组分别灌胃给予同体积生理盐水，每天1次，连续给药7d。于末次给药2h后，皮下注射0.1%CCl4橄榄油溶液，10mL·kg-1，正常对照组皮下注射等容量的橄榄油溶液，禁食，不禁水。造模16h后，摘眼球取血，3000r·min-1离心10min，取血

6、清超低温冰箱冻存，待测。采血后，快速断头处死，取肝右叶组织0.5g，在冰生理盐水中漂洗，滤纸拭干，用生理盐水制成10%肝组织匀浆，离心，取上清待测。同时取左叶相同部位肝脏，4%多聚甲醛固定做病理切片。　　1.2.2测定指标血清ALT、AST(化学比色法);肝组织匀浆SOD(羟胺法)、MDA(TBA法)和GSH(比色法)均按试剂盒要求测定;取肝左叶同一部位组织，常规石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察肝组织的形态学变化。　　1.3统计学方法数据均以(±s)表示，用SPSS统计软件处理数据，样本均数间比较采用t检验，P<0.

7、05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1血清生化指标检测　　CS各剂量组均可使CCl4所致小鼠血清中升高的ALT、AST活性降低(P<0.05)，呈剂量依赖性。结果见表1。表1CS对CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST的影响　　2.2肝组织匀浆生化指标检测　　与正常对照组比较模型组小鼠肝组织中MDA含量明显升高(P<0.01)，SOD与GSH活性显著下降(P<0.01)，提示肝脏出现脂质过氧化。而CS160、80mg·kg-1组可显著抑制肝组织中MDA的升高(P<0.01)，并使SOD、GSH

8、活性明显升高(P<0.05)，提示CS有较强的抗氧化及清除氧自由基的作用，结果见表2。　　3讨论　　在肝细胞病变过程中，自由基、酶及脂质过氧化等均发挥重要作用[7]。CCl4是诱导化学性肝损伤的常用药物，在体内经肝脏细胞色素P450激活生成三氯甲基自由基(·CCl3)、