白藜芦醇体外抑制人胰腺癌细胞增殖的实验研究

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1、白藜芦醇体外抑制人胰腺癌细胞增殖的实验研究【摘要】目的:探讨白藜芦醇(resveratrol，Res)体外对胰腺癌MIAPaCa-2细胞增殖的影响，并探讨其初步机制。方法:采用四甲基氮唑蓝法（MTT）检测Res处理后MIAPaCa-2细胞的增殖情况。用倒置显微镜、透射电镜观察Res处理后细胞形态学改变，用流式细胞仪分析经25μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1、200μmol·L-1Res分别作用48h后MIAPaCa-2细胞凋亡率。结果:Res体外能明显抑制MIAPaCa-2细胞的生长增殖，且在一定范围内呈时间、浓度依

2、赖性。经Res处理后，倒置显微镜观察到细胞数目减少，部分细胞变圆，核浓缩，提示可能存在细胞凋亡；电镜证实存在典型的细胞凋亡形态学改变。用25μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1、200μmol·L-1Res处理48h后，流式细胞仪检测出各处理组的细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。结论:Res在体外能明显抑制MIAPaCa-2细胞的增殖，诱导细胞调亡可能是Res抑制MIAPaCa-2细胞增殖的主要机制之一。【关键词】白藜芦醇胰腺癌增殖凋亡Abstract:Objective:Toexploretheeffec

3、tofresveratrol(Res)ontheproliferationofpancreaticcarcinomaMIAPaCa-2cellsinvitroandexploretherudimentalmechanism.Methods:Methylthiazolyltetrazoliummethod(MTT)entorphologicchangesofcellsaftertreatmenticroscopeandtransmissionelectronmicroscope.Theapoptosisratesetry(FCM)afterthec

4、ellsol·L-1,50μmol·L-1,100μmol·L-1and200μmol·L-1Resfor48h,respectively.Results:ResinhibitedtheproliferationofMIAPaCa-2cellsinaconcentration-andtime-dependentmannerasmeasuredbyMTTmethod.Afterthecellsicroscopeobservedthereductionofthecellnumberandfoundsignificantmorphologicchang

5、es,characterizedbycellroundingandcellnuclearenrichmentsuggestingapoptosis.Andthepresenceoftypicalmorphologicalchangesofapoptosisedissionelectronmicroscope.Theapoptosisratesat25μmol·L-1,50μmol·L-1,100μmol·L-1and200μmol·L-1Res-treatedgroupsaftertreatmentfor48h,measuredbyFCM,ayh

6、aveapotentanti-proliferativeeffectonMIAPaCa-2cells,themechanismsofayberelatedtotheinductionofapoptosis.Keya；proliferation；apoptosis胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道肿瘤,在美国居癌症死因的第4位[1]，在我国其发病率也有上升趋势。胰腺癌由于早期临床表现隐匿，相当部分病人就诊时已属晚期，手术根治性切除率只有25%左右[2]，所以多数病人只能采用化疗、放疗等姑息性治疗手段，然而现有化疗药物,即使包括吉西他滨在内，对胰腺癌的

7、治疗效果均欠佳。白藜芦醇(resveratrol，Res)是一种多酚类化合物，在我国中药植物虎杖鲜根中有较高的含量[3]，近年研究发现Res对胃癌、乳腺癌等具有显著体外增殖抑制作用[4，5]，因此，Res有望成为治疗肿瘤的新药。目前关于Res和胰腺癌治疗方面的研究甚少，因此我们选择Res和胰腺癌MIAPaCa-2细胞为研究对象，通过体外实验观察Res对胰腺癌细胞增殖的影响，来初步探讨Res用于胰腺癌治疗的可能性。1材料和方法1.1细胞株与试剂人胰腺癌MIAPaCa-2细胞株购自湖南远泰生物公司。Res购自美国Sigma公司，纯度>99.9%

8、，用二甲基亚砜(dimethylsulphoxide，DMSO)溶解，配成400μmol·L-1贮存液，消毒后，分装，于-20℃冻存备用