丹参酮ⅱa对兔纤维环细胞能量代谢的保护作用

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1、丹参酮ⅡA对兔纤维环细胞能量代谢的保护作用：陈勇　杨述华　张其川　周建国　黄吉军　熊蠡茗【摘要】：［目的］考察丹参酮ⅡA(TSⅡA)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔纤维环细胞能量代谢障碍的保护作用。［方法］藻酸盐串珠立体培养兔纤维环细胞，将细胞分为7组，在培养过程中加入不同浓度的药物：A组为空白对照不加入药物，B组加入4μg／mlTSⅡA，C组加入10ng／mlIL-1β，D～G组在给予10ng／mlIL-1β同时分别加入0．5、1、2和4μg／mlTSⅡA。于培养3d后行Na+-K+-ATP酶活性检测、，琥珀酸脱氢酶活性检测、MTT法细胞增殖情况检测以及细胞凋亡的流式细

2、胞仪检测。［结果］G组Na+-K+-ATP酶活性(3.23±0.28U/mgprot)较C组(1.118±0.15U／mgprot)明显增高(P<0.01)，与A组接近(3.57±0.15U／mgprot)(P>0.05)。G组琥珀酸脱氢酶活性(12.48±0.97U／mgprot)较c组(3.03±0.60U／mgprot)明显增高(P<0.01)，与A组接近(14.24±1.56U／mgprot)(P>0.05)。G组MTT试验吸光度(0.77±0.06)较C组(0.31±0.07)明显增高(P＜0.01)，随着TSⅡA浓度的升高，D～G组吸光度随着T

3、sIIA上升而上升。G组细胞死亡细胞比例和凋亡细胞比例分别为21.08±1.46%和8.99±0.33%，均显著低c组(43.11±2.7，P<0.01和11.71±0.32，P<0.01)。［结论］TSIIA能够减轻IL-1β对纤维环细胞能量代谢的抑制作用，从而改善纤维环细胞的增殖、死亡及凋亡。【关键词】丹参酮ⅡA　椎间盘　白细胞介素-1β　Na+-K+1-ATP酶　琥珀酸脱氢酶　　1Materialsandmethods　　1.1Materialsandanimals:TSⅡAstandardpreparationtheNationalInstituteforth

4、econtrolofpharmaceuticalandbiologicalproducts;Fetalbovineserum,DMEM-F12culturemediumandcollagenaseIIfromGibcoCo.(USA);MTTkitfromLingfeipanyofScienceandTechnology(SO,interleukin-1β(IL-1β),alginatefromSigmaCo.(USA);theATPasetestkitandthesuccinatedehydrogenase(SDH)testkitfromJianchengBiologicalp

5、anyofScienceandTechnology(Nanjin);BCAquantitativetestforproteinkit(EMmediumedium.　　1.2.3PreparationofTSⅡAsolution:SO2mltodissolvetheTSⅡApolculturemediumofDMEM-F12maketheDMSOfinalconcentrationbelosterilefilterpreservein4℃indarkness.　　1.3Grouping:Rabbitannulusfibrosus(AF)cellsalcontrol，l),group

6、C(IL-1β10ng/ml),groupD(IL-1β10ng/ml+TSⅡA0.5μg/ml),groupE(IL-1β10ng/ml+TSⅡA1μg/ml),groupF(IL-1β10ng/ml+TSⅡA2μg/ml),groupG(IL-1β10ng/ml+TSⅡA4μg/ml),continuousdruginterventionfor3days.　　1.4Detectionindicator:Culturemediumovelandalginatebeadsllysisliquid(contain3.5mmol/lcitratesodiumand150mmol/ls

7、odiumchloride)andcentrifugated(1800rpm/minute)for10minutestocollectcells.Afterenes.MTTtestingfive-hole,accordingtotheODvalueintospeculatethatthenumberoflivecells.　　1.5Apoptosisdetection:Theproportionofapoptosisanddeathcellsetry.Cellsesusingpr