提高机采血小板血浆氧含量对血小板功能影响的探讨

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1、提高机采血小板血浆氧含量对血小板功能影响的探讨作者：詹彤，肖建宇，陶靖，缪锡凤，刘衍春，唐荣才【摘要】　　为了探讨提高机采血小板血浆中的含氧量对血小板功能的影响，将机采血小板样品分为实验和对照2组。实验组在无菌条件下提高机采血小板血浆中含氧量（溶解氧）后，两组同时放置(22±2)℃水平振荡的血小板振荡仪器中保存。分别在血小板保存0、1、2、3、4、5天检测血小板量数量、血小板聚集反应功能、血小板液乳酸含量和血小板CD62p表达量。结果显示：2组的血小板数量、血小板聚集反应功能均随保存时间延长而下降；2组间比较，血小板数量无显著性差异(P>0.05

2、)，血小板聚集反应功能实验组在保存2-3天明显好于对照组(P<005)。2组的血小板乳酸含量、血小板CD62p表达量均随保存时间延长而升高；2组间比较，实验组的血小板乳酸含量和血小板CD62p表达量在保存1-3天时低于对照组(P<0.05)；机采血小板的含氧量在0天时实验组显著高于对照组(P<0.01)。结论：提高血小板血浆中的含氧量（溶解氧）可弥补保存袋中血小板代谢的供氧不足，提高血小板的有氧代谢和血小板的保存质量。【关键词】血小板；溶解氧；乳酸；CD62p　　InfluenceofRaisingOxygenContentonFu

3、nctionofPlateletConcentrateDuringPreservation　　AbstractToexploretheinfluenceofraisingoxygen(dissovedoxygen)contentonfunctionofplateletconcentrate，theplateletconcentrateentsaundersterileoperation，theplateletsamplesofte，acanprovidemoreoxygentopensateoxygensupplydeficiencyforplatel

4、etmetabolismandimprovetheefficiencyofplateletoxygenicmetabolismandthequalityofplateletduringpreservation.　　KeyexKx-21血细胞分析仪及配套稀释液（日本产品），HeraeusprimoR低温台式离心机(德国产品)，LG-PABER-Ⅱ血小板聚集仪。FACSCalibur流式细胞仪(美国BectonDickinson公司产品)。血气分析仪（AVLLISTGmbHMedizintechnikKlEiststraBe48，8020Graz，奥地利）

5、。氧苏TM医用自动充氧器(含99.9%的医用活性氧，经Co60灭菌，吉药管械(准)字2000第2560068号)。　　机采血小板　　由江苏省血液中心成分室提供。血小板按CS-3000plus血细胞分离机操作规程采集，ACD-A:全血=1∶10抗凝，血小板采集量约为2.5×1011/袋。　　血小板处理保存　　血小板产品充分摇匀后，取30ml血小板制品，分装在2个保存袋中，1袋为对照组（Cc组），1袋为实验组（Tc组），放置无菌室，用氧苏TM医用自动充氧器在无菌条件下将充氧器钢针插入保存袋的联接管中，按指示标向轻轻拧动充氧器阀体，调整适当气量后进行充氧10

6、分钟，在提高机采血小板血浆内溶解氧含量后，用热合机热合联接管并分别放置于(22±2)℃水平振荡的血小板振荡仪保存。　　血氧溶解度测定　　于充氧前、后即刻从机采血小板血浆保存袋内各取0.5ml样品，放入血气分析仪芯片中进行血气溶解度测定，作复管，取均值。　　血小板计数　　于保存前(0天)和保存后1、2、3、4和5天，分别从振荡的血小板保存袋内各取1ml样品，摇匀后，抽取100μl，用稀释液作5倍稀释，用SysmexKx-21血细胞分析仪计数，作复管，取均值。　　血小板聚集功能的测定　　分别从保存0、1、2、3、4、5天的样本中取样，将已加入250μl的P

7、PP血浆的测试杯放入血小板聚集仪(LG—PABER—Ⅱ型)中，测定PPP血浆的OD值，将样品PRP血浆加入测试杯中，加入测试球，预温2分钟后，用加样器吸取没食子酸丙酯溶液CPG(美国ACS公司)加入测试杯中，使终浓度为300μmol/L，开始检测，最大测定时定为360秒，测定最大血小板聚集率。　　血小板液乳酸含量测定　　以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸脱氢产生丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量呈线性关系。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，操作按说明书进行。分别对保存0、1

8、、2、3、4、5天的样本测定。　　血小板CD62p表达量测定　　分别对保存0、1、2、3、4、