壮药战骨高效液相色谱指纹图谱的研究

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1、壮药战骨高效液相色谱指纹图谱的研究作者：李小燕，杨立芳，邓光辉，罗伟强，潘洪平，韦冬萍【关键词】战骨；,,黄毛豆腐柴；,,指纹图谱；,,高效液相色谱法；,,壮药　　摘要：目的采用高效液相色谱法对壮药战骨药材进行指纹图谱的研究，为战骨药材质量标准的提升提供实验依据。方法实验采用PhenomenexGeminiC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），以乙腈-0.05mol/L醋酸水溶液为流动相进行二元梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长274nm。结果以23个共有峰为评价指标，精密度和重复

2、性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%，符合有关规定要求。结论此方法操作简单，精密度、稳定性和重复性良好，有助于战骨药材的质量控制。　　关键词：战骨；黄毛豆腐柴；指纹图谱；高效液相色谱法；壮药　　Abstract：ObjectiveThefingerprintchromatogramsedicineZhangu(therootofPremnafulvacraib)byhighperformanceliquidchromatography.MethodsTheanalysisedonaPhen

3、omenexGeminiC18column（4.6mm×250mm,5μm）ol/Lethanoicacidasmobilephaseinagradientmodeataflol/min,andatacolumntemperatureof25℃.Thedetection.ResultsTonfingerprintpeaks.Therelativestandarddeviationsforrelativeretentionvaluesandrelativepeakareasethodisreliableandca

4、nbehelpfulinthequalitycontrolofZhangu.　　KeynafulvaCraib.；Fingerprint；Highperformanceliquidchromatography；TraditionalZhuangNationalitymedicine　　壮药战骨是马鞭草科植物黄毛豆腐柴PremnafulvaCraib.的干燥茎，别名土霸王、穿云箭［1］。多分布于广西百色、南宁地区等地，药源丰富，价廉易采收，属可持续利用的天然药物资源。战骨具有活血散淤、强筋健骨、驱风止痛的功效，广

5、西民间常用于治疗腰腿痛、跌打损伤、风湿性和类风湿关节炎及感冒身痛、淋巴结炎、肝区疼痛等［2～4］。战骨中含有多种化学成分，其主要有效成分为柚皮素等黄酮类化合物［5～7］。由于受产地、气候、生态环境等因素的影响，不同药材所含有效成分差异较大。针对中药材的某个有效成分对药材进行定性、定量并不能有效控制中药材的质量。指纹图谱能够从综观和整体上表征中药材的特征，目前已成为国际上公认的控制天然药物质量的有效手段［8，9］。本文以提高战骨药材质量标准，促进民族医药发展为目的，对广西不同产地战骨药材进行了指纹图谱的研究。　　

6、1材料与方法　　1.1仪器与药品仪器：美国PerKinElmer公司Series200高效液相色谱仪（包括Series200紫外检测器、Series200二元泵、600Series接口及色谱工作站）。PhenomenexGeminiC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）。药材：战骨（产地：广西，经广西南宁食品药品检验所中药室鉴定，均为马鞭草科植物黄毛豆腐柴的干燥茎。来源见表1）。试剂：乙腈、甲醇为色谱纯，乙醇、醋酸为分析纯，水为高纯水，柚皮素对照品（中国药品生物制品检定所）。　　表1战骨药材样品来源及批

7、号（略）　　1.2色谱条件以乙腈-0.05mol/L醋酸水溶液为流动相进行二元梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长274nm，进样量20μl。梯度洗脱程序结果见表2。　　表2流动相梯度洗脱程序（略）　　1.3方法　　1.3.1参照物溶液的制备取柚皮素对照品适量，用甲醇溶解，定容，作为参照物溶液（含柚皮素104μg/ml）。　　1.3.2供试品溶液的制备取各批战骨药材粉未（过2号筛）约2.5g，精密称定，置于锥形瓶中，精密加入30%乙醇溶液50ml，超声处理1.5h，放冷，再称定重量，用30%乙

8、醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。不立即分析的样品可暂存于4℃的冰箱保存。　　1.3.3测定方法分别精密量取参照物溶液和各供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录90min色谱图即得。以柚皮素的色谱峰（S）的保留时间和峰面积为1，计算其它各峰的相对保留时间和相对峰面积比值。　　2结果　　2.1方法学考察　　2.1.1精密度以1#药材制备供试品溶液，在“1.2”项下色谱条