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《欧猥迭宫绦虫膜联蛋白e1基因的生物信息学分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、欧猥迭宫绦虫膜联蛋白E1基因的生物信息学分析:邬强,李东冬,马盼盼,吕刚【摘要】目的:从欧猥迭宫绦虫成虫cDNA文库中识别出膜联蛋白E1(AnnexinE1)基因,并对其进行生物信息学分析和功能预测。方法:从欧猥迭宫绦虫cDNA文库中获取AnnexinE1基因的核酸序列,应用NCBI、ExPASy等多种生物信息学在线分析工具结合VectorNTIAdvance10、GeneiousPro等软件包,对所获基因及其编码蛋白的基本理化特征、亚细胞定位、保守功能域、抗原表位、二级结构及拓扑结构等进行预测,建立蛋白质三级空间结构模型及构建其分子进
2、化树。结果:AnnexinE1编码354个氨基酸残基,理论分子量为40168.0Da,具有4个完整的保守功能域。位于细胞内,无信号肽及跨膜结构,存在6个潜在抗原表位。二级结构主要以α螺旋为主,结构和功能有关的位点高度保守,具有多个磷酸化位点。在进化的过程中与绦虫类亲缘较近,而与脊椎类亲缘较远。结论:AnnexinE1编码蛋白及潜在的抗原表位与宿主同源性低,可能作为研发新型免疫诊断方法的理想分子靶标。【关键词】欧猥迭宫绦虫;膜联蛋白;结构;功能;生物信息学[ABSTRACT]Objective:ToidentifytheAnnexinE1
3、genefromcDNAlibraryofSpirometraerinaceieuropaeiadultandpredictitsstructureandfunctionbyapplyingthebioinformatics.Methods:NucleicacidsequencesofAnnexinE1genecDNAlibraryofSpirometraerinaceieuropaei,andapplicationtoolsaticsaticssofticalproperties,subcellularlocalization,con
4、servativefunctionaldomains,domains,antigenicepitopes,secondarystructureandtopology,etc.Besides,tertiarystructureoftheproteinologymodeling,undertookmultisequencehomologicalalignmentandphylogeicanalysis.Results:AnnexinE1encoded354aminoacidresiduesolecular40168.0Da.Themain
5、secondarystructureains.Structureandfunctionofthehighlyconservedsitesultiplephosphorylationsites.Itcontainednosignalpeptideandtransmembranehelices,sixpotentialantigenicepitopes,locatesoutsideofmembrane.Inevolution,itanddistantrelativetothevertebrate.Conclusions:Homologyis
6、loightbeadesirablemoleculartargetforimmunologicaltests.[KEY_167519.1)、秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans,AAA99775)斑马鱼(Daniorerio,AAI54294)、拟南芥(Arabidopsisthaliana,NP_196584)、非洲爪蟾(Xenopuslaevis,NP_001082442.1)、原鸡(Gallusgallus,XM_421623.2)、小鼠(Musmusculus,NM_009674.3)、人(Homosapie
7、ns,BT007975.1)。1.2方法将基因的核苷酸、编码氨基酸序列与Genbank中的数据进行比对,鉴定其,判断与其他物种基因的一致性及是否为全长;将该蛋白氨基酸序列进行多序列同源比对分析,并与其他物种的Annexin进行比对,用GeneiousPro4.8.2以NJ法构建出分子进化树;采用蛋白质专家分析工具ExPASy和VectorNTIAdvance10对蛋白质的基本理化性质进行预测;应用TargetP、Tmpred和PredictProtein等程序对蛋白质的亚细胞定位、跨膜和信号肽情况进行推测;通过Motifscan、In
8、terproScan、ScanProsite、Pfam及BepiPred等对模体、功能域、催化位点、抗原表位等进行预测;运用PredictProtein、COILS等工具对蛋白质的二级结构进行预测;在SOD