实验性2型糖尿病大鼠睾丸leydig细胞形态和睾酮合成功能的改变

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1、实验性2型糖尿病大鼠睾丸Leydig细胞形态和睾酮合成功能的改变【摘要】目的:研究糖尿病时睾丸的组织病理学变化及睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成功能的改变。方法：雄性成年SD大鼠20只，随机分为正常对照组10只、糖尿病组10只。后一组给以高脂饮食加小剂量（25mg/kg）链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病大鼠模型，12周后处死。用光镜及电镜观察大鼠睾丸的组织形态学改变；逆转录-PCR法检测睾丸组织类固醇激素合成灵敏调节蛋白（Steroidogenicacuteregulatoryproteins，StAR）、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)及1

2、7a-羟基化酶/17，20-裂解酶(P450c17)mRNA含量；酶联免疫吸附法测定血清中睾酮和黄体生成素（leutelnizinghormone，LH）含量。结果：糖尿病大鼠光镜下主要表现为Leydig细胞数量减少，体积变小；透射电镜下主要见到Leydig细胞萎缩；睾丸组织的StARmRNA和P450sccmRNA含量糖尿病组低于正常对照组(P<0.05)，P450c17含量糖尿病组较正常对照组差异无显著性(P>0.05)；与正常对照组相比血清中睾酮和LH含量降低(P<0.05)。结论：成年期2型糖尿病可以引起大鼠睾丸Leydig细胞

3、功能降低,形态结构改变。【关键词】糖尿病2型间质细胞睾酮黄体生成素RT-PCRAbstract:Objective:TostudythepathologicalchangesoftestisandthechangesofthesynthesisfunelionoftestosteroneofLeydigcellsintype2diabeticrats.Methods:TaleSprague-Dauleyratsly:normalcontrolgroupandtype2diabeticgroup.MorphologicalchangesoftheLeydi

4、gcellsinbothgroupsicroscope(LM)andtransmissionelectronmicroscopy(TEM).Concentrationofbloodluteinizinghormone(LH)andtestosterone(T)elinkedimmunosorbentassay(ELISA).Expressionofsteroidogenicacuteregulatoryprotein(StAR)mRNA，cytochromeP450sidechaincleavage(P450scc)mRNA，andcytochromeP

5、45017a-hydroxylase(P450c17)mRNAfromLeydigcellsinedalgroup，thenumberofLeydigcellsdecreasedunderLMandthevolumeofLeydigcellsshrinkedunderTEM.ThelevelofbloodLHandTdecreased，themRNAexpressionofStAR，P450sccdecreased，andtheexpressionofP450c17mRNAappeareddescendenttendencybuthadnosignifi

6、canceintype2diabeticgroup.Conclusion:Type2diabetesmellitusimpairsTsynthesisandtheconstructionofLeydigcells.Keyellitus，typez；Leydigcells；testosterone；luteinizinghormone；RT-PCR糖尿病是一种较常见的内分泌代谢障碍性疾病，其慢性并发症可影响全身重要器官，随着糖尿病发病率的逐年上升及出现的年轻化趋势，糖尿病并发的生殖损伤引起人们极大的关注。研究证明:糖尿病大鼠性功能障碍的直接原因与持续高血糖

7、引起的细胞代谢异常、氧化应激有关，其发病可能是通过自主神经功能障碍、糖尿病微血管病变、下丘脑对垂体-性腺轴调控障碍得以实现［1，2］。本实验以下丘脑-垂体-睾丸轴为中心，通过光镜和电镜观察糖尿病大鼠睾丸Leydig细胞的病理改变，测定睾丸组织中LHR、P450scc、P450c17及StARmRNA含量及血清中睾酮及LH含量，来阐述糖尿病状态下它们之间的变化关系。1材料和方法1.1动物分组及处理由温州医学院实验动物中心提供的雄性健康60日龄SD大鼠20只，体重180～220g，随机分为：①糖尿病组10只，给以高糖高脂饲料（饲料组成：10.0%猪油，20.

8、0%蔗糖，2.5%胆固醇，1.0%胆酸盐，66.5%常规饲料）1个月后，按25m