超高压灭活流感病毒的免疫原性研究

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1、中国农村医疗保险必须有商业保险公司进入，才能形成完整的医疗保障体系。面对巨大的农村医疗保险市场，保险公司却驻足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，现有农村医疗卫生环境及其卫生管理体制与商业健康保险配套需求差距较大，风险较高。针对农村医疗保险市场，保险公司应积极主动地争取改善外部环境，同时应及早地制定公司进入战略，以获取新的保险业务增长点中国农村医疗保险必须有商业保险公司进入，才能形成完整的医疗保障体系。面对巨大的农村医疗保险市场，保险公司却驻足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，现有农村医疗卫生环境及其卫生管理体制与商业健康保险配套需求差距较大，风险较高。针对农村医疗保险

2、市场，保险公司应积极主动地争取改善外部环境，同时应及早地制定公司进入战略，以获取新的保险业务增长点中国农村医疗保险必须有商业保险公司进入，才能形成完整的医疗保障体系。面对巨大的农村医疗保险市场，保险公司却驻足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，现有农村医疗卫生环境及其卫生管理体制与商业健康保险配套需求差距较大，风险较高。针对农村医疗保险市场，保险公司应积极主动地争取改善外部环境，同时应及早地制定公司进入战略，以获取新的保险业务增长点中国农村医疗保险必须有商业保险公司进入，才能形成完整的医疗保障体系。面对巨大的农村医疗保险市场，保险公司却驻足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支

3、持，现有农村医疗卫生环境及其卫生管理体制与商业健康保险配套需求差距较大，风险较高。针对农村医疗保险市场，保险公司应积极主动地争取改善外部环境，同时应及早地制定公司进入战略，以获取新的保险业务增长点文章来源毕业论文网www.biyelunwen.com.cn超高压灭活流感病毒的免疫原性研究文章来源毕业论文网www.biyelunwen.com.cn【摘要】 目的检测超高压灭活的流感病毒FM1株的免疫原性。方法采用超高压技术(300mPa，2.5h)灭活甲型流感病毒FM1株。取ICR小鼠60只，用于病毒免疫性实验及免疫保护试验各30只。分别进行抗体检测、T淋巴细胞转化试

4、验，并计算感染后小鼠的肺指数和肺指数抑制率。结果压力灭活组和病毒对照组小鼠抗体产生量、T淋巴细胞刺激指数均显著高于正常对照组(P<0.01);压力灭活组小鼠肺指数显著低于病毒对照组(P<0.01)。结论超高压技术灭活的流感病毒FM1株保留了很好的免疫原性。【关键词】 超高压;流感病毒;免疫原性疫苗接种是当今防止流感发生和流行最有效的一种手段〔1〕。在我国目前使用的流感疫苗为第一代疫苗，其中全病毒灭活疫苗虽然免疫效果好，但因为发生副反应的几率高，且存在制备过程复杂和安全性等问题不适宜儿童和老年人接种。超高压(HighHydrostaticPressure，

5、HHP)是指超过100mPa的压力，作为一种有效的灭菌消毒的物理手段已成功地应用于生物工程的多个领域〔2～4〕，采用超高压技术灭活病毒可以提供一个完整的病毒颗粒，这种病毒颗粒不仅丧失了原来的感染性且很好的保持了病毒的免疫原性，制备过程简单，不添加化学制剂，在一定程度上降低了副反应的发生。国外已用该技术开展了动物疫苗的研制工作〔4，5〕，但用于流感疫苗的研究尚未见报道。　　本课题组已经采用超高压技术灭活了流感病毒FM1株，并已确定了其灭活的适宜条件〔6〕。本研究采用超高压灭活的流感病毒免疫小鼠，检测其免疫效果，从而为进一步探讨用超高压方法制备流感疫苗的可行性提供实验依据。　　1

6、材料与方法　　1.1动物ICR小鼠共60只，雄性，4w龄，18～22g,购自吉林大学基础医学院实验动物中心。分别用于病毒免疫性实验(30只)和免疫保护试验(30只)，均在相同条件下饲养。　　1.2主要试剂及仪器细胞营养液(IMDM)、小牛血清、胰蛋白酶、二甲基亚砜(DMSO)、MTT、ConA、弗氏完全佐剂和HRP羊抗鼠IgG均为美国Sigma公司产品。EDTA和ELISA用试剂为鼎国生物制品公司产品。OLYMPUSCKX41倒置显微镜，苏泰集团BHC1300ⅡA/B3生物安全柜，日本三洋MCO17AICCO2培养箱和MDFU4086S型超低温冰箱。TECANA5

7、082酶标检测仪，上海超高压仪器厂7000.55×1.5型静压机。　　1.3细胞株及病毒株流感病毒鼠肺适应株FM1和MDCK细胞株由吉林大学基础医学院病原生物学教研室分子病毒研究室保存。经MDCK细胞扩增后，病毒装入无菌塑料袋，放入用于超高压的静压机，在300mPa，保压2.5h进行病毒的灭活，灭活的流感病毒分装后，放入-70℃保存，待用。　　1.4病毒免疫性实验30只ICR小鼠随机分为压力灭活组、病毒对照组和正常对照组，每组10只，超高压灭活病毒组每只皮下注射经超高压灭活的病毒0.2ml