流感灭活效果验证方法的研究

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1、流感灭活效果验证方法的研究付云星【摘要】灭活是指用物理或化学手段杀死病毒、细菌等，但是不损害它们体内有用抗原的方法。灭活病毒，会使病毒蛋白的高级结构受到破坏，蛋白不再有牛理活性，所以失去感染，致病和繁殖能力，但是常规的灭活不影响病毒蛋白的一级结构，意思就是病毒蛋白的序列没有变化。流感灭活是通过科技研究的方法,把致病微牛物的致病能力去除，而保留其抗原特性，就是灭活。致病微牛物没有活性，也就是没有致病性，对人体才是安全的，才能给人接种。而其保留了抗原特性，在进入人体后，人的免疫系统才能识别反应，从而产生对改病原微生物的保护性抗体，使人不再

2、患病。【关键词】H7N9禽流感流感灭活流行性感冒（Influenza）简称流感，是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒是引起流感的病原体，属正粘病毒科，系RNA病毒，直径80〜120nm,呈球形或丝状。流感病毒可分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型。其特点是容易发生变异，其中甲型流感病毒最容易发生变异，可感染人和多种动物,为人类流感的主要病原，常引起大流行和中小流行。乙型流感病毒变异较少，可感染人类，引起爆发或小流行。丙型较稳定，可感染人类，多为散发病例，目前发现猪也可被感染。［1］同样高致病性禽流感的大范围流行，不仅给养禽

3、业造成了巨大的经济损失，而且由于禽流感可直接感染人并导致死亡，故对人类健康也带来严重的威胁。我国为了有效的防控禽流感采取了多种有效的措施，对流感灭活效果进行研究。1近年我国自主研制的重组禽流［CM19—22］感灭活苗（H5N1,Re-1株）在预防控制高致病性禽流感方面发挥了重要的作用通过对重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的对比研究观察用重组禽流感灭活苗接种10日龄、14H龄和21日龄的SPF鸡，接种后HI抗体效价无显著差异。1.1将H5N1和H5N2疫苗分别接种21日龄SPF鸡，结果表明,H5N1和H5N2均能刺激SPF鸡产

4、生较高的HI抗体；1.2分别接种三黄鸡，接种后21d,H5N1能刺激三黄鸡产生较高的HI抗体；而H5N2不能刺激三黄鸡产生合格的HI抗体，与SPF鸡免疫组相比差异显著。1.3经过二次接种，HI抗体平均为8.9log2,与SPF鸡组接种后42d的各组相比差异不显著，而与一免后21d的各组HI抗体效价相比差异显著。结果表明应用禽流感灭活苗对三黄鸡免疫接种，必须进行二免方可达到理想免疫效果，而应用重组禽流感灭活苗对三黄鸡进行免疫接种，一次免疫即可获得较高的HI抗体效价。2超高压技术灭活的流感病毒FM1株保留了很好的免疫原性在我国目前使用的流

5、感疫苗为第一代疫苗，其中全病毒灭活疫苗虽然免疫效果好，但因为发生副反应的几率高，且存在制备过程复杂和安全性等问题不适宜儿童和老年人接种。超高压（HighHydrostaticPressure,HHP）是指超过lOOmPa的压力，作为一种有效的灭菌消毒的物理手段已成功地应用于生物工程的多个领域（2〜4）,采用超高压技术灭活病毒可以提供一个完整的病毒颗粒，这种病毒颗粒不仅丧失了原来的感染性且很好的保持了病毒的免疫原性，制备过程简单，不添加化学制剂，在一定程度上降低了副反应的发生。超高压处理的病毒组肺指数显著低于病毒对照组,但与正常对照比较

6、无显著差异，证实了超高压处理的流感病毒FM1株保留了与未经超高压处理病毒相似的免疫原性，诱导机体产生了针对流感病毒有效的特异性的免疫应答，清除了入侵的流感病毒，有效的避免了病毒性肺炎的发生。长期以来热力、化学等方法在疫苗制备上一直被普遍应用，但这些技术都存在一些弊端（9,10）,例如对病毒结构破坏较大，化学制剂的副作用等。由于超高压比热力和化学因素更易控制，作用温和，因此灭活病毒不会引起表面抗原的过度变性或抗原决定簇的丢失，而口完整病毒颗粒的免疫效果更接近于有感染性的病毒体，因此超高压技术灭活的病毒，如用于疫苗的生产，将会带来更有效的

7、免疫，为将来探讨用超高压技术制备全病毒灭活疫苗提供了可供参考的实验数据。3固体氧化还原电位消毒剂对H5N1型禽流感病毒灭活由次氯酸钙与苹果酸组成的固体氧化还原电位消毒剂在比较低的浓度下可快速灭活H5N1型高致病性禽流感病毒，为禽流感疫情控制提供了很好的参考。固体氧化还原电位消毒剂配方原理是利用酸性激活剂对含氯消毒剂进行活化,使其产生高氧化还电位和低ph值，在较低的有效氯条件下即可获得较强的消毒效果，从而降低化学消毒剂对人畜和环境的影响，对禽流感有很好的灭活作用，并且对人员也比较安全。对于目前最新的的禽流感消息表明，在5月初以来，中国新

8、增人感染H7N9禽流感病例数量出现下降趋势，这可能与两个因素有关：一是中国采取了关闭活禽市场等防控措施；二是气温升高，H7N9禽流感疫情或许具有与其他禽流感疫情相似的季节性特征。一些研究表明，禽流感疫情具有季节性特征，与