复方脑得生中总黄酮纯化工艺研究论文

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1、复方脑得生中总黄酮纯化工艺研究论文.freelL,流速2BV/h,树脂径高比1∶7;吸附后,先用5BV的水洗脱,再用5BV40%乙醇洗脱。所得提取物中总黄酮的含量为80.57%,总黄酮转移率达83.76%。结论优选纯化工艺得到的总黄酮含量高,.freeltheoptimumpurificationofthetotalflavonoidsinNaodesheng.MethodsAccordingtotheelutionrateandthepurityoftheproducts,thepreparati

2、onperformanceoftotalflavonoidsbyD-101macroporousresinetersizedbytheorthogonaltestandsingle-factortest.ResultsTheoptimumconditionspleL,theadsorptivespeedofflonumpurificationconditions.Thetechniqueissimpleandadaptableforproduction.Keyacroporousresin;Naod

3、esheng;totalflavonoids;purificationprocess脑得生丸(片)收载于2005年版《中华人民共和国药典》(一部),由三七、川芎、红花、葛根、山楂组成,具有活血化瘀、通经活络的功效。用于瘀血阻络所致的眩晕、中风,症见肢体不用、言语不利及头晕目眩;脑动脉硬化、缺血性脑中风及脑出血后遗症见上述证候者。现代研究表明,葛根、山楂、红花的主要活性部位分别为其所含黄酮类成分1-2。本试验以提取物中总黄酮的含量为考察指标,对复方脑得生中总黄酮的纯化工艺进行了研究,为该制剂的制备提供

4、合理可行的工艺条件。1仪器与试药UV-2401型可见-紫外分光光度计(日本岛津),BP211D电子天平(sartorius公司)。葛根素、羟基红花黄色素A、芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号分别为110752-200209、111637-200502、0080-9705);葛根、山楂、红花经鉴定,分别为豆科植物野葛Puerarialobata(g,置于25mL容量瓶中,用40%乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,即得(每1mL中含葛根素0.2mg)。2.1.2羟基红花黄色素A对照品溶液精密称取羟基

5、红花黄色素A对照品适量,加40%乙醇溶解并稀释至刻度,制成含0.133mg/mL的羟基红花黄色素A对照品溶液。2.1.3芦丁对照品溶液精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品10mg,置50mL量瓶中,加40%乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,即得(每1mL中含芦丁0.2mg)。2.2供试品溶液的制备取经树脂富集后总黄酮提取物0.2g,精密称定,置100mL量瓶中,加40%乙醇溶解并定容至刻度。精密吸取上述溶液1mL,加40%乙醇溶液,分别稀释至1/500、1/50、1/5,摇匀,即得。2.3线性关系考察

6、2.3.1葛根素精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL分别置于10mL容量瓶中,再用40%乙醇定容至刻度,摇匀。在250nm处测定吸光度。以对照品溶液浓度(mg/mL)为纵坐标,吸光度为横坐标,得回归方程:C=6.65A+0.321,r=0.9999;葛根素浓度在2~20μg/mL内与吸光度呈良好线性关系。2.3.2羟基红花黄色素A精密量取“2.1.2”项下对照品溶液0.4、0.7、1.0、1.3、1.6mL分别置10m

7、L容量瓶中,用水稀释至刻度。在波长403nm处测定其吸光度。以对照品溶液浓度(mg/mL)为纵坐标,吸光度为横坐标,得回归方程:C=0.01875A+0.0263,r=0.9998;羟基红花黄色素A浓度在5.28~21.12μg/mL内与吸光度呈良好线性关系。2.3.3芦丁精密量取“2.1.3”项下对照品溶液1、2、3、4、5、6mL分别置于25mL量瓶中,各加40%乙醇溶液至6mL,加5%亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,放置6min,加2%氢氧化钠试

8、液4mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min,立即在510nm处测定吸光度。以对照品溶液浓度(mg/mL)为纵坐标,吸光度为横坐标,得回归方程:C=0.428A+0.0003,r=0.9996;芦丁浓度在8~48μg/mL内,与吸光度呈良好线性关系。2.4总黄酮的测定取上述不同浓度的供试品溶液适量,以葛根素、羟基红花黄色素A、芦丁为对照品,分别按“2.3”项下方法测定提取液中不同结构类型黄酮的含量,计算样品中总黄酮的含量。3纯化工艺研究3.1上样液的制备称取葛根、山楂

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