栀子的化学成分及抗白血病活性研究论文

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1、栀子的化学成分及抗白血病活性研究论文任强，孙丽华，刘新民，刘春雨，权丽辉，谢忱，廖永红【摘要】目的阐明栀子GardeniajasminoidesEllis中抗急性淋巴细胞白血病的活性成分。方法用色谱方法分离栀子中化学成分，用波谱技术(IR.freelL。结论化合物3具有抗急性淋巴细胞白血病的作用。【关键词】栀子急性淋巴细胞白血病活性成分四唑盐比色法Abstract:ObjectiveTodeterminetheactiveconstituentsfromGardeniajasminoidesagainstacutel

2、ymphoblasticleukemia.MethodspoundsnchromatographictechniquesandtheirstructuresinedbyusingMTTassay．ResultsEightpoundsethoxyflavone(2)，Ursolicacid(3),Dmannitol(4)，geniposide(5),deacetylasperulosidicacidmethylester(6),genipin1βgentiobioside(7)andscandosidemeth

3、ylester(8).pound3exhibitedinhibitoryeffectsonleukemiccellproliferationinvitroLaginstHL60,REHandRajicelllines,respectively．ConclusionUrsolicacidmightbeoneoftheactiveingredientsagainstanti-acutelymphoblasticleukemiaconferredbyGardeniajasminoidesEllis.KeyinoidesE

4、llis；acutelymphoblasticleukemia；activeconstituents；MTTassay1），5羟基7，3′，4′，5′四甲氧基黄酮（2），熊果酸（3），D甘露醇（4），栀子苷（5），去乙酰车叶草甙酸甲酯（6），京尼平1β龙胆苷（7），鸡矢藤次苷甲酯（8），其中熊果酸对白血病细胞增殖表现较强的抑制作用。1仪器与材料FisherJohns熔点仪（未校正），SHIMADZUFTIR8400S红外光谱仪，BrukerAM500型核磁共振仪，ThermoScientificLT

5、QOrbitrap质谱仪，上海亚荣旋转蒸发仪RE2000，SpectraMax190酶标仪(美国MolecularDevices公司)，薄层板和硅胶（青岛海洋化工厂），SephadexLH20为Pharmacia产品，其他试剂均为分析纯（MTT,美国Sigma公司）。细胞株：HL60人早幼粒细胞白血病、REH人急性淋巴细胞白血病、Raji淋巴瘤（北京协和医学院/中国医学科学院基础医学研究所）栀子样品于2008年3月购自北京同仁堂京北康大家园药店，经林余霖研究员鉴定为栀子Gardeniajasminoides

6、Ellis。植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆，编号为R001。2方法2．1提取与分离焦栀子（1kg）经过粉碎，用体积分数95%乙醇回流提取3次，每次2h，提取液减压浓缩得浸膏100g，称取硅胶(100～200目)210g拌样，上硅胶色谱柱,用三氯甲烷甲醇（体积比100∶1～0∶100）洗脱：三氯甲烷甲醇（体积比95∶5）洗脱部分可得到化合物1（15mg）、化合物2（6mg）、化合物3（18mg）；三氯甲烷甲醇（体积比9∶1～8∶2）洗脱得化合物5（1853mg）、化合物6（9mg）、化合物7（

7、8mg）；三氯甲烷甲醇（体积比7∶3）洗脱得到化合物8（10mg）；三氯甲烷甲醇（体积比6∶4）洗脱得到化合物4（120mg）。2.2活性筛选粗提物、各组分及化合物以二甲基亚砜（DMSO）溶解，配成50mg·mL-1的储备液，-20℃保存。临用时用含10%胎牛血清（FBS）的RPMI1640培养液稀释，配制所需浓度（终浓度样品中DMSO含量0.1%）。取对数生长期的肿瘤细胞2×105个/mL，接种于96孔培养板,.freelg·mL-1）20μL，孵育4h后，1000r/min离心5min,小心吸弃培养液，加入

8、DMSO150μL，振荡10min，充分溶解MTT。酶标仪测定各孔吸光度（A值），其中测定波长为570nm，校正波长为650nm。计算生长抑制率。生长抑制率=给药组A值-调零组A值细胞空白对照组A值-调零组A值×100%3结果与讨论3．1结构鉴定化合物1:无色片状晶体（三氯甲烷），mp142～143℃。EIMSm/z：414(M+)，与文献［