栀子的化学成分及抗白血病活性研究

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1、栀子的化学成分及抗白血病活性研究作者:任强,孙丽华,刘新民,刘春雨,权丽辉,谢忱,廖永红【摘要】  目的阐明栀子GardeniajasminoidesEllis中抗急性淋巴细胞白血病的活性成分。方法用色谱方法分离栀子中化学成分,用波谱技术(IR,ESIMS,1HNMR,13CNMR)进行结构鉴定,用四唑盐(MTT)比色法测定化合物对白血病细胞(HL60人早幼粒细胞白血病、REH人急性淋巴细胞白血病、Raji淋巴瘤)增殖的影响。结果分离鉴定了8个化合物:β谷甾醇(1),5羟基7,3′,4′,5′四甲氧基黄酮(2),熊果酸(3),D甘露醇(4),栀子苷(5),去乙

2、酰车叶草甙酸甲酯(6),京尼平1β龙胆苷(7),鸡矢藤次苷甲酯(8)。化合物3对3种白血病细胞增殖均表现出了一定的抑制作用,其中对REH细胞系抑制活性最强,IC50为7.5μg/mL。结论化合物3具有抗急性淋巴细胞白血病的作用。【关键词】栀子急性淋巴细胞白血病活性成分四唑盐比色法  Abstract:ObjectiveTodeterminetheactiveconstituentsfromGardeniajasminoidesagainstacutelymphoblasticleukemia.Methodspoundsnchromatographictechniquesandt

3、hEirstructuresinedbyusingMTTassay.ResultsEIghtpoundsethoxyflavone(2),Ursolicacid(3),Dmannitol(4),geniposide(5),deacetylasperulosidicacidmethylester(6),genipin1βgentiobioside(7)andscandosidemethylester(8).pound3exhibitedinhibitoryeffectsonleukemiccellproliferationinvitroLaginstHL60,REHandRa

4、jicelllines,respectively.ConclusionUrsolicacidmightbeoneoftheactiveingredientsagainstanti-acutelymphoblasticleukemiaconferredbyGardeniajasminoidesEllis.  KeyinoidesEllis;acutelymphoblasticleukemia;activeconstituents;MTTassay  1),5羟基7,3′,4′,5′四甲氧基黄酮(2),熊果酸(3),D甘露醇(4),栀子苷(5),去乙酰车叶草甙酸甲酯(6),京尼平

5、1β龙胆苷(7),鸡矢藤次苷甲酯(8),其中熊果酸对白血病细胞增殖表现较强的抑制作用。  1仪器与材料    FisherJohns熔点仪(未校正),SHIMADZUFTIR8400S红外光谱仪,BrukerAM500型核磁共振仪,ThermoScientificLTQOrbitrap质谱仪,上海亚荣旋转蒸发仪RE2000,SpectraMax190酶标仪(美国MolecularDevices公司),薄层板和硅胶(青岛海洋化工厂),SephadexLH20为Pharmacia产品,其他试剂均为分析纯(MTT,美国Sigma公司)。    细胞株:HL60人早幼粒细胞白

6、血病、REH人急性淋巴细胞白血病、Raji淋巴瘤(北京协和医学院/中国医学科学院基础医学研究所)    栀子样品于2008年3月购自北京同仁堂京北康大家园药店,经林余霖研究员鉴定为栀子GardeniajasminoidesEllis。植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆,编号为R001。  2方法  2.1提取与分离  焦栀子(1kg)经过粉碎,用体积分数95%乙醇回流提取3次,每次2h,提取液减压浓缩得浸膏100g,称取硅胶(100~200目)210g拌样,上硅胶色谱柱,用三氯甲烷甲醇(体积比100∶1~0∶100)洗脱:三氯甲烷甲醇(体积比95∶5)洗脱部分

7、可得到化合物1(15mg)、化合物2(6mg)、化合物3(18mg);三氯甲烷甲醇(体积比9∶1~8∶2)洗脱得化合物5(1853mg)、化合物6(9mg)、化合物7(8mg);三氯甲烷甲醇(体积比7∶3)洗脱得到化合物8(10mg);三氯甲烷甲醇(体积比6∶4)洗脱得到化合物4(120mg)。  2.2活性筛选  粗提物、各组分及化合物以二甲基亚砜(DMSO)溶解,配成50mg·mL-1的储备液,-20℃保存。临用时用含10%胎牛血清(FBS)的R

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