亚硒酸钠对人结肠癌细胞的抑制机制

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1、亚硒酸钠对人结肠癌细胞的抑制机制作者：韩晓红，邵世和，许化溪，薛延军，刘嫣芳，邓一脉，陈卫伟，曹娟【摘要】　　目的：研究亚硒酸钠对人结肠癌细胞的抑制机制。方法：通过DNA末端原位标记染色法（TUNEL）检测亚硒酸钠溶液对人结肠癌细胞株SW111C凋亡的影响；应用免疫组织化学染色技术观察亚硒酸钠对人结肠癌细胞株SW111Cp16，p21，PCNA，CD44基因表达的影响；并测定亚硒酸钠对小鼠T淋巴细胞亚群的影响。结果：TUNEL染色法表明亚硒酸钠作用细胞后凋亡指数明显升高(P<0.01),且具有剂量-效应关系；亚硒酸钠作

2、用后人结肠癌细胞SW111Cp16和p21基因的蛋白表达上调，PCNA和CD44基因的蛋白表达下调；亚硒酸钠能使小鼠CD3+，CD4+细胞数增加，而且CD4+/CD8+比值升高，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：亚硒酸钠可通过诱导细胞凋亡，影响p16，p21，PCNA，CD44基因表达和提高机体的免疫功能而抑制SW111C的生长。【关键词】亚硒酸钠；SW111C细胞；凋亡；p16；p21；PCNA；CD44；T淋巴细胞亚群　　［Abstract］Objective:Toinvestigatethei

3、nhibitionmechanismofsodiumseleniteonSW111Ccells.Methods：The10apoptosisofSW111CcellstreatedwithsodiumselenitewasobservedbyTUNEL.Theexpressionofp16,p21,PCNA,CD44treatedwithsodiumselenitewasperformedbyimmunohistochemistrytechnique.TheTlymphocytesubsetsweredetectedbya

4、nimalexperiment.Results：TheapoptoticindexofSW111Ccellsincreasedandwaspositivelycorrelatedtotheconcentrationofsodiumselenite(P<0.01).Theexpressionofp16andp21wasupregulatedandtheexpressionofPCNAandCD44wasdownregulatedaftertreatedbysodiumselenite.Afterexposuretosod

5、iumselenite,thenumberofCD3+andCD4+cellsinmiceincreasedandCD4+/CD8+increasedtoo（P<0.05）.Conclusion：ThesodiumselenitecouldinhibittheproliferationofSW111Ccellsbyinducingcellapoptosis,andinfluencetheexpressionofp16,p21,PCNA,CD44withimprovingimmunefunction.　　［Keywords

6、］sodiumselenite;SW111Ccells;apoptosis;p16;p21;PCNA;CD44;Tlymphocytesubsets大量流行病学调查、动物实验及临床实验研究结果表明微量元素硒与结肠癌的发生率和死亡率呈负相关，外源性补硒能有效抑制多种人类肿瘤的发生与发展［1］。本实验以人结肠癌细胞株SW10111C为研究对象，应用DNA末端原位标记染色法（TUNEL）检测亚硒酸钠溶液对人结肠癌细胞株SW111C凋亡的影响，应用免疫组织化学染色技术观察亚硒酸钠对人结肠癌细胞株SW111Cp16,p21,PC

7、NA,CD44基因表达的影响，并测定亚硒酸钠对小鼠T淋巴细胞亚群的影响，旨在探讨亚硒酸钠在结肠肿瘤预防和治疗过程中潜在的应用价值，为深入研究硒与肿瘤的关系提供资料。　　1材料与方法　　1.1材料及动物SW111C细胞株购自吉林省肿瘤研究所；小鼠（BALB/c，雄性，18～20g）购自吉林省生物制品所；亚硒酸钠（Na2SeO3·5H2O）为沈阳市试剂五厂生产；1640培养液购自Life,Technogies公司；胎牛血清、胰蛋白酶购自北京鼎国生物技术发展中心；细胞凋亡原位检测试剂盒购自深圳晶美公司；鼠抗人p16,p21,PCNA

8、,CD44单克隆抗体，免疫组化SAP即用型试剂盒，磷酸酶底物BCIP/NBT显色浓缩液，多聚赖氨酸，ClerMount封片剂均购自北京中山生物技术有限公司；小鼠T细胞亚群检测试剂盒购自北京邦定医学生物公司。　　1.2实验方法　　1.2.1DNA末端原位标记染色法