大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究

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1、大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究【关键词】淋巴细胞；细胞增殖；大黄素；免疫耐受　　Inhibitoryeffectsofemodinonproliferationofhumanlymphocytesinvitro　　【Abstract】AIM:Toevaluatetheinhibitoryeffectsofemodinonproliferationofhumanlymphocytesinvitroandtoexploreitspossiblemechanism.METHODS:Humanperipheralbloodl

2、ymphocytesisolatedfromhealthydonorswereculturedwithphytohemagglutinin(PHA),interleukin2(IL2)ormixedleukocyteculture(MLC),respectively.Interferedbydifferentagents,emodinandCsA,theproliferationofhumanlymphocyteswasobservedbyMTT.RESULTS:Intherangeofconcentrationsfrom

3、3×10-6mol/Lto3×10-5mol/L,emodincouldsuppresstheproliferationoflymphocytesinducedbyPHA,IL2orMLCobviously,andshowedapositiveconcentrationdependentinhibitoryeffect.AndalsoemodinhadasynergisticeffectwithCsAinimmunosuppressivebehavior.CONCLUSION:Emodinexertsitsimmunosu

4、ppressiveeffectsthroughinhibitingtheproliferationoflymphocytesinvitro.6　　【Keywords】lymphocytes;cellproliferation;emodin;immunetolerance　　【摘要】目的：研究大黄素的体外免疫抑制作用，探讨其可能的作用机制.方法：通过PHA，IL2及MLC活化淋巴细胞，给予大黄素和CsA干预，采用MTT法观察比较大黄素和CsA对淋巴细胞活化的抑制作用.结果：在3×10-6～3×10-5mol/L的浓度范围内，

5、大黄素对PHA，IL2及MLC引起的淋巴细胞活化表现出明显的抑制作用，其作用随浓度增加而增强，并与CsA具有协同性.结论：大黄素在体外通过抑制淋巴细胞增殖来发挥其免疫抑制作用.　　【关键词】淋巴细胞；细胞增殖；大黄素；免疫耐受　　0引言　　大黄素（emodin）属蒽醌类，是蓼科植物提取的主要成分.具有抗肿瘤、抗炎抑菌及保护肝肾等作用［1-3］.我们观察emodin对离体淋巴细胞活化的影响，并与环孢素A（CsA）比较，研究两者的协同性，以探讨emodin在移植免疫抑制中的作用.　　1材料和方法6　　1.1材料emodin（标

6、准品）由陕西省药品检验所提供；CsA由Novartis公司提供；淋巴细胞分离液、四甲基偶氮唑盐（MTT），重组人IL2均购自晶美公司；新生牛血清由杭州四季青生物工程研究所提供；RPMI1640，植物血凝素（PHA）分别购自Gibco公司和上海市医学化验所.　　1.2方法实验分为正常对照组、CsA组（1mg/L），emodin大（3×10-5mol/L），中（1×10-5mol/L），小剂量组（3×10-6mol/L），CsA与emodin联用组（1mg/LCsA＋1×10-5mol/Lemodin）.外周血淋巴细胞（PBM

7、C）取自健康成年人静脉血，细胞密度为1×109/L，按200μL/孔培养于96孔培养板中，每组设6个复孔，同时设2个复孔对照（不加细胞，其他同实验孔），置入37℃CO2的孵育箱中培养.①PHA与IL2刺激组：分别将PHA溶液按1∶50的比例、IL2贮存液按1∶40的比例加入淋巴细胞悬液中，分组给药后培养.②MLC组：采用双向混合淋巴细胞培养，取两位健康成年人无菌外周静脉血，分别制备外周血淋巴细胞（方法同前）.将供者、受者淋巴细胞每孔分别加入各100μL，分组给药后培养.培养24,48,72h后用四甲基偶氮唑盐（MTT）法于

8、酶联免疫分析仪上检测各孔的吸光度（A）值.淋巴细胞增殖抑制率（%）=［1－（实验孔A值－本组对照孔A值）/（空白组A值－空白组对照孔A值）］×100%.　　统计学处理：数据均用x±6s表示，各组淋巴细胞增殖抑制率比较用重复测量设计的方差分析（SPSS10.0软件包）.P<0.05为差异有统计学意义