大黄素抑制hl60-adr耐药细胞增殖和诱导凋亡的作用

《大黄素抑制hl60-adr耐药细胞增殖和诱导凋亡的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、大黄素抑制HL60/ADR耐药细胞增殖和诱导凋亡的作用作者：陈英玉，郑合勇，胡建达，郑志宏，郑静，连晓岚，吕联煌【摘要】本研究探讨中药大黄素（emodin）对人白血病耐药细胞株HL60/ADR的增殖、凋亡影响及其相应的可能作用机制。采用MTT法绘制细胞生长曲线；集落培养法观察大黄素对HL60/ADR克隆形成的影响；细胞周期分析、线粒体跨膜电位检测、Caspase3酶活性检测、AnnexinVFITC/PI法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)分析凋亡细胞；RTPCR及yc、Caspase3前体蛋白表达水平的变化。结果表明，大黄素对HL60/ADR细胞增殖具有明

2、显的抑制作用，呈时间和浓度依赖性。较低浓度大黄素即可抑制HL60/ADR细胞集落形成，IC50值为5.79μmol/L。细胞周期分析显示，与对照组比较，40、80μmol/L浓度组细胞被阻滞于G0/G1期比率明显增高（p<0.01），G2/M期细胞比率降低（p<0.01），而20μmol/L浓度组细胞周期改变差异不具有显著性（p>0.05），各浓度组均检测到典型的亚二倍体峰（凋亡峰）。大黄素作用12小时HL60/ADR细胞线粒体跨膜电位降低，AnnexinVFITC/PI法检测到早期凋亡细胞，作用24小时caspase3酶活性显著升高，作用48小时TUNEL法检

3、测到晚期凋亡细胞，细胞凋亡率呈药物浓度依赖性。大黄素作用HL60/ADR细胞不同时间段，bcl2、cmycmRNA和Bcl2、cMyc、Caspase3前体蛋白表达水平均有不同程度下调，并呈时间依赖性。结论：大黄素能够有效抑制HL60/ADR细胞增殖，并诱导其凋亡，bcl2、cmyc表达水平下调，线粒体跨膜电位水平降低和caspase3激活可能参与了该过程。【关键词】细胞增殖InhibitoryEffectsofEmodinonDrugresistantHL60/ADRCellProliferationandItsInductionofApoptosisAbst

4、ractThestudyedtoinvestigatetheeffectsofemodinontheproliferationandapoptosisofadriamycinresistantHL60/ADRcells,andtoexploretheunderlyingmechanism.Thecellviabilityandcolonyformationationassayrespectively.Apoptoticcellseansofcellcycleanalysis,mitochondrialtransmembranepotentiallevels,caspase3act

5、ivitydetection,AnnexinVFITC/PIstainingandTUNELlabeling.RTPCRycmRNAexpressions.TheprotEinexpressionsofBcl2，cMycandcaspase3precursorinedbyyc,caspase3precursorprotEInedependentmanneraftertreatmentodinatdifferenttimes.Itisconcludedthatemodinefficientlyinhibitsgroayberelateditochondrialtransmem

6、branepotentialandexpressionsofbcl2andcmyc,asodin;HL60/ADRcell;proliferation;apoptosisJExpHematol2007;15(5):955-960大黄素（emodin），化学名称为6－甲基－1,3,8－三羟基蒽醌，是从大黄属、鼠李属、蓼属和番泻叶等中药中提取的一种蒽醌类单体化合物。研究表明，大黄素能够抑制包括神经外胚层肿瘤、肺癌、肝癌、髓系白血病等多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡［1-5］，具有明显的抗肿瘤活性，但对人白血病耐药细胞株HL60/ADR作用的研究未见国内外线粒体跨膜电位的变化药物作用12

7、小时后，对照组线粒体跨膜电位下降的细胞数很少，占0.51%；20μmol/L、40μmol/L组分别为5.47%、15.90%；80μmol/L组线粒体跨膜电位下降的细胞数明显增多，占52.44%（图2）。早期凋亡细胞的比率大黄素作用HL60/ADR12小时即可以检测到早期凋亡细胞,20、40μmol/L药物组凋亡率为8.05%、23.70%,80μmol/L作用组的凋亡率最高，达到35.01%,而对照组仅2.12%（图3）。Caspase