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1、MMP9、COX2在膀胱尿路上皮癌表达的研究作者：阿布力米提·木合塔尔,杜春辉,地力夏提·吾买尔 廖红丽 ,田刚【摘要】目的研究膀胱尿路上皮癌(BUC)中MMP9、COX2的表达水平，阐明其与膀胱癌的生物学行为的关系。方法采用免疫组化法对43例膀胱尿路上皮癌标本和10例对照组标本中MMP9、COX2的表达量检测并进行比较。结果MMP9与COX2在正常黏膜与不同病理分级和临床分期中的阳性率均有显著性差异(P<0.05或0.01)。MMP9和COX2的阳性率随病理分级和临床分期的上升而显著升高。MMP9和C
2、OX2表达有相关关系(P<0.01)。结论MMP9和COX2的表达与BUC的生物学行为关系密切，为尽早了解膀胱癌侵袭、转移提供帮助。【关键词】膀胱尿路上皮癌;基质金属蛋白酶9;环氧化酶2;表达膀胱癌(BC)是人类泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,发病率在国内居泌尿系统恶性肿瘤的第一位，且发病率逐年增加，在欧美国家仅次于前列腺癌而居第二位。BC男女之比5∶71,60岁以后发病率高，平均诊断年龄为71岁。BC中膀胱尿路上皮癌(BUC)占90%以上，超过70%的BUC在治疗后复发,复发肿瘤中约30%出现恶性程度增加。浅表
3、性BUC复发率为50%～70%,而且10%～15%复发BUC浸润至肌层[1]。因此早期诊断是成功治疗BUC的重要条件。笔者检测膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜中基质金属蛋白酶9(MMP9)和环氧化酶2(COX2)的表达，研究其与膀胱癌的生物学行为的关系。 资料与方法 1.病例资料来自本院病理科2004年1月至2006年12月确诊为BUC的外检档案43例，同时收集10例正常膀胱组织作为对照。参照WHO关于泌尿与生殖系统肿瘤分类标准[2]，病理形态包括非侵袭性尿路上皮肿瘤和浸润性尿路上皮癌两大类。结合病理形态与生物学行为分为3
4、级，临床分期按UICCTNM分期标准分浅表性肿瘤(TisT1)和浸润性肿瘤(T24)。病例分布具体如下：①I级：包括低度恶性潜能非侵袭性乳头状尿路上皮肿瘤(PUNLMP,Tis)1例;非侵袭性乳头状尿路上皮癌低级别(NIPUCLG,TisT1)3例;非侵袭性乳头状尿路上皮癌高级别(NIPUCHG,T1)5例;尿路上皮原位癌(UCIS,T1)1例。②Ⅱ级：浸润性尿路上皮癌低级别(IPUCHD,T2)22例。③Ⅲ级：浸润性尿路上皮癌高级别(IPUCLD,T34)11例。 2.实验试剂鼠抗人MMP9抗体，COX7
5、2单克隆抗体，二抗采用生物素标记IgG，购自DAKO公司，由博士德生物技术有限公司提供。链亲和素-过氧化物酶(SP)试剂盒购自迈新公司。 3.免疫组织化学染色法组织石蜡包埋,4 μm厚切片,常规处理后,微波炉抗原修复,依次加入稀释的一抗(工作浓度均为1∶100)、生物素标记二抗、SABC,DAB显色、苏木素复染,用已知阳性片作阳性对照,PBS代替一抗作空白对照。 4.结果判读标准MMP9：染色阳性为胞浆内出现棕色和棕黄色。显微镜下组织被染成棕黄色的为阳性(+)，其阳性细胞数<40%;成棕色为阳性(++)，其阳性细胞数4
6、0%～80%;成深棕色(+++)其阳性细胞数>80%;组织没有着色为阴性[3]。COX2：阳性表达定位于细胞浆，呈浅黄色至深棕色。阳性判定标准：依据阳性细胞数和阳性反应强度两项指标：阳性着色细胞数>10%定为阳性表达;阳性反应强度以浅黄色为弱阳性定为(+)、黄色或棕黄色为中等阳性定为(++)、棕色或者深棕色为强阳性定为(+++)，无棕黄色或与背景着色一致为阴性[4]。 5.统计学处理检测结果采用SPSS软件处理，组间比较行χ2检验，两因素间行相关性分析。 结果7 1.MMP9和COX2表达与膀胱癌病理分级、
7、临床分期的关系两者的表达与BUC的关系密切。MMP9与COX2在正常黏膜与不同病理分级和临床分期中的阳性率均有显著性差异(P<0.05或0.01)。MMP9和COX2的阳性率随病理分级和临床分期的上升而显著升高，见表1。表1MMP9和COX2在BUC病理分级、临床分期中阳性表达例(%)注：※P<0.05，▲P<0.01 2.膀胱癌MMP9和COX2表达间的关系在43例膀胱尿路上皮癌中MMP9和COX2二者共同阳性25例，二者共同阴性8例。二者表达经相关性检验表明有相关关系(rs=0.5621
8、，P<0.01),见表2。表2MMP9和COX2在BUC中的表达关系 讨论 膀胱尿路上皮癌(BUC)的生物学行为有多中心、易复发、浸润性生长的特点。其侵袭转移过程涉及细胞的黏附、细胞运动、降解基底膜和细胞外基质，以及血管形成的情况。完
