地塞米松实验设计 v - 002

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1、免疫抑制剂（地塞米松）对家兔异型输血的影响（临床专业，07级2班，吴菲43号，李志鹏44号，李媛媛45号，吴剑宏46号）（一）立题依据及实验内容输血是临床上最重要的医疗手段之一，随着其技术的广泛应用，安全输血成为输血工作中的一个重要研究课题。临床上输血不良反应主要有溶血反应、发热反应、过敏反应等，输血后患者可出现不明原因的发热、呼吸困难、心率加快乃至血压下降，甚至发生休克和DIC。糖皮质激素（地塞米松）肾上腺皮质类激素，作用广泛，可影响免疫反应多个环节，包括抑制巨噬细胞的吞噬提呈作用；使淋巴细胞，尤

2、其是辅助性T细胞溶解减少等。有降低自身免疫性抗体水平，缓解过敏反应及对抗异体细胞的排斥反应和抗休克等作用。据此推测糖皮质激素可对抗或缓解输血反应，此实验拟以糖皮质激素对兔异型输血反应的影响加以证明。(二）实验材料1、实验动物无菌健康家兔若干只，雌雄不限，体重2-2.5Kg.2、实验器材与药品BL-450生物机能实验系统（含压力换能器），兔手术台，气管插管，哺乳动物手术器械，动脉夹，玻璃分针，静脉插管和输液装置，注射器（含针头），肝素生理盐水，生理盐水，盐酸利多卡因溶液，地塞米松试剂。（三）试验方法和

3、操作步骤1、随机选家兔一只，标记为甲兔，筛选十只与甲兔发生体外凝血的兔子。1）以利多卡因溶液在甲兔股部浸润麻醉，与股静脉取血5ml，收集在加入肝素的烧杯。2）在其他兔子动脉末梢取少量血，进行体外交叉配血实验，筛选出与甲兔血体外凝血者。2、取甲兔，分离颈总动脉，取血30ml，收集在加入肝素的烧杯中。3、⑴将10只家兔标记1-10，随机选出5只作为实验组，其余为对照组⑵将其耳缘静脉注射20%乌拉坦5ml/kg麻醉，固定于兔手术台上，减去颈部被毛。⑶颈部手术在甲状软骨下颈部正中切开皮肤6cm，分开皮下组织

4、，依次分离：①右颈外静脉：用止血钳钝性分离右颈外静脉，动脉夹夹闭近心端，结扎远心端，在颈外静脉侧壁剪一小切口，插入静脉插管，当插管到达动脉夹处，用手捏住血管，放开动脉夹，将插管继续插入约6cm左右结扎固定；②气管：用止血钳在舌骨下肌群正中插入，将左右胸骨舌骨肌向两侧拉开，即可看到气管，分离一段气管并穿一根粗线，在气管表面做一倒T形切口，插入气管插管并结扎固定。气管插管的一侧接张力换能器，并BL-450生物机能实验系统相连，记录呼吸；③左侧颈总动脉：将胸骨舌骨肌和胸锁乳突肌向外拉开，在气管左侧深处，可

5、见到与其平行的左颈总动脉，用止血钳钝性分离左侧颈总动脉，结扎左侧颈总动脉的远心端，用动脉夹夹闭近心端，用眼科剪在靠远心端结扎出的动脉壁上剪一斜口，向近心端插入动脉插管动脉导管（管内充满0.3%肝素生理盐水），用线结扎固定，接压力换能器。与BL-450生物机能实验系统相连，记录血压。4、打开计算机，启动BL-450生物机能实验系统，分别记下正常的呼吸频率、心率、血压（收缩压与中心静脉压）。实验组输入0.5mg地塞米松生理盐水，对照组输入等量的生理盐水；5、将10只家兔同时输入3ml的甲兔血，受血过程中

6、严密观察各家兔反应，观察上述各指标的变化，并作详细记录。输血不良反应观察结果（X±S）观察指标观察组对照组输血前输血后tp输血前输血后tp呼吸频率心率(次/min)收缩压中心静脉压（四）预期实验结果两组家兔的各项指标在输血前后结果的差别都具有统计学意义。在异型输血后家兔各指标变化中，加入地塞米松的实验组均比未加入地塞米松的对照组变化幅度小，故可推测地塞米松可以减轻或消除异型输血反应；糖皮质激素（地塞米松）抑制了异型输血反应。（四）统计方法采用t检验进行统计学处理。（五）可能遇到的困难、问题及解决措施

7、:1、手术操作技术不熟练，须平时加强训练。2、兔子因个体差异而引起输血反应的差别，应结合同组的其他实验结果进行取舍。（七）参考文献1、GrzelakI,Ialeskam,Olesewkiwl,Transfusion,1998,38:11042、AvallH,Hyllnerm,Grunwald,et,transfusion,1998,39:243、[期刊]邓梅英；宁芬；陈宇；唐玉杰；输血不良反应178例分析；就医学；2009年10月期：41-424、[书籍]刘达庄，免疫血液学；上海科学技术出版社，20

8、02：111-1215、[期刊]汪传喜，田兆崇，AIHA病人的输血前检查和成分输血，中国输血杂志，2000年01期：1