肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的状况及对β内酰胺类药物药敏检测分析.doc

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1、肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的状况及对β内酰胺类药物药敏检测分析【摘要】目的：了解肠杆菌科细菌产头孢菌素酶(AmpC)酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的状况及对β内酰胺酶类药物药敏情况。方法：应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶，用纸片法检测ESBLs。对β内酰胺酶类药物药敏试验采用KB琼脂扩散法。结果：AmpC酶阳性为13.3%（149/1157），其中以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯阳性率较高，而ESBLs阳性为43.0%（498/1157）,其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌阳性率较高，ES

2、BLs和AmpC同时阳性为4.7%（54/1157）。除对亚胺培南未形成耐药外，AmpC阳性菌株对β内酰胺酶类药物耐药率超过50%，ESBLs则超过70%，这些均显著高于非产酶株。结论：须要计划地使用各种抗生素类药物，防止更多的AmpC和ESBLs阳性菌株的形成。【关键词】肠杆菌科细菌肠杆菌科细菌是医院临床标本分离的主要致病菌或条件致病菌［1］，由于现时各种抗生素的广泛使用，使其耐药率不断上升，据有关报道，中国革兰阴性杆菌对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松等应用广泛的抗生素敏感率仅分别为74.8%、54.8%、51.8%［2］

3、，并且有下降的趋势，然而造成肠杆菌科细菌耐药的原因主要是由于菌体产生的头孢菌素酶（AmpC酶）和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）。为此，对了解肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的状况及药敏检测分析对临床控制感染用药有重要的意义，我们对临床分离的1157株肠杆菌科细菌进行了AmpC酶和ESBLs的状况及药敏检测分析，结果如下。　　1材料与方法　　1.1菌株来源　　2005年1月至2006年12月我院住院及门诊患者标本中分离出的肠杆菌科细菌1157株（排除同一患者同一部位重复分离的菌株）。　　1.2抗生素　　头孢西丁、头孢噻肟

4、、头孢噻肟+克拉维酸、头孢曲松、头孢他啶、头孢他啶+克拉维酸、头孢哌酮、头孢哌酮+舒巴坦、氨曲南、氨苄西林+舒巴坦、亚胺培南，以上药物均为英国OXOID公司产品，并于使用期内使用。　　1.3对β内酰胺酶类药物敏感试验　　采用KB琼脂扩散法进行。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯ATCC3700603分别作为ESBLs的阴性和阳性，而阴沟肠杆菌029和阴沟肠杆菌029M作为AmpC的阴性、阳性质控菌株。所有结果的判定均依据NCCLS2005年的规定。　　1.4检测方法　　1.4.1ESBLs的检测　　按照N

5、CCLS1999推荐的纸片法测定ESBLs［3］，采用头孢他啶与头孢他啶+克拉维酸组合，头孢噻肟及头孢噻肟+克拉维酸组合，任意一组药物抑菌环大小后者—前者≥5mm时，则判定为ESBLs。　　1.4.2AmpC检测　　应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶［4］。　　2结果　　2.11157肠杆菌科细菌的β内酰胺酶的检测结果　　ESBLs阳性为43.0%（498/1157）,其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌阳性率较高，分别为57.7%（250/433）、46.0%（185/402）、20.3%（30/148）。AmpC酶

6、阳性为13.3%（149/1157），其中以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯阳性率较高，分别为48.0%（71/148）、9.2%（40/433）、8.0%（32/402）。ESBLs和AmpC同时阳性为4.7%（54/1157），其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌分别为26株、22株、6株，结果见表1。　　2.21157株肠杆菌科细菌不同产酶菌株的耐药率。表11157株肠杆菌科细菌的ESBL和AmpC测定结果（略）表21157株肠杆菌科细菌不同产酶菌株的耐药率（略）　　3讨论AmpC酶在分子分类中属C，具有很明显的生

7、物化学特性和种属特性，它的产生主要是由染色体编码形成的，在自然情况下，AmpC酶处于低水平状态下，而当处于β内酰胺类抗生素的高抗生素压力下，尤其是亚胺培南和棒酸，AmpC的水平将远远高于自然状态，引起对多种β内酰胺类抗生素耐药，而且，AmpC酶不被克拉维酸等β内酰胺酶抑制剂所抑制，对临床对抗感染选择用药做成一定威胁。在本次试验中，AmpC酶阳性株中仅对亚胺培南没有产生任何耐药，而其他β内酰胺类抗生素和β内酰胺类抗生素/β内酰胺酶抑制剂的耐药率均超过50%，部分甚至高达97%。ESBLs是有质粒介导的几个氨基酸突变

8、而来，它能水解多种β内酰胺类抗生素，但该酶能被β内酰胺酶抑制剂所抑制。在本次试验中，共检出498株ESBLs阳性菌株，检出率为43.0%，从结果中得出，除对亚胺培南、头孢西丁、头孢哌酮+舒巴坦、氨苄西林+舒巴坦外，对其他β内酰胺类抗生素均有较高的耐药率，有些甚至高达98%。3而ESB