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1、青岛农业大学课程论文牡丹组织培养研究进展姓名：专业：机制3班2013年05月20日牡丹组织培养研究进展李升涛20122757机电工程学院机械设计制造及其自动化1203班摘要：我国的牡丹组织培养研究现状及进展主要介绍以种子、茎尖、芽、幼叶、叶柄、根等作为外植体进行培养的研究成果。虽然牡丹组织培养的技术已经逐渐趋于完善,但对于大规模生产还存在困难：组织培养品种少、培养物褐化、玻璃化、生根难以及培养基的筛选、挑选合适外植体等问题需要进一步研究。关键词：牡丹组织培养外植体培养基 牡丹，别名富贵花、百两金、木芍药、鼠姑。为芍药科芍药属植物，牡丹传统的繁
2、殖方法有有性繁殖中的种子繁殖,无性繁殖中的分株、压条、嫁接繁殖等。这些繁殖方法受着各种因素的影响。由于多种牡丹结实率低甚至不结实，且种子发育不良，用种子繁殖难以获得优良植株，无性繁殖受生长季节的限制、繁殖系数小、形不成规模，无法满足市场的需求，而利用组培技术繁殖牡丹周期短，繁殖系数高，便于大规模生产。因此，牡丹品种群的组培技术已经成为主要研究方向。1.种子培养已经报道的牡丹种子组织培养中,主要以种胚作为外植体,培养基以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素。胚培养技术可以克服胚败育和发育不良,同时也可以缩短种子休眠期,提高萌发率和提早萌发。曹小
3、勇[1]以濒危紫斑牡丹的胚进行组培,在没有添加任何激素的培养基上,离体胚生长类似种子萌发时胚的生长模式,子叶扩大伸长,约到达种子大小时停顿,根伸长生长极其显著,进一步得出:BA促进子叶膨大生长,当BA浓度增大时根生长受到抑制;NAA促进愈伤组织形成,抑制根生长,0.1mg/LBA促进紫斑牡丹胚的胚轴、根生长,有利于幼苗形成。张子学等[2]分别采用凤丹的种子、种胚以及由此产生的子叶、叶柄、叶片和愈伤组织等作为外植体进行芽的诱导,结果采用胚培养可以打破上胚轴的休眠,大大缩短初代培养周期。2.茎尖培养目前,牡丹茎尖培养主要是针对芽的茎尖,并且取得了
4、进展。谢静萱[3]用枯枝牡丹的腋芽茎尖,在培养基MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+LH500mg/L+蔗糖5%获得愈伤组织及分化出芽。张龙勃等[4]运用“胡红”的休眠芽茎尖,在培养基MS+BA1.5mg/L+KT0.5mg/L获得幼苗。孔祥生等[5]运用“姚黄”、“洛阳红”的休眠芽茎尖,在培养基1/2MS(大量减半)+BA1.0mg/L+GA30.5mg/L获得愈伤组织、丛生芽。3.芽培养目前,已报道的牡丹芽培养中,多数以鳞芽为外植体进行研究,包括腋芽、花芽、顶芽、休眠芽等,在所有鳞芽中,以休眠芽的分化表现最好,分化率可达94%
5、,花芽最差仅16%。不同取材时期对芽培养也有影响,12月至翌年2月取材,经过低温休眠,芽充分分化,营养物质累积丰富,苞片紧密,污染率低,成活率高,萌发时间早。因此,此时期取材最好。张桂花等[6]在牡丹芽萌发期和休眠期分别进行腋芽和顶芽组织培养,结果表明:自芽萌动至开始休眠为适宜培养期,芽诱导最佳培养基为MS+6-BA0.5~1mg/L+NAA0.1~0.2mg/L,MS为最佳壮苗培养基,牡丹试管苗培养的适宜光照强度为2000lx,光照时数为10h/d,适宜温度(25±1)℃。刘淑敏运用“古班同春”的花芽,在培养基MS+VC+BA获得幼苗。陈怡
6、平等以紫斑牡丹休眠地下芽为材料,对同一时间打破休眠的地下芽在3种不同培养基上的发育状况、不同时期低温处理后在同一培养基上的发育以及不同时期休眠地下芽在同一培养条件下的发育进行了比较研究,得出MS+BA1mg/L+NAA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L最有利于打破休眠的地下芽发育,720h的低温处理对于地下芽的萌发率及发育速率最好,彻底打破休眠的不同时期地下芽在同一培养条件下发育速率基本一致。陈笑蕾采用“洛阳红”、“胡红”、“肉芙蓉”、“鲁荷红”、“乌龙捧盛”牡丹品种的鳞芽诱导培养,结果表明:品种之间的增殖率、综合萌芽率和增殖系数,“乌
7、龙捧盛”品种表现较好。以“乌龙捧盛”鳞芽为材料,对鳞芽增殖系数的影响依次为:NAA>基本培养基类型>6-BA>IAA;培养基MS+Ca2+(WPM)+6-BA2.0mg/L+IAA0.3mg/L和MS+Ca2++6-BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L有利于试管苗的增殖,继代培养时间应低于35d。在生根培养过程中,IBA和基本培养基类型是影响牡丹试管苗生根率的主要因素,培养基1/2MS+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L+蔗糖20mg/L有利于根的诱导;基本培养基类型和蔗糖浓度是影响牡丹试管苗平均根长的重要因素,培养基WPM+IB
8、A1.0mg/L+IAA1.0mg/L+蔗糖40mg/L有利于根的生长;IAA浓度和蔗糖浓度是影响牡丹试管苗根数的重要因素。4.叶及叶柄培养为保存牡丹种质资源,加速
