珙桐组织培养研究进展

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1、琪桐组织培养研究进展摘要从外植体种类、无菌体系的建立、培养基及激素选择、生根方法等方面综述了琪桐组织培养研究进展，并对今后工作进行了展望。关键词琪桐;组织培养;研究进展;外值体;无菌体系AbstractResearchadvancesontissuecultureofDavidiainvolucratawerereviewed,includingthetypesofexplants,theestablishmentofasepsistissueculturesystem,selectionsofmediumandhormone,rootingmethod,et

2、c.TheprospectivestudyontissuecultureofDavidiainvolucratawasproposed.KeywordsDavidiainvolucrata;tissueculture;researchadvances;explants;asepsissystem琪桐(DavidiainvolucrateBaill)为琪桐科单型属植物，其天然分布仅在湖北、四川、贵州、湖南、陕西、云南、甘肃等省，且分布不均［1］,数量极少，于1999年被列为国家I级重点保护野生植物。它树形高大，树干粗直，具有很高的观赏价值，是世界著名的观赏树种［

3、2］。此外，其木材纹理好,可以用于雕刻及精致家具的制备,种子果皮可用于榨油［3］,因此人们已肯定琪桐在园林绿化、生态学及植物资源学方面的价值。在自然条件下，琪桐以种子进行繁殖［4］，外果皮坚硬，不利于透气透水，中果皮、内果皮和胚乳中存在抑制物［5］,二度休眠、种子败育［6］导致了其种子萌发率极低。采用激素浸泡处理种子可以大大提高种子的萌发率，但在幼苗期死亡率高［7］。从现有的研究报道来看,琪桐的快繁、再生体系的建立尚处于起步阶段，且进展缓慢，多数研究集中在愈伤组织的获得方面，只有极少数成功获得了分化苗,但分化率较低，尚不能满足工厂化生产的要求。1外植体种类植物

4、体上切取下来进行培养的那部分组织或器官叫做外植体［8］。琪桐组培中所用的外植体有以下几种。1・1冬芽冬芽是琪桐组培中使用频率最高的外植体。早在1982年,毕世荣等采用冬芽，经过愈伤诱导，分别形成了根、芽和小苗，虽然对激素的最适浓度、增殖倍数等未作明确说明，但为后人的科研工作奠定了基础。后来的多数研究仅处于初代培养阶段，仅成功地诱导出愈伤组织或得到较高的芽萌动诱导率［9-12］,但没有由愈伤诱导或直接分化形成再生苗。金晓玲等［13］采用冬芽，不经过愈伤诱导，以形成丛生芽的方式,初步解决了琪桐分化的问题，成功获得了完整的植株,并且移栽成活。但其分化率过低，且在培养

5、中褐化问题严重，严重影响了分化率。1・2种子但由于琪桐种子的结构及生理后熟等的特点，给琪桐种子的组培带来了很大的阻碍。董社琴等［14］采用低温培养种胚的办法，证明了6-BA能解除琪桐种子萌发的抑制作用，GA3对解除种子生理后熟有重要作用，IAA对解除种子形态后熟有作用，它与GA3在种子体内起着协同作用，虽然没有获得完整的植株，但对琪桐种胚的组培工作起了重要的铺垫作用。李月琴等［15］采用低温浸泡种子、常温培养，经过愈伤组织的诱导，获得了完整的植株，但增殖系数很低，尚不能达到快繁的目的，且没有解决褐化的问题。这也说明不同的处理方法对种胚的培养具有显著的影响，需进

6、一步研究低温浸泡的时间及培养温度,并且完善种胚的培养方法。1・3根、茎、叶采用根为外植体的较少，且采取根对琪桐有破环作用，对于濒危植物来说更是不可取的方法。董社琴等［16］采用一至二年生琪桐的根尖为外植体,愈伤组织的诱导率高达98.83%,经过诱导后可以形成不定芽和不定根。罗世家［17-18］以茎、叶、芽为外植体，采用正交设计的方法研究了不同培养基、激素配比对愈伤诱导的影响,证明了不同的外植体其最适的培养基也不同，芽相对于茎和叶较容易诱导出愈伤组织。以冬芽、种子、根、茎、叶为外植体，均成功地诱导出愈伤组织或取得较高的冬芽诱导率，但只有少数成功地获得了分化苗，但

7、分化率、增殖系数过低，远远不能满足科研和工厂化生产的需要，在以后的研究中，应尝试采用新的外植体,扩大研究范围，找到最合适的培养温度、光照等培养条件。2无菌体系的建立消毒剂要尽量杀死外植体上所带的一切微生物，且不能损伤材料，较好地保持外植体的生活力。常用的消毒剂有乙醇、次氯酸钙、次氯酸钠、氯化汞、过氧化氢、抗生素等，消毒效果最好的是氯化汞。但对于不同外植体，采用的消毒剂的种类及处理时间差别很大，试验中要选择污染率较低且成活率高的杀毒剂。琪桐芽的消毒相对容易，而种子难于消毒，这与种子的结构密切相关。琪桐种子外果皮坚硬、不透水、不透气，消毒剂很难浸入，而取出种胚后进

8、行消毒易导致种胚死亡。在研究中使用较多