临床微生物检验

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1、临床微生物检验临床微生物检验是人体的各种物质进行微生物学检验，为临床诊断和治疗提供依据。整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定，药物敏感试验，出具检验报告。微生物学检验程序合格标本的采集（标本的采集和运输）接种（选择合适的培养基、正确的接种方法）阳性菌的选择（微生物工作者的重点）鉴定及药敏报告结果一、血液检验正常人血液是无菌的，目前败血症一词不用，常用菌血症和脓毒症，脓毒症是指全身性炎症反应。菌血症是指细菌侵入血循环，在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性，有明显感染症状。血液感染是一种危

2、重的全身感染，提供病原学的诊断极为重要。1.常见病原菌种类病原菌G+球菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌G+杆菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌G-球菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌G-杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌真菌念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌厌氧菌拟杆菌、产气荚膜梭菌2.血液标本的病原菌的检验3.病原菌的检验程序1.标本采集2.标本直接检查(1)直接显微镜检查;(2)抗原检测;(3

3、)核酸检测;3.分离培养与鉴定(1)培养基选择;(2)分离培养与鉴定;4.抗体检测常用ELISA、间接免疫荧光技术等方法;5.药物敏感性试验4.临床意义1.葡萄球菌菌血症由耐甲氧西林金黄色萄球菌(MRSA)及凝固酶阴性葡萄球菌引起的逐年增多，占10％～15％。2.肠球菌菌血症约占10％,常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人。3.G-杆菌菌血症主要侵犯免疫功能低下的病人。4.L型菌感染菌血症使用抑制细胞壁的抗生素，由缺损细胞壁的细菌感染所致。5．厌氧菌菌血症常合并需氧菌感染，症状重而复杂。6．真菌血症常由条件致病性真菌引起，有念珠

4、菌、曲霉和毛霉等。7．医院感染菌血症近年来明显增多，占30％—60％。二、中枢神经系统感染1.常见病原体G+菌葡萄球菌，肺炎链球菌，B群、A群链球菌，消化链球菌，结核分枝杆菌，产单核细胞李斯特菌、炭疽芽胞杆菌;G-菌脑膜炎奈瑟菌，大肠埃希菌，铜绿假单胞菌，卡他布兰汉菌，类杆菌，不动杆菌，肺炎克雷白杆菌;病毒乙型脑炎病毒,柯萨奇病毒AB,脊髓灰质炎病毒,新肠道病毒68～71,狂犬病毒;真菌及其他新生隐球菌,白假丝酵母菌,钩端螺旋体2.微生物检验程序对婴幼儿不能腰穿时，用PCR技术检测外周血，对脑膜炎条瑟菌感染者的阳性率为100％，且

5、不受抗生素药物治疗的影响；涂片和结核分枝杆菌培养阳性率有限，且时间长，用PCR技术检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA，检出率高，快速灵敏和特异，但要严格操作规程，避免假阳性。3.抗体检测为病毒检测的快速诊断方法，较常用。(1)中和试验：主要检测中和抗体lgG，此抗体持续时间长有诊断意义，阳性率和特异性均高。双份血清效价4倍增高。(2)特异性IgM抗体测定：此抗体在病后4天即可出现，2周可达高峰，常用于早期诊断。用ELISA、间接免疫荧光法等检测，敏感性和特异性较高。(3)补体结合试验：补体结合抗体为lgG抗体，常在病后第二周出现，5—

6、6周达高峰，单份血清1：4为阳性，双份血清效价增高4倍为阳性，用于回顾性诊断或流行病学调查。(4)血凝抑制试验：可用于临床诊断及流行病学调查。血凝抑制抗体在病后5天出现，2周时达高峰，双份血清抗体效价增高4倍以上有诊断价值，阳性率高于补体结合试验，但可出现假阳性。4.临床意义1．细菌性脑膜炎是常见类型，其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，结核性脑膜炎呈回升趋势，为防治重点。肺炎球菌、链球菌脑膜炎仍常见，流感嗜血杆菌脑膜炎以及其他G-杆菌性脑膜炎有增多趋势。2．真菌性脑膜炎最常见是隐球菌脑膜炎，其他真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子菌渐增

7、多，免疫功能低下患者易并发。3．流行性乙型脑炎是人兽共患的自然疫源性疾病。4．肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们的关注和重视。还不断发现新肠道病毒68-71型引起的脑膜炎及脑炎。三、创伤和外科感染1.常见病原菌种类革兰阳性革兰阴性球菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、消化链球菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌杆菌结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、拟杆菌、梭杆菌、肺炎克雷白杆菌、变形杆菌其他衣氏放线菌、诺卡菌2

8、.微生物检验程序见第一节血液感染或有关章节。取创伤分泌物和脓液作标本；放线菌首先要检出标本中的硫磺颗粒；检测结核分枝杆菌作抗酸染色镜检；检测厌氧菌要作厌氧培养。由创伤、手术、侵人性器械操作等外科治疗引起的感染最为常见，并日渐增多。四、上呼吸道感染(