复方丹参方及其成分配伍的体外抗凝血作用

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1、复方丹参方及其成分配伍的体外抗凝血作用【摘要】目的系统考察复方丹参方及其成分配伍的体外抗凝血作用，发现复方丹参方活血作用的物质基础，为体内动物实验提供参考依据。方法以凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(KPTT)和凝血酶时间(TT)为检测指标，观察复方丹参方、丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1对这些指标的影响。结果体外凝血研究的结果表明复方丹参方、丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1及其成分组合能延长凝血时间，且作用呈剂量依赖性。丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1起主要作用，丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1的成分配伍与复方丹参方的抗凝血作用没有明显差别。结论丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1是复

2、方丹参方活血作用的物质基础，两者配伍可以代替复方丹参方的抗凝血作用。【关键词】复方丹参方;丹参酮ⅡA;人参皂苷Rg1;凝血　　[Abstract]ObjectiveToobservethebloodanticoagulationeffectsofFufangdanshenfangandunderstandthecontributionsofdifferentconstituentstoactivitiesofFufangdanshenfang.MethodsTheactionofFufangdanshenfanganditsconstituentsonprothr

3、ombintime(PT),activatedpartialthromboplastintime(APTT),thrombintime(TT)ined.ResultsPT，APTTandTTin)，将上清用双蒸水调整浓度(相当原料药的浓度)为1kg/L，用0.22μm的滤膜过滤除菌。放置在4℃冰箱储存。　　1.3.2富血小板血浆和贫血小板血浆样品的制备用3%的戊巴比妥麻醉l(抽血前针管内混以3.8%枸橼酸钠0.5ml，取血时要注意防止气泡形成，以免影响血小板功能的测定)，然后离心(800rpm，10min)，得富血小板血浆(plateletrichplasma，P

4、RP),将下层再离心(3000rpm，15min)，得贫血小板血浆(plateletpoorplasma，PPP),用PPP测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(KPTT)和凝血酶时间(TT)。　　1.3.3PT的测定取PT凝血活酶冻干品一只，加2.2ml蒸馏水，轻摇溶解;取贫血小板血浆0.1ml，药物1、2、4μl,37℃孵育2min后，加入37℃预温的凝血活酶0.1ml，混匀，记录凝固时间，即为凝血酶原时间(PT)。　　1.3.4KPTT的测定取KPPT凝血活酶冻干品一只，加1.5ml蒸馏水，轻摇溶解;取KPPT凝血活酶悬液0.1ml，贫血小板血浆0

5、.1ml，药物1、2、4μl,37℃孵育5min后，加入0.1ml0.025mol/l的CaCl2溶液，混匀，记录凝固时间，即为活化部分凝血活酶时间(KPTT)。　　1.3.5TT的测定取凝血酶冻干品一只，加5.0ml蒸馏水，轻摇溶解;取贫血小板血浆0.2ml，药物1、2、4μl,加入37℃预温的凝血酶0.1ml，混匀，记录凝固时间，即为凝血酶时间(TT)。　　1.4统计学处理各组实验数据以均值±标准差(x±s)表示。两组间的差异显著性分析用t检验。　　2结果　　2.1丹参酮ⅡA对体外凝血的影响丹参酮ⅡA能延长PT、KPTT、TT，且随着药物浓度的升高凝血时间延长

6、，说明作用呈剂量依赖性。结果见表1。表1丹参酮ⅡA对体外凝血的影响注：与对照组比较bP<0.05;cP<0.01下同　　2.2人参皂苷Rg1对体外凝血的影响人参皂苷Rg1能延长PT、KPTT、TT，且随着药物浓度的升高凝血时间延长，说明作用呈剂量依赖性。结果见表2。表2人参皂苷Rg1对体外凝血的影响　　2.3复方丹参方对体外凝血的影响复方丹参方能延长PT、KPTT、TT，且随着药物浓度的升高凝血时间延长，说明作用呈剂量依赖性。结果见表3。表3人参皂苷Rg1对体外凝血的影响　　2.4复方丹参方成分组合对体外凝血的影响复方丹参方中的丹参酮ⅡA和人参皂苷Rg

7、1组合能延长PT、KPTT、TT，且随着药物浓度的升高凝血时间延长，说明作用呈剂量依赖性。结果见表4。表4复方丹参方成分组合对体外凝血的影响　　3讨论　　复方丹参方是治疗心血瘀阻型冠心病的常用中药方，以该方为基础开发的中成药如丹参滴丸，已被广泛应用于治疗冠心病等，临床疗效确切并且出口国外，产生了巨大的经济和社会效益。已有的研究基本明确了复方丹参的有效成分、药理作用、代谢产物及临床疗效。但是对于复方丹参方有效成分为基础最佳分子组合及信号分子组合研究尚未系统开展。复方丹参方及其成分配伍研究可以发现复方中的有效成分及各成分间的协同关系,从而实现复方的优化组合,实现由天然

8、药物组方向