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时间:2018-11-22
《扶正抑瘤颗粒药物血清诱导小鼠肝癌细胞凋亡及其机制的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、扶正抑瘤颗粒药物血清诱导小鼠肝癌细胞凋亡及其机制的研究作者:赵健雄,程卫东,徐瑞峰,李元青【关键词】,扶正抑瘤颗粒[摘要]目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用扶正抑瘤颗粒药物血清,温育体外培养的H22小鼠肝癌细胞。流式细胞仪进行细胞周期分析,检测凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化;链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物(streptavidinbiotinperoxidaseplex,SABC)免疫细胞化学法观察凋亡相关蛋白Bcl2和Bax的变化。结果:
2、扶正抑瘤颗粒药物血清可影响细胞周期,使小鼠肝癌H22细胞的增殖阻滞在G1/G0期,并可测到凋亡峰,同时可下调Bcl2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达(扶正抑瘤颗粒药物血清组与空白对照组比较,P<0.05)。结论:扶正抑瘤颗粒可通过影响细胞生长周期,调节Bcl2和Bax蛋白的表达诱导小鼠肝癌细胞凋亡。 [关键词]扶正抑瘤颗粒;细胞凋亡;细胞周期;原癌基因蛋白质cbcl2;Bax EffectsofFuzhengYiliuGranulemedicatedserumonapoptosisofliver
3、cancercellsfrommiceanditsmechanism ABSTRACTObjective:TostudytheeffectsofFuzhengYiliuGranule(FZYLG)medicatedserumonapoptosisoflivercancercellsH22frommiceanditsmechanism.Methods:LivercancercellsH22frommiceediacontainingserafromrabbitsmedicatedetryinethecel
4、lcycleandanalyzetheapoptoticrateoftheH22cells.ThemorphologicalchangesoftheH22cellsissionelectronmicroscopeandtheapoptosisrelatedprotEinsBcl2andBaxinedbystreptavidinbiotinperoxidaseplex(SABC)method.Results:FZYLGmedicatedserumcouldinfluencethecellcycleandst
5、optheproliferationofH22cellsattheG1/G0phaseediaedicatedsera,theexpressionofBcl2decreasedediumedicatedserum(P<0.05).Conclusion:FZYLGmedicatedserumcaninduceapoptosisofthelivercancercellsH22byinfluencingthecellcycle,dopus公司产品;JEM100CX透射电子显微镜,日本电子株式会社产品;RP
6、MI1640培养基,美国GIBCO公司产品;小牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司产品;碘化丙啶,TritonX100,RNaseA均为Sigma公司产品;链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物(streptavidinbiotinperoxidaseplex,SABC)法免疫组化试剂盒及多克隆抗体,武汉博士德公司产品。 1.4细胞培养小鼠肝癌H22细胞由兰州医学院药理学教研室惠赠。常规接种于昆明种小鼠腹腔保种。实验前,取腹腔接种7d的小鼠乳白色腹水,用PBS液漂洗1次后调整细胞浓度为(1~5)×105/m
7、l,转种于含10%小牛血清的RPMI1640完全培养基中(内含青霉素、链霉素各100U/ml),于37℃,5%CO2饱和湿度条件下培养,取对数生长期细胞进行实验。 1.5药物血清制备纯种新西兰家兔20只,随机分成5组:空白对照组、FZYLG大、中、小剂量组和天仙胶囊组。空白对照组予以灌服生理盐水;FZYLG大、中、小剂量组分别按9、4.5、2.25g・kg1・d1予以FZYLG灌胃(FZYLG中剂量=临床常用量×动物等效面积系数×培养基内血清稀释度;大剂量=中剂量×2;小剂量
8、=中剂量/2);天仙胶囊组予以复方天仙胶囊0.375g・kg1・d1灌胃(按人体等效剂量×培养基内血清稀释度计算)。各组均每日分2次等体积灌胃(灌药前禁食4h,自由取水),共3d。于末次灌胃后2h心脏采血,室温下静置4h,2400r/min离心10min,分离血清,0.22μm微孔滤膜无菌过滤后,置-20℃冰箱保存备用。 1.6细胞周期及凋亡分析取对数生长期细胞,用空白RPMI1640培养基调整细
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