天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究作者:张艳琼,黄利鸣,吴江锋【摘要】  目的通过建立荷U14小鼠宫颈癌模型,从个体水平初步探索天花粉蛋白对荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性。方法建立荷U14小鼠宫颈癌模型,TCS治疗,检测抑瘤率、脾指数、流式细胞术分析T细胞亚群。结果TCS治疗组,脾指数明显高于阴性对照组,C较阴性对照组、CTX组明显减少;与正常组比较无显著性差异。TCS组的C/C较阴性对照组、正常组明显增大;与CTX组比较无

2、显著性差异。结论在体内,当TCS的剂量为/kg时,具有一定的免疫调节和增强体液免疫功能作用。【关键词】天花粉蛋白荷瘤鼠抑瘤作用Abstract:ObjectiveTostudytheanti-tumoreffectoftrichosanthin(TCS)insettinguptheanimalmodelofU14,thesubsetoftheTcellswasanalyzedbythetumorinhibitoryrate,theindexofspleenandFCM.ResultsAftertreatmentwithTCS,theindexofspl

3、eenwasincreasedobviouslycomparedwiththenegativegroup,theCdecreasedobviouslycomparedwiththenegativeandCTXgroups,buthadnosignificantdifferenceascomparedwiththenormalgroup.TheC/C课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出

4、新见解,特别是博士生必须有创新性的成果inTCSgroupwasincreasedobviouslycomparedwiththenegativeandnormalgroups,buthadnosiguificantdifferenceascomparedwiththeCTXTCScanregulateimmunityandincreasethehumoralimmunityinvivowhenitsdoseis/kg.Keywords:Trichosanthin;Micewithtumor;Effectoftumor-inhibition  人子宫颈

5、癌是导致妇女死亡的一种常见恶性肿瘤。天花粉蛋白;环磷酰胺购自江苏恒瑞医药股份有限公司;RPMI-1640培养基购自Gibcol公司;PE标记C抗体购自eBioscience公司;FITC标记C抗体购自eBioscience公司;倒置显微镜和多功能显微镜及图像分析系统购自德国LEIca公司;EPICSXL-4型流式细胞仪购自Beckmancoulter公司。U14肿瘤细胞株由三峡大学医学院免疫重点实验室提供。动物6~8周龄近交系Balb/c小鼠32只,体质量18~20g,雌性,购自武汉大学实验动物中心。方法.1课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作

6、出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果TCS对实体瘤的抑制作用复苏U14细胞株,昆明小鼠腹腔中反复传代,第3代后5~d,取小鼠腹水,用无菌生理盐水调整细胞浓度为2×107/ml。常规消毒后,取细胞悬液接种于Balb/c小鼠右侧腋窝皮下。接种后的小鼠随机分3组:TCS实验组、阴性和阳性对照组,每组8只。TCS实验组:用生理盐水稀释TCS注射液,药物浓度为/kg,/只,给药1次/d,连续给药10

7、次。阳性对照组:环磷酰胺,30mg/kg。阴性对照组给予等体积的生理盐水。另设正常组8只,不进行任何处理。.2组织取材和称重第11天称小鼠体质量。眼球取血,置于加有抗凝剂的试管内。处死小鼠,取出肿瘤组织、脾脏,称瘤重、脾重,计算抑瘤率(inhibitionrate,IR)。计算脾指数,公式为:脾指数(SI)=脾脏重量(S)/体质量(W)(g/g)。.3流式细胞术分析T细胞亚群将血液中分别加入PE标记的C、FITC标记的C单克隆抗体各20μl,混匀,于室温下避光作用15~30min。每个试管内加入溶血剂ml,颠倒混匀后放暗处10min,离心,用PBS洗1

8、次,加1%甲醛PBS液,固定10~30min,经流式细胞仪检测每管中C,C细胞百分比。.4统计

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