大豆抗原蛋白对仔猪肠道的致敏作用与elisa检测方法的建立

《大豆抗原蛋白对仔猪肠道的致敏作用与elisa检测方法的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、万方数据是11S致敏组。小肠5段肠管中分泌型IgA阳性表达光密度值从强到弱依次为：空肠中段>十二指肠>空肠近端、回肠远端>空肠远端。4．建立了仔猪血清大豆抗原蛋白间接ELISA检测方法。其中，11S蛋白的最适包被质量浓度为2．Ogg·mL～，包被作用时间为37℃下2h；封闭液为10g·L～BSA，37℃封闭lh；待测血清最适稀释度为1：1600，37℃作用1h；酶标抗体最适稀释度为1：1500，37℃作用1h；最佳显色时间15min。7S蛋白的最适包被质量浓度为2．51．tg·mL一，包被作用时间为37℃下2h；封闭液为10g·L～BSA，37℃封闭1h；待测血清最适稀释度

2、为l：1600，37℃作用1h；酶标抗体最适稀释度为1：1500，37℃作用1h；最佳显色时间25min。llS和7S抗原蛋白间接ELISA检测方法的批内、批间变异系数均小于10％，重复性较好，灵敏度较高。5．在临床上对已建立的间接ELISA方法进行敏感性和准确性检测，并确定llS抗原蛋白抗体的间接ELISA方法敏感性为87．5％(7／8)，准确性为81．3％(13／16)；7S抗原蛋白抗体的间接ELISA方法敏感性为87．5％(7／8)，准确性为87．5％(14／16)。试验表明，大豆抗原蛋白对仔猪肠道具有致敏作用，并能改变肠道的正常生理状态。当仔猪肠道发生致敏反应时，肠

3、道黏膜会释放大量的分泌性IgA；建立了检测仔猪血清大豆抗原蛋白抗体的间接ELISA方法，该方法具有很强的特异性和敏感性，可用于大豆抗原蛋白11S、7S过敏反应的临床诊断。关键词：大豆抗原蛋白，仔猪，肠道，致敏作用，检测方法II万方数据AbstractSoybeanantigenproteincancauseallergicreaction，whichnotonlythreatenshumanhealth，butalsocauseshugeeconomiclossesoflivestockandpoultry．Inthepresentstudy，allergenicityof

4、soybeanantigenproteinonintestinesofpigletswasstudiedthroughcausingallergybysupplementinghi曲puritysoybeanproteinantigentopiglets’diets．Meanwhile，anindirectenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)Wasestablishedfordetectingtheserumantibodylevelsofpigletssensitizedbysoybeanantigenprotein．Thismay

5、provideaclinicaldiagnosismethodforallergenicitycausedbysoybeanproteinantigen．Allergenicityofsoybeanantigenproteinonintestinesofpiglets．30heathypiglets，weanedatday21，wererandomlydividedintothreegroups(10weanedpigletsineachgroup)：controlgroup，glycinin(11S)allergengroupand[3-conglycinin(7S)al

6、lergengroup．Thefirstandsecondsensitizationexperimentswerecarriedoutattheageof21to27daysand32to34daysinpiglets，respectively．TheratioesoflS(purity：80呦basicdietand7S(purity：85％)basicdietWas4％inboth1Sallergengroupand7Sallergengroup．Bloodsampleswerecollectedfromtheanteriorvenacaveondays21，28，35

7、讪thethylenediaminetetraaceticacid(EDTA)anticoagulanttubeformeasuringlevelsofplasmaD—lacticacid09一LA)，diamineoxidase(DAO)and5-hydroxytryptamine(5-HD．TheskinsensitivitytestWascarriedoutat35dofageandfivepigletswererandomlyselectedineachgroupat36dofage．Duodenum，pr