中国黑小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因克隆及序列的分析

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1、ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheMasterDegreeofScienceSequenceAnalysisandGeneCloningofLow-molecular-weightGluteninSubunitfromChineseBlackKernerWheat-76Candidate:XieFeiMajor:MicrobiologySupervisor:Prof.HeGuang-yuanAssociateProf.TuZhi-m

2、ingHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430074,P.R.ChinaMay.,2008独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、

3、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日华中科技大学硕士学位论文摘要低分子量麦谷蛋白亚基(lowmolecularweightgluteninsubunit，LMW-GS)是小麦籽粒贮藏蛋白

4、的重要组分，其组成和数量直接影响和决定着小麦的加工品质。分析中国黑小麦中的LMW-GS，对普通小麦品质育种上有重要的理论和应用价值。本文根据已发表的LMW-GS基因的序列比对结果设计了扩增低分子量谷蛋白基因完整编码区的简并引物，采用PCR方法从中国黑小麦76中分离出3个低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)基因，命名为LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3。推导氨基酸序列比较显示，LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3之间的相似性为72.32%，在N－末端重复区部分和C－末端区

5、中存在着差异。其主要结果如下:1.根据已发表的LMW-GS基因的序列比对结果设计了扩增低分子量谷蛋白基因完整编码区的简并引物对中国黑小麦76的总DNA进行扩增获得了约900bp左右的DNA片段，与预期的低分子量麦谷蛋白基因编码区的长度接近。2.克隆并测序后获得3个不同的亚基基因LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3。LMW-GS76-1编码区全长897bp,编码298个氨基酸；LMW-GS76-2编码区全长924bp,编码307个氨基酸；LMW-GS76-3编码区全长966bp,编码321个氨基酸。其

6、在N、C端核苷酸的组成上存在保守性，具有LMW-GS基因的典型结构特征。3.序列比较分析显示，这3个序列与小麦族物种的低分子量麦谷蛋白亚基基因序列有较高的一致性。分析表明，LMW76-1和LMW76-2可能是由Glu-D3位点编码的。LMW76-3可能是由Glu-A3位点编码的。关键词：中国黑小麦76低分子量麦谷蛋白亚基基因克隆序列分析I华中科技大学硕士学位论文AbstractThelow-molecular-weightgluteninsubunits(LMW-GS)areonegroupofthemajorcomponen

7、tsofstorageproteinsinwheatseeds,whosevariationintheamountandcompositionwouldaffectanddeterminetheflourprocessingproperties.AnalysingtheLMW-GSofChineseBlackKernerWheat-76wouldbesignificantforwheatqualityimprovementprogram.UsingPCR-amplificationmethod,thecodingsequenc

8、esofthreelowmolecularweightgluteninsubunit(LMW-GS)wereisolatedfromChineseblackkernelwheat-76,designatedasLMW76-1、LMW76-2andLMW76-3.Thededu