小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因的克隆及序列分析

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1、山东农业大学硕士学位论文小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因的克隆及序列分析姓名：程培周申请学位级别：硕士专业：生物化学及分子生物学指导教师：王宪泽2003.6.16X≥毛≥s12关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助帮徽磁重要贡献的个人缄集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向圈家有关部门或机构送交论文纸质本和电子叛，允许论文被查阅和借阕。本人授权由东农业大学可以将本学位论文的

2、全部或部分内容编入有关数据库进行梭索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：程盎衙导师签名：丝嗲网期：竺尘，，‘争。山东农业大学硕上学位论文小麦低分子量麦谷蛋白豫基基因的克隆及序列分析专业：生物化学及分子生物学指导教师：王宪泽教授硕士研究生：程培周摘要{低分子整麦谷矮自是小麦谷蛋囱的主要构减部分，约占谷蛋自息量＼的40％，其在小麦的营养品质和酾粉加工过程中商重要作用，但由于其分子量鞠差较小和亚基数目较多，不易用SDS．PAGE进行分离，因而与离分子量麦谷撩白相比对其研究较少。且以前的研究

3、主要集中在原、／始二倍体和四倍体硬粒小麦衫本研究以普通六倍体小麦PH82．2—2为材／享毒，对其低分子量爱谷蛋蠢的基因遴行磅变，磅突结果虹下：1．根据Genebank上鼗记的从原始小麦和硬粒小麦的低分子量麦谷蛋囱基因掰端懿豫守痔列设计雩}耪，敦小麦时片兔耱瓣掇致DNA爱PCR进行目的基因的扩增。优化扩增的反应体系，得到9个目的片段，其大小在7∞一1500bp之湖。2．对褥到的瞬的基因进行克隧测序，推导蛋白质序列，进行N端，C端和重复序列的比较。N端和C端的序列怒高度保守，其差别仅仅是萋个羧基翳蛰换或缺失。重复J葶歹《的主要的黧复单元为PFSQQQ重复

4、次数在1一ll之间，其他还存在个别蒸因的氨复单元如QPVLPQPILPQQPIIIL，重复次数褒2--3之闫。薰复蕈元不同秘壤复摹元鹣捶入和缺失是造成基因序列大小差异的主要原因。并根据其Cys残基的不糕培崩：小滏低分了量套苒蛋臼程螭笨闻的克降及序列分析同将9个基因分成6类，讨论了Cys残基在品质中所起的作用，得到普通小麦中低分子量麦谷蛋白(LMW)旺基的一般结构模型。3．将得到的序列和已知间源序列相比较确定了备基因在凝色体上的定位。位于Glu．D3有G1，G2，G5，G6。位于Glu—A3位点上的商G3，G7，G8。谯于Gtu，B3．位点的毒G4，G

5、9。关键诵：鬣分子量麦谷蛋鑫，、墓露究隆?黟捌分辨；Cys残蒸，’基因定位2——当堡垒些盔兰堡主兰垡笙茎CloningandSequenceAnalysisonGenesofWheatLowMolecularWeightGluteninSubunitSepciality．．BiologicChemistryandMolecularBiology’Supervisor．ProfessorWangXianzeGraduatestudent：ChengPeizhouDepartmentofPlantScience，ShandongAgriculturalU

6、niversityTai’an，Shandong271018Abstract：Thelowmolecularweightgluteninsubunit(LMW-GS)isthemaincomponentofwheatgluten．TheLMW—GSisoneofthemainfactorsthatdeterminethenutritionalandtechnologicalproperties．Becauseoftheirlargenumberandconsiderableheterogeneity，theyaredifficulttObesepar

7、atedbySodiumDodecylSulfate—PolyacrylamideGelElectrophoresis(SDS—PAGE)．ThestudiesaboutLMW—GSarerarecomparedwithHMW—GSandfocusonprimitivewheatanddurumwheat．thispaperstudytheLMW—GSsgeneutilizingthecommonwheatcultivars：PH82-2—2．theresultsasfellow：1．Wedesignedthreepairsofprimesaccor

8、dingtopublishedprimitivewheatLMW·GSgenesequencesandobt