乌司他丁对机械通气致肺损伤大鼠肺组织cc16表达的影响

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1、山西医科大学硕士学位论文乌司他丁对机械通气致肺损伤大鼠肺组织CC16表达的影响摘要目的通过观察乌司他丁(UTI)对大潮气量机械通气大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(CC16)表达的影响,探讨CC16在机械通气所致肺损伤(VILI)发病中的作用以及UTI对VILI的干预作用。方法24只雄性健康Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、大潮气量(H-VT)组和干预(UTI)组。采用硫代巴比妥酸比色法测定大鼠肺组织中丙二醛(MDA)含量,采用考马斯亮蓝染色法测定BALF中总蛋白(TP)含量,采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR

2、法)和免疫组织化学染色法(SABC法)检测肺组织CC16mRNA及其蛋白表达水平。结果1.肺组织MDA测定:大潮气量(H-VT)组和UTI干预组大鼠肺组织MDA的含量明显高于对照组,与对照组相比均有统计学差异(P<0.01);且H-VT组高于UTI干预组(P<0.01)。2.BALF总蛋白测定:大潮气量(H-VT)组和UTI组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TP的含量明显高于对照组,与对照组相比均有统计学差异(P<0.01);且H-VT组高于UTI干预组(P<0.01)。3.CC16mRNA检测:大潮气量(H-VT)组

3、和UTI组大鼠肺组织CC16mRNA的表达低于对照组,其比值分别为(0.340±0.080、1.229±0.076);UTI干预组大鼠肺组织CC16mRNA表达虽低于对照组,但较大潮气量(H-VT)组明显增高,且与对照组相比均有统计学差异(P<0.01)。4.CC16蛋白及Clara细胞百分比测定:与对照组比较UTI干预组和大潮气量(H-VT)组大鼠肺组织CC16蛋白表达水平及Clara细胞百分比明显降低,其光密度值和阳性表达率分别为(1.103±0.056,48.832±0.826)、(0.263±0.022,23.7

4、05±1.688),而UTI干预组大鼠肺组织CC16蛋白表达及Clara细胞百分比虽低于对照组,但较大潮气量(H-VT)组明显增高,且与对照组相比均有统计学差异(P<0.01)。5.病理学改变:对照组肺泡结构和各级支气管上皮完整,肺泡间隔正常,无明显炎症细胞浸润。大潮气量组可见弥漫性肺间质水肿和大量炎症细胞浸润,部分肺泡破裂融合,肺泡腔内有少量出血,UTI组可见肺间质水肿和少量炎性细胞浸润,肺泡腔结构基本完整,肺损伤程度较大潮气量组明显减轻。结论1.大潮气量机械通气不但可使肺组织Clara细胞数量及CC16表达减少,还能

5、导致局部肺组织氧化/抗氧化系统失衡,是引起VILI发生的重要原因之一。2.UTI一方面可通过促进CC16的合成而抑制肺组织炎症反应,另一方面又可通过抑制氧自由基的释放而减轻肺组织氧化性损伤,对VILI的临床防治具有积极作用。关键词机械通气;急性肺损伤;Clara细胞分泌蛋白;乌司他丁II山西医科大学硕士学位论文EffectsofUlinastatinontheexpressionofCC16intheratlunginhightidalvolumemechanicalventilationAbstractObjectiv

6、eToexploretheroleofulinastatin(UTI)inthetreatmentcourseofventilator-inducedlunginjury(VILI)byinvestigatingtheeffectofUTIonexpressionofClaracellsecretoryprotein(CC16)inthelungofratsinhightidalvolumemechanicalventilation.MethodsTwenty-fourmaleWistarratswererandomly

7、dividedintothreegroups:controlgroup,hightidalvolumeventilationgroupandUTIpretreatmentgroup.ThelevelsofMDAinthelungandtotalproteininbronchoalveolarlavagefluid(BALF)weremeasured.TheexpressionofCC16mRNAinthelungwasdetectedbyreversetranscriptionpolymerasechainreactio

8、n(RT-PCR).ThenumberofClaracellsandsynthesisofCC16weredetectedbyimmunohistochemistry.Results1.ThelevelsofMDAinlungdetection:Comparingwithcontrolgroup,thelevelso

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