禾谷镰孢菌对戊唑醇抗药性风险评估及抗药性机制初探

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1、河北农业大学硕士学位论文禾谷镰孢菌对戊唑醇抗药性风险评估及抗药性机制初探姓名：叶滔申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：马志强；张利辉20120522摘要小麦赤霉病是由禾谷镰孢菌(FusariumgraminearumSchwade)引起的一种世界范围内最重要的病害，也是国内外小麦生产上重要防治对象之一。该病不仅给小麦的产量造成损失，同时还产生以脱氧雪腐镰刀菌烯醇为主的真菌毒素，对人畜都有较大的危害。目前，生产上仍以化学防治为主。但长期单一地使用同类药剂，可能引起病原菌对药剂产生抗药性，导致药剂防效降低。戊唑醇是一种高效、广

2、谱、低毒和内吸性强的甾醇脱甲基化抑制剂，其作用方式独特，对小麦赤霉病有很好的效果，但尚未大面积推广应用。因此，本试验进行了禾谷镰孢菌对戊唑醇的敏感基线及对不同作用机制杀菌剂交互抗药性、室内抗药性风险评估、抗药性生物学特性、抗药性生理学机制等方面的研究。主要研究结果如下：1．确立禾谷镰孢菌对戊唑醇的敏感性基线。2009～2010年120株禾谷镰孢菌来源于河南、山东、河北等地区，采用菌丝生长速率法对该120株病原菌进行了敏感性测定。结果表明：EC50值范围为0．0072—0．2007I．tg／mL，最高与最低值相差27．88倍，E

3、C50平均值为(0．10264-0．0454)1．tg／mL，最小抑制浓度(MIC)大于0．8lag／mL以上。120株禾谷镰孢菌对戊唑醇的敏感性频率分布呈连续性的单峰曲线，因此可视为野生敏感菌株，可把EC50平均值为(0．10264-0．0454)I-tg／mL作为戊唑醇对禾谷镰孢菌病菌田间抗药性监测的敏感性基线。2．采用菌丝生长速率法测定1l株禾谷镰孢菌敏感菌对戊唑醇与5种不同作用机制杀菌剂异菌脲、福美双、百菌清、苯醚甲环唑和多菌灵的敏感性以及对戊唑醇与5种不同作用机制杀菌剂交互抗药性研究。结果表明：戊唑醇和多菌灵对禾谷镰

4、孢菌菌丝生长具有强烈的抑制活性。戊唑醇与5种不同作用机制杀菌剂的EC50值之间进行线性回归分析表明戊唑醇与上述5种不同作用机制杀菌剂之间均无交互抗药性。3．通过紫外线诱导和药剂驯化的方法获得了9株禾谷镰孢菌对戊唑醇的抗药性突变体，其抗药性水平范围为34．26—186．03，抗药性突变频率分别为1．11％和0．91％。按照FAO分级标准，这些抗药性突变体的抗药性水平根据EC50值的大小可划分为低、中、高3种类型，分别为2．0～20I上g／mL(LR)、20．1～100}tg／mL(MR)和>100lag／mL(HR)。在无药PD

5、A培养基上，将抗药性突变体菌丝继代培养17代数后有5株抗药性突变体保持高抗药性水平。抗药性突变体生物学性状的研究结果表明：与亲本菌株相比，抗药性突变体在菌丝生长速率、菌丝干重、致病力、适合度几个性状方面差异不明显。综上所述，禾谷镰孢菌对戊唑醇存在中等或高抗药性风险。因此，戊唑醇的连续使用有利于抗药群体的发展，为避免和延缓抗药性的产生，生产上应将其与其他无交互抗药性的杀菌剂交替使用。4．比较禾谷镰孢菌对戊唑醇的抗药性突变体和亲本菌株的生理学指标。结果表明：亲本菌株和抗药性突变体菌丝生长受KCl和葡萄糖影响较大，且KCl和葡萄糖在

6、不同浓度处理后所有菌株之间的渗透压均存在显著性差异，故得知KCl和葡萄糖均能为禾谷镰孢菌提供营养和抑制其渗透。高浓度戊唑醇处理能使抗药性突变体体内渗漏出较多的内含物，随着处理时间的延长和浓度的提高，其内含物渗漏增多。因此这些结果可能是禾谷镰孢菌对戊唑醇产生抗药性的原因。5．用菌丝生长速率法测定戊唑醇与百菌清11个复配配比混合物的联合毒力。结果表明：1：11混配时，其增效系数(SR值)最大为84．38。由此可以看出，戊唑醇和百菌清以一定的比例进行二元复配对禾谷镰孢菌有很好的抑制作用，在田问合适的使用其复配制剂，可以降低该药剂产生

7、抗药性的风险。关键词：禾谷镰孢菌；戊唑醇；交互抗药性；抗药性风险评估；抗药性机制StudiesontheResistant砌skAssessmentandResistanceMechanismofFusariumgraminearumtoTebuconazoleAuthor：YeTaoSupervisor：SeniorresearchfellowMaZhi—qiangandAssociateprofessorZhangLin-huiMajor：FungicidesAbstractFusariumheadblight(FHB)o

8、fwheat，causedbyFusariumgraminearumSchwade，isoneofthemosteconomicallyimportantdiseasesworldwideandcontrollingobjectonwheatprodutionathomean