牛心朴子内生真菌多样性及次生代谢产物研究

牛心朴子内生真菌多样性及次生代谢产物研究

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1、分类号:R9单位代码:10752密级:公开学号:2009042宁夏医科大学硕士研究生学位论文牛心朴子内生真菌多样性及次生代谢产物研究StudyonthediversityandthesecondarymetabolitesofendophytesfromCynanchumkomarroviiAl.Iljinski学位申请人:李娜指导教师:戴贵东教授合作指导教师:陈靖副教授申请学位门类级别:医学专业名称:药理学研究方向:心血管药理学所在学院:药学院论文完成日期:二零一二年五月宁夏医科大学研究生学院NingxiaMedi

2、calUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeStudyonthediversityandthesecondarymetabolitesofendophytesfromCynanchumkomarroviiAl.IljinskiStudent‟sName:NaLiSupervisor:Prof.GuidongDaiAssistantsupervisor:A.P.JingChenSubjectCategory:MedicalScienceMajor:Pharmacol

3、ogySpecialty:CardiovascularPharmacologySchool:NingxiaMedicalUniversityCompletionDate:May.2012宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。

4、论文作者签名_____论文导师签名_____年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文,同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名_____论文导师签名_____年月日年月日宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要牛心朴子内生真菌

5、多样性和次生代谢产物研究摘要目的内生真菌是指存活于健康植物组织和器官内部,而不引起宿主植物明显病害症状的真菌,具有极其丰富的多样性。近年来的研究表明内生真菌可以产生结构新颖,活性独特,甚至是与宿主结构相同或相似的天然产物。本课题以沙生植物牛心朴子(CynanchumkomaroviiAl.Iljinski)为实验材料,对采自宁夏古窑子、陕西榆林两个不同地区野生新鲜植株,进行内生真菌的分离、鉴定及代谢产物的抗真菌活性研究,并对活性菌株发酵物进行化学成分的分离、鉴定。方法采用组织分离法,在PDA培养基上分离植株内生真菌,

6、并对分离得到的内生真菌进行形态及分子鉴定;对分离得到的菌株进行发酵培养,发酵物采用平板对峙法,以稻瘟霉模型对其代谢产物进行抗真菌、抗肿瘤活性筛选;在活性追踪指导下,采用现代色谱分离及鉴定技术,对活性菌株乙酸乙酯提取物进行化学成分的分离和结构解析。结果分离得到内生真菌103株,其中宁夏产地47株,由根中分离得到5株,茎中分离得到14株,叶中分离得到28株;采用形态学观察以及分子鉴定方法,对分离得到的内生真菌进行鉴定,归9个属,分别为Epicoccum、Schizophyllum、Ustilago、Fusarium、Co

7、smospora、Gibberella、Leptosphaerulina、Lewia、Alternaria;陕西产地56株,由根中分离得到16株,茎中分离得到18株,叶中分离得到13株,花中分离得到9株,采用形态学观察以及分子鉴定方法,对分离得到的内生真菌进行鉴定,归8个属,分别为Schizophyllum、Lanzia、Nectriaceae、Fusarium、Gibberella、Hypocrea、Paraphoma、Alternaria。通过初步筛选,发现其中2株L4(Dothideomycetidae-Epi

8、coccum)、S17(Pleosporales-Phaeosphaeriaceae-Paraphoma)表现出较强的抑菌活性。从活性菌株L4发酵物中(8.3g)分离得到43个单体化合物,确定了其中5个化合物的结构,分别为对羟基苯甲醛、尿嘧啶苷、L-焦谷氨酸、甲基焦谷氨酸、蔗糖。宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要结论:牛心朴子内生真菌具有丰

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